Relatórios das Aulas Práticas

PERMEAÇÃO DE SOLUTOS EM HEMÁCIAS

1. Introdução
As células são constituídas por citoplasma, núcleo e organelas. A membrana que
envolve as células separa o interior da mesma do meio extracelular, esta membrana
contém poros que permitem a passagem de substancias. As hemácias são células
anucleadas, constituídas apenas por membrana plasmática e citoplasma. Elas se
encontram em equilíbrio osmótico com o meio extracelular, devido à circulação
sanguínea e o transporte de oxigênio e energia, que é utilizado pelas ATPases NA+ e
K+ da membrana, como fonte de energia para o bombeamento de Na+ do interior para o
extracelular e K+ do meio extracelular para o intracelular. As hemácias originam-se na
medula óssea pela proliferação e maturação dos eritoblastos. As funções primordiais dos
glóbulos vermelhos são a de transportar oxigênio dos pulmões para os tecidos,
mantendo a perfusão tissular adequada, e transportar CO2 dos tecidos para os pulmões,
a vida das hemácias é relativamente curta, entre 100 e120 dias na circulação, sendo
removidas e renovadas as hemácias velhas da circulação. As hemácias tem uma forma
homogênea de corpúsculos circulares bicôncavos, e de tamanho relativamente uniforme;
permitindo assim as hemácias variarem o volume, principalmente aumentar, sem que
haja estiramento da membrana. Quando ultrapassado o volume critico, a hemácia atinge
uma forma esférica, atingindo aumentos subsequentes de volume, acontecendo assim
hemólise com liberação de conteúdo celular para o meio extracelular.

2. Objetivos
Demonstrar aspectos relacionados ao movimento de água na membrana celular.

3. Metodologia
Para o desenvolvimento da aula prática foi utilizado uma bateria de 11 tubos de
ensaio previamente identificados. Foi pipetado soluções de NaCl de concentrações
decrescentes, obtidas por mistura de H2O destiladas nas seguintes proporções, em ml:
0/10; 1/9; 2/8; 3/7; 4/6; 5/5; 6/4; 7/3; 8/2; 9/1 e 10/0. Posteriormente foi adicionado 3
gotas de sangue a cada um dos tubos. A mistura foi homogeneizada por agitação.
Para segunda parte da aula pratica foi utilizado 10 ml das soluções abaixo
discriminadas em tubos de ensaio previamente identificados: NaCl 500 mM e 1000
mM; uréia 300 mM e 500 mM; sacarose 300mM e 500 mM e cloreto de amônia
150Mm. A mistura foi homogeneizada por agitação.

4. Resultados
Para a obtenção dos resultados, utilizou-se de fórmulas já prontas que iriam
auxiliar na determinação da concentração de NaCl em cada amostra, da osmolaridade e
do valor da pressão osmótica (atm).
 Para calcular-se a concentração usou-se a fórmula básica da regra de três,
sabendo-se que na primeira amostra havia 150 ml de NaCl, assim fazendo a proporção
de quantidades presentes nas amostras subsequentes. Notou-se que esse valor diminuía
sempre com a proporção de menos 15 mM a cada amostra analisada, chegando a 0 mM
na amostra de número 10, qual só havia água.
Para a obtenção da osmolaridade que é dada em mOsm/L, usou-se da fórmula
seguinte:
Onde: i = o número de moléculas existentes, no caso duas, uma de sódio (Na) e outra de
cloro (Cl);
C = concentração de NaCl, calculada anteriormente,
x = osmolaridade em mOsm/L.
Para o cálculo da pressão osmótica, também se usou de uma fórmula já pronta, que é a
seguinte:
Onde: π = é a pressão medida em atm;
R = é a pressão exercida pela célula (hemácia), que vale 0,082 atm/mosmol/L;
T = é uma constante de temperatura, também da célula (hemácia), que vale 300 K;
i = o número de moléculas existentes, no caso duas, uma de sódio (Na) e outra de cloro
(Cl);
C = concentração de NaCl.

5. Discussão
A hemólise é a destruição prematura das hemácias (glóbulos vermelhos) por
rompimento da membrana plasmática, que resulta na liberação de diversos componentes
intracelulares como a hemoglobina.
Foi construída uma tabela, com o objetivo de apresentar os valores registrados
nos tubos da primeira parte da pratica para hemólise.

Tubo NaCl (ml) H2O NaCl (mM) Osmol mOsm/l Π (atm) ΔΠ Hemólise
(ml)
C1.v1= c2.v2 NaCl (mM) . 2 7,38-x

1 10 ml 0 ml C2=150 mM 300 mOsm/l 7,38 atm 0 -

2 9 ml 1 ml 150.9=c2.10 270 mOsm/l 6,642 atm 0,738 -

C2= 135 mM
3 8 ml 2 ml 150.8=c2.10 240 mOsm/l 5,904 atm 1,476 -
C2= 120 mM
4 7 ml 3 ml 150.7=c2.10 210 mOsm/l 5,166 atm 2,214 -
C2=105 mM
5 6 ml 4 ml 150.6=c2.10 180 mOsm/l 4,428 atm 2,952 -
C2=90 mM
6 5 ml 5 ml 150.5=c2.10 150 mOsm/l 3,69 atm 3,69 +
C2=75 mM
7 4 ml 6 ml 150.4=c2.10 120 mOsm/l 2,952 atm 4,428 +
C2=60 mM
8 3 ml 7 ml 150.3=c2.10 90 mOsm/l 2,214 atm 5,166 +
C2=45 mM
9 2 ml 8 ml 150.2=c2.10 60 mOsm/l 1,476 atm 5,904 +
C2=30 mM
10 1 ml 9 ml 150.1=c2.10 30 mOsm/l 0,738 atm 6,642 +
 C2=15 mM
11 0 ml 10 ml 150.0=c2.10 0 mOsm/l 0 atm 7,38 +
C2=0 mM

Foi construída uma tabela, com o objetivo de apresentar os valores registrados

nos tubos da segunda parte da pratica para hemólise.

Tubo Soluto ( ) mM Osmol Comparação Tonicidade Hemólise

mOsm/l 300mOm/l

1 NaCl 500 1000 Hiperosmótico Hipertônico -

mM mOsm/l
2 NaCl 1000 2000 Hiperosmótico Hipertônico -
mM mOsm/l
3 Uréia 300 300 Isosmótico Hipotônico +
mM mOsm/l
4 Uréia 500 500 Hiperosmótico Hipotônico +
mM mOsm/l
5 Sacarose 300 300 Isosmótico Isotônico -
mM mOsm/l
6 Sacarose 500 500 Hiperosmótico Hipertônico -
mM mOsm/l
7 NH4Cl 150 300 Isosmótico Hipotônico +
mM mOsm/l

6. Conclusão
Em virtude dos fatos mencionados, conclui-se que a concentração da solução
interfere no perfil das hemácias fazendo com que adquiram formas diferentes. E que o
processo de osmose pôde ser bem visualizado principalmente nas amostras que as
hemácias ficaram túrgidas devido a entrada de água para dentro delas.