1. CASOS CLÍNICOS 1: A- Caracterize o método ELISA R: O ELISA é um método imunoenzimático baseado em reações antígeno-anticorpo capaz de ser detectado através de reações enzimáticas.
B- Determine os tipos de ELISA frequentemente empregados
R: Os tipos de ELISA frequentemente empregados são: ELISA direto, ELISA indireto, ELISA de captura e ELISA de competição.
C- Determine as principais vantagens para o emprego dessa técnica
R: As principais vantagens do ELISA de captura são: a capacidade de detectar antígenos; dosagem de proteínas séricas, hormônios e citocinas.
D- Explique as etapas realizadas no método de ELISA abordado na situação
acima.
R: No método de elisa de captura, é usado um anticorpo para um antígeno específico,
denominado como anticorpo de captura é adicionado na placa. Depois, a amostra do soro do paciente, onde está o antígeno, é adicionado e se liga a esse anticorpo presente no poço. Em seguida, é adicionado um segundo anticorpo específico para o antígeno do soro. Depois, um terceiro anticorpo ligado a uma enzima será adicionado. Essa enzima reage com o substrato adicionado e gera um produto, dando origem a uma cor.
2- Caracterize o método de imunocromatografia. Defina o método
R: O método de imunocromatografia é um teste rápido que visa a detecção de doenças infecciosas através da interpretação das listras coloridas do exame. O exame pode ser o de fluxo lateral, o de dupla migração, o de aglutinação e o de fase sólida.
3: A- Explique o método de imunofluorescência empregado
R: A imunofluorescência indireta é um método onde é colocado em uma superfície ou lâmina os antígenos, e em seguida é colocado o soro do paciente. Caso o paciente tenha anticorpos para aqueles antígenos, haverá a formação de complexos antígeno-anticorpo. Depois, são adicionados anticorpos marcados com fluorocromos, que se ligarão aos anticorpos produzidos pelo paciente.
B- Explique o método de aglutinação indireta
R: A aglutinação indireta é um método que exige o uso de um suporte para os antígenos ou anticorpos, sendo utilizadas partículas inertes, como por exemplo o látex.
4- Determine se as afirmativas abaixo são verdadeiras (V) ou falsas (F). Justifique
as falsas. (F) O ELISA é um teste imunoenzimático que permite a detecção de anticorpos específicos, através da reação de floculação. R: A detecção é possível graças ao complexo enzima substrato, que gera um produto. (V) O teste de imunofluorescência é uma técnica baseada na ligação de anticorpos com fluorocromos. A imunofluorescência pode ser direta ou indireta. (F) O teste de precipitação é um teste quantitativo, baseado na presença de precipitados visíveis formados pela atração Ag-Ac. R: O teste de precipitação é um teste qualitativo e quantitativo (F) O teste de hemaglutinação gera agregação de eritrócitos devido à presença somente de anticorpos. R: os eritrócitos tem somente a presença de antígenos (ou não quando a pessoa apresenta 0 antígenos) (V) A reação de imunocitoquímica pode ser automatizada.
5- Diferencie imunodifusão simples da imunodifusão dupla.
R: No teste de imunodifusão simples o antígeno ou o anticorpo permanecem fixados no
gel, enquanto o outro se difunde até haver a formação do precipitado. Enquanto isso, na imunodifusão dupla, o antígeno e o anticorpo são colocados em dois pontos diferentes na camada de gel, migrando um contra o outro, e a precipitação ocorre na região de equivalência perpendicular a linha do eixo entre os orifícios. