Guião de exploração de simulador: Teste ELISA

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Data: Professor:

Com a presente simulação pretende-se explorar o método ELISA na testagem de amostras de

sangue para despiste de determinadas doenças.
O método ELISA é uma técnica laboratorial que consiste num ensaio imunoenzimático, no qual
se quantificam determinadas proteínas específicas, permitindo verificar se um paciente tem anticor-
pos para determinadas doenças, tornando-se, desta forma, útil para diagnósticos médicos.
Neste laboratório, pode realizar um teste ELISA virtual, para a determinação de um dado anti-
corpo numa amostra sanguínea, envolvendo-se, assim, em práticas labotoriais relevantes, incluindo
a interpretação de dados. Este laboratório apresenta um espaço de laboratório interativo, um
caderno informativo e perguntas incorporadas. Inclui, ainda, recursos complementares, como, por
exemplo, um glossário de termos científicos (em inglês).

1. Aceda ao site hhmi | BioInteractive através do endereço https://www.biointe-

ractive.org/classroom-resources/immunology-virtual-lab, ou através do QR code:

Início da
simulação

Figura 1. Página de acesso ao simulador, com destaque para o botão de início.

2. Clique no botão Start Interactive, que abrirá uma nova janela.

3. Selecione o botão Click to enter the lab, após ler as informações disponibilizadas.

Figura 2. Janela de abertura do laboratório virtual.

4. Siga as instruções que vão sendo fornecidas no ecrã, selecionando os objetos, os reagentes e
procedimentos corretos (separador Notebook).

Figura 3. Início da realização do teste ELISA.

5. Registe, no final, os resultados obtidos no Lab Notebook. Para isso, devem ser assinalados os
locais da placa que se encontram coloridos a amarelo. O simulador compara, depois, os resulta-
dos obtidos com os que seriam expectáveis, indicando se houve erros na execução da atividade.

Figura 4. Resultados do teste ELISA.

5.1. Indique o significado da presença de cor nos diferentes poços da placa, no final do proce-
dimento.
5.2. Refira a importância da utilização de controlos nesta atividade experimental.

5.3. Registe os resultados obtidos. Indique o significado destes resultados para cada um dos
pacientes A, B e C.
A B C Positivo Negativo
1:2

1:10

1:100

Significado

5.4. Explique por que motivo um resultado positivo, confirmando a presença de anticorpos,
não significa, necessariamente, que o individuo se encontre doente.
 Proposta de resolução
Teste ELISA

5.1.A presença de um determinado anticorpo de interesse na amostra utilizada, ou seja, um resultado

positivo.
5.2.Os controlos permitem uma comparação com os resultados da amostra, de modo a concluir se o
resultado é positivo ou negativo. Permitem, também, verificar se o procedimento experimental
funcionou corretamente.
5.3.
A B C Positivo Negativo

1:2

1:10

1:100
O paciente B pode
O paciente A, apresentar a O paciente C,
Significado provavelmente, doença, mas são provavelmente, não
apresenta a doença. necessários mais apresenta a doença.
testes.

5.4. Um resultado positivo, de um procedimento realizado corretamente e que identifica a presença de

um anticorpo, não significa, necessariamente, que o paciente está doente, pois o paciente pode
continuar a produzir anticorpos mesmo depois de recuperar de uma determinada doença. Por outro
lado, algumas pessoas podem produzir poucos anticorpos e a quantidade de anticorpos pode ser
demasiado baixa para ser medida com precisão, pode mesmo passar despercebida. Este resultado é
denominado um falso negativo.
Para além disto, um resultado positivo pode ocorrer se um anticorpo não relacionado reagir com o
antigénio de forma não específica. No entanto, ao contrário de um resultado verdadeiro-positivo, em
que o anticorpo específico é detetado, esta reação positiva é falsa.