INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E

TECNOLOGIA DO RIO DE JANEIRO

IFRJ
Unidade Duque de Caxias

PRTICA DE ANLISE INSTRUMENTAL I

Lei de Lambert-Beer

rofessores: Adney Luis, Letcia Coli e Priscila Maia

P
Curso Tcnico em Petrleo e Gs
Turma PGC 341
Integrantes: Las dos Santos
Lyslaine Fernandes
Matheus Lucas
Ray Siqueira
Regiane Ribeiro

Maio/2017
 Sumrio

Item Descrio Pgina

1 Objetivos......................................................................................... 2
2 Metodologia.................................................................................... 2
3 Resultados experimentais............................................................... 4
4 Discusso dos resultados................................................................ 8
5 Concluso....................................................................................... 10
6 Referncias bibliogrficas.............................................................. 10
1. Objetivos

Realizar leituras absorciomtricas de solues padro de magenta em diferentes

concentraes a fim de se construir uma curva analtica. A partir desta curva,
determinar a concentrao da soluo original cuja absorbncia foi medida em
equipamentos diferentes e analisar a sensibilidade de cada equipamento, utilizando
tcnicas de procedimento adequados e seus fundamentos tericos alm de estimular a
busca de informaes sobre assuntos pertinentes prtica.

2. Metodologia
2.1 Preparo da soluo-me de tinta de impressora
A soluo-me de Magenta foi obtida a partir de tinta padro comercial e foi
previamente preparada pelos monitores do laboratrio.

2.2 Preparo das solues para a varredura espectral

A partir da soluo-me de Magenta, realizou-se sucessivas diluies a fim de
produzir solues padres de calibrao, que so solues semelhantes soluo de
amostra com concentrao conhecida da espcie de interesse (analito). As
concentraes escolhidas foram as seguintes: 0,024mL/L; 0,06mL/L; 0,12mL/L;
0,24mL/L; 0,30mL/L; 0,60mL/L: 0,84mL/L; 0,96mL/L e 1,20mL/L.

2.3 Procedimento para a varredura espectral

Para otimizar a anlise, cada grupo analisou as amostras adotando um
equipamento diferente: Ocean Optics - USB2000+, Femto Espectrofotmetro 800 XI,
Edutec SP200 e Cl-3003 Photometer. Em seguida, o nosso grupo executou a leitura do
espectro de varredura em Transmitncia e Absorbncia dos padres de calibrao no
espectrofotmetro Ocean Optics USB2000+.
Para que no houvesse interferncia na medio, realizou-se a calibrao do
espectrofotmetro atravs da leitura de absortividade do Branco (100% T) e do escuro
(0%T). Para o branco, transferiu-se aproximadamente 3,5 mL de gua deionizada para
uma cubeta de vidro transparente de 10 mm, em seguida secou-se cuidadosamente com
leno de papel antes da insero no espectrofotmetro. Para o escuro, utilizou-se uma
cubeta totalmente escura, sem presena de nenhuma amostra para que no houvesse a
possibilidade da passagem de energia (luz).
Para a leitura de absorbncia de cada amostra, adotamos o critrio de anlise a
partir da soluo menos concentrada para a soluo mais concentrada. Evitando assim
que, a cubeta fosse lavada previamente com gua deionizada ou realizada rinsagem com
a prxima amostra a ser analisada no equipamento.
Aps a varredura espectral, efetuou-se clculos atravs das regresses lineares
dos resultados obtidos no equipamento utilizado para descobrir a concentrao da
soluo utilizada no experimento. Em seguida, foi analisada a sensibilidade de cada
equipamento.
 3. Resultados experimentais
3.1 Tabela 1: Resultados obtidos na varredura espectral

Concentrao Ocean Optics - Femto Edutec SP 200 Cl-3003

(mL/L) USB2000+ Espectrofotmetro Photometer
800 XI

0,000 0,000 0,000 0,000 0,00

0,024 0,038 0,025 0,034 0,04

0,060 0,160 0,138 0,148 0,12

0,120 0,173 0,124 0,136 0,13

0,240 0,241 0,224 0,207 0,17

0,300 0,433 0,366 0,375 0,25

0,600 0,742 0,877 0,697 0,44

0,840 0,990 0,718 0,950 0,49

0,960 1,122 1,068 1,105 0,53

1,200 1,347 1,093 1,360 0,55

Equao da reta y=1,1239x + 0,0339 y=1,4984x -0,00676 y=1,1451x- 0,0052 y=0,6837x+ 0,0304
R2= 0,9934 R2= 0,9727 R2= 0,9965 R2= 0,9872

