Imunologia Clínica

Testes Sorológicos
 Os Anticorpos;
 Ensaios de Aglutinação;
 Ensaios Imunocromatográficos.

Dr Prof. Clayton Lima

 Testes Sorológicos
• O que são os Testes Sorológicos ou imunoensaios?
São técnicas para a detecção ou quantificação de antígenos ou anticorpos, podendo utilizar
reagentes marcados ou não marcados
• Qual a principal carcaterística dos ensaios com reagentes não marcados (como os ensaios de
aglutinação, por exemplo) e marcados?
São menos sensíveis, sendo necessário uma grande quantidade de imunocomplexos para
visualização do resultado
O uso de reagentes marcados (com enzimas, fluorocromos ou substâncias luminescentes, por
exemplo) torna o teste mais sensível.
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• Em qual classes ou isotipos os anticorpos (imunoglobulinas) são agrupados?
IgM, IgG, IgA, IgE e IgD
Os anticorpos são moléculas fundamentais nos imunoensaios.
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 Ensaios de aglutinação
1. Microaglutinação
• Microaglutinação indireta
é um tipo de aglutinação que utiliza placas de microtitulação, que são placas de plástico com
microcavidades em forma de U ou V;
há testes disponíveis para pesquisa de anticorpos contra Treponema pallidum, Toxoplasma gondii,
Trypanosoma cruzi e outros;
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 Ensaios de aglutinação
1. Microaglutinação
• Técnica:
a. Em caso de ausência de anticorpos, não ocorre aglutinação e as hemácias precipitam na cavidade,
formando um botão compacto no fundo da microcavidade;
b. Quando o resultado é positivo, ou seja, há anticorpos na amostra do paciente, ocorre a aglutinação na
superfície do poço.
c. Quando o aspecto não é claro entre homogêneo e
botão, tem-se o resultado inconclusivo, sendo
recomendada a repetição do teste.
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 Ensaios de aglutinação
1. Microaglutinação
1.1. VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) e Sífilis
• A sífilis é uma doença:
- infectocontagiosa sistêmica
- evolução crônica
- manifestações cutâneas temporárias
- provocadas pela bactéria Treponema pallidum;
- principal forma de transmissão da sífilis é por via sexual
• O teste de VDRL tem como princípio a floculação (variação da aglutinação indireta) onde as interações
antígeno-anticorpo formam imunocomplexos detectáveis com auxílio de microscópio;
• VDRL é um teste de triagem (teste não treponêmico), pesquisarem anticorpos não treponêmicos
Não são específicos para o Treponema pallidum, mas são específicos para os metabólitos da
bactéria
• Presença da bactéria (teste treponêmicos)
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 Ensaios/Testes imunocromatográficos
• São conhecidos popularmente por testes rápidos
• Rapidez na sua execução e conhecimento do resultado;
• Testes de triagem, sensíveis, fáceis de serem executados
• Não exigem uma estrutura laboratorial para sua realização
Para um teste:
• Positivo e válido as linhas T e C estejam coradas;
• Negativo ou Não reagente, somente a linha C aparecerá;
• Quando somente a linha T aparecer ou nenhuma das
duas linhas aparecerem, o teste é considerado inválido.
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 Ensaios imunocromatográficos
1. Marcadores sorológicos nas Hepatites virais
• No Brasil o Ministério da Saúde disponibiliza testes rápidos na busca de infecções ativas por hepatites
B e C;
• Para a Hepatite B o teste rápido detecta o HBsAg → antígeno de superfície do vírus
amostras de sangue total, plasma ou soro
• Para Hepatite C o teste detecta anticorpos anti-HCV
soro, plasma, sangue total ou fluido oral
Obs: Em caso de resultado negativo, mas permanecendo a suspeita de infecção, deve-se realizar o teste
rápido com nova amostra após 30 dias.
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 Ensaios imunocromatográficos
1. Marcadores sorológicos nas Hepatites virais
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 Ensaios imunocromatográficos
1. Marcadores sorológicos nas Hepatites virais
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 Ensaios imunocromatográficos
2. Marcadores sorológicos da infecção por HIV
• Imunocromatografia é utilizada na triagem para o diagnóstico do vírus da imunodeficiência humana;
• Mesmo após um resultado Imunocromatografico positivo é necessária a realização de um teste
confirmatório, por método imunoenzimático ou de biologia molecular;
• Os testes rápidos disponíveis no Brasil, em sua maioria, detectam anti-HIV 1 e anti-HIV 2
• Existem testes rápidos que detectam também a proteína p24 (antígeno viral) que se eleva na corrente
sanguínea antes da soroconversão (início da produção de anticorpos)
Obs: Todas as amostras com resultados positivos ou inconclusivos nos testes de triagem devem passar por
um exame confirmatório.
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 Ensaios imunocromatográficos
2. Marcadores sorológicos da infecção por HIV
 Bibliografia
• Disponível em: <https://engcivil20142.files.wordpress.com/2015/08/ligac3a7c3b5es-quc3admicas-e-materias-
cerc3a2micos.pptx>. Acesso em: 3 abr. 2023g.
• Docsity. Disponível em: <https://www.docsity.com/payments/index/pay-points/?
content_type=document&content_id=5933650&point_type=blue>. Acesso em: 3 abr. 2023.
• Disponível em: <https://slideplayer.com.br/slide/1353609/3/images/6/Semimetais+A-
MetaL+Metais+Gases+Nobres+Lantan%C3%ADdios+Actin%C3%ADdios.jpg>. Acesso em: 3 abr. 2023h.
• Fernandes, Epifanio - Imunologia Clínica na Prática – Farmaceuticando, 2022