Concentrao da
amostra original 2,58 1,55 2,38 2,73
(mL/L)
3.2 Regresses lineares obtidas em cada equipamento
Figura 1: Ocean Optics USB2000+

Figura 2: Espectro de absoro obtido no Ocean Optics USB2000+

Figura 3: Edutec SP200

Figura 4: Femto Espectrofotmetro 800 XI

 Figura 5: Cl-3003 PHOTOMETER

3.3 Clculos da concentrao da soluo me

Um dos objetivos propostos foi a determinao da concentrao da soluo-me.
O primeiro passo foi comparar, visualmente, a cor da soluo me com uma das
respectivas amostras para determinar em quantas vezes ela deveria ser diluda at que
sua absorbncia estivesse dentro dos valores obtidos na curva analtica. Utilizando o
fator de diluio 5, pipetou-se 2,0 mL da soluo-me, transferiu-se para um balo
volumtrico de 10,0 mL e completou-se o volume com gua destilada at o menisco.
Em seguida, a soluo foi analisada no Espectrofotmetro Ocean Optics
USB2000+. Como a soluo foi utilizada em experimento anterior, conhecia-se o
comprimento de onda onde o sinal era mximo (550nm) obtendo uma absorbncia de
0,614.
Utilizando a equao da reta disponibilizada pelo grfico e multiplicando-se o
valor obtido pelo fator de diluio, a concentrao inicial da soluo-me foi de 2,58
mL/L, resultado prximo tambm se tivesse sido realizada a interpolao do grfico.

y= ax+b 0,614= 1,1239x + 0,0339 x= 0,516149123 mL/L x 5= 2,58mL/L

4. Discusso dos resultados
Observando os grficos obtidos a partir das anlises realizadas em diferentes
equipamentos, considerou-se o Espectrofotmetro Edutec SP200 o equipamento que
apresenta melhor sensibilidade devido ao fato de que, dentre os equipamentos, o que
melhor distingue duas concentraes muito prximas, melhor resposta do equipamento e
tambm o maior sinal no comprimento de onda mximo. No entanto, consideramos
tambm o Espectrofotmetro Ocean Optics USB2000+ como um equipamento sensvel
neste experimento.

Vale ressaltar que, durante o experimento foi necessria a retirada do valor da

absorbncia obtida na leitura da soluo de concentrao 0,06 mL/L, medida que deve ser
evitada a todo custo. O valor de absorbncia obtido para esta soluo excedeu o resultado
esperado ocasionando uma reduo na linearidade dos pontos. Um dos possveis motivos
para o comportamento dessa amostra pode ter sido falha tcnica: o erro na pipetagem do
volume inicial no preparo desta soluo pode ter ocasionado diferena na concentrao
final e consequentemente o erro na hora da leitura da absorbncia, o que explicaria o
valor inequvoco obtido por todos os equipamentos.

No Femto Espectrofotmetro 800 XI e no Cl-3003 PHOTOMETER tambm

foram retirados os trs pontos extremos ficando somente com as cinco primeiras
medies, pois estes faziam com que o R2 tivesse um valor bem distante de 1,0 devido
sensibilidade do instrumento que no apresentava resultados precisos e eficientes para
aquelas faixas de concentraes.

Em anlise quantitativa, quanto mais cromforo (substncia que absorve luz)

uma soluo tiver, mais escura ela ser. A fotometria utiliza este princpio para
determinar a concentrao de substncias cromforas. A preciso deste mtodo, porm,
no adequada devido s propriedades da viso e tambm do componente subjetivo,
que sempre que possvel deve ser eliminado na quantificao. A vantagem do
espectrofotmetro sobre o fotocolormetro a maior seletividade no comprimento de
onda.
As solues padres so essenciais para a construo da curva analtica, que a
base para a determinao das concentraes das amostras. A vantagem de se utilizar a
curva analtica para determinar a concentrao da amostra que o ajuste da melhor reta
entre os pontos proporciona uma maior confiabilidade para o resultado.
A sensibilidade de um mtodo espectrofotomtrico (ou fotomtrico) governada
pela absortividade molar da espcie absorvente. Os fatores que podem mudar a
absortividade molar da espcie absorvente so: a estrutura eletrnica da molcula
absorvente, ou seja, dos tipos de transies possveis que ela pode sofrer, probabilidade
de transio, comprimento de onda da radiao incidente, natureza do solvente, o ndice
de refrao do meio (ni), pH da soluo, a temperatura, as concentraes do eletrlito e
a presena de substncias interferentes.

Quanto ao ndice de refrao do meio, esse parmetro pode aumentar

significativamente em solues concentradas, desviando parte da luz e diminuindo a
intensidade detectada. O equipamento de deteco tambm pode representar uma fonte
de erro, principalmente em concentraes muito baixas ou muito elevadas, nas quais a
intensidade de luz transmitida muito prxima ou muito distante, respectivamente, da
intensidade do feixe que no passa pela amostra, fazendo com que as comparaes
sejam muito menos precisas.
Aps anlise crtica, destacamos como possveis fontes de erro associadas ao
experimento: erros aleatrios relativos leitura dos diversos aparelhos volumtricos
(como pipeta, bureta e proveta), pois uma leitura sendo realizada por dois analistas no
ser concordante, j que cada um tem o seu critrio para realizar interpolaes entre as
marcas da escala, e at um analista lendo o mesmo instrumento diversas vezes pode
obter leituras diferentes; a tomada de alquota (paralaxe); presena de contaminantes na
vidraria; o erro de leitura inerente ao prprio aparelho (na ida e vinda do ajuste da rede
de difrao, ela no volta exatamente para o mesmo lugar) juntamente com seu rudo;
perda de reagente durante a manipulao (reteno de gotculas); homogeneizao
indevida da soluo; equipamento descalibrado; diferena de absorbncias entre as
cubetas (resduos de impresses digitais, arranhes devido limpeza com papel e
entrada de poeira).
5. Concluso
A partir deste experimento, pde-se comprovar o efeito dos Desvios na Lei de
Lambert-Beer. Como a Lei de Lambert-Beer somente se aplica quando os centros
absorventes no interagem uns com os outros, ou seja, em concentraes muito
pequenas. As concentraes limites at as quais esta lei obedecida situam-se na faixa
de 10-2M para a maioria dos compostos. At estas concentraes as molculas interagem
predominantemente com o solvente.
Em concentraes superiores, iniciam-se interaes tambm entre as molculas
do soluto (cromforo), fazendo com que os picos de absorbncia sejam alterados, pois o
espectro caracterstico daquela substncia em um determinado solvente.
Em concentraes muito altas, as interaes entre as molculas do soluto se
tornam to elevadas que predominam sobre as interaes solvente-soluto, fazendo com
que o prprio soluto aja como solvente, produzindo alteraes na absorbncia.
Conclui-se tambm que fundamental conhecer a amostra analisada,
compreender os fundamentos da Lei de Lambert-Beer, os conhecimentos analticos
sobre espectrofotometria e utilizar os procedimentos corretos de anlise qumica e
instrumental no intuito de diminuir possveis erros inerentes ao processo, ferramentas
estas necessrias para uma correta anlise crtica dos resultados obtidos.

6. Referncias Bibliogrficas

LUIS, ADNEY. et al. Anlise instrumental 1- espectrofotometria molecular na

regio do UV-Vis. Anlise Instrumental IFRJ, Duque de Caxias.

SKOOG, D.A.; WEST, D.M.; HOLLER, F.J; STANLEY, R.C. Princpios de

Qumica Analtica. 1 Ed. So Paulo: Thomson, 2006.

HARRIS, D.C., Anlise Qumica Quantitativa, 5 Ed., LTC Editora, Rio de

Janeiro, 2001.

http://www.ufrgs.br/biofisica/Bio10003/Metfoto.pdf Acesso em 30/05/2017 s

20:34h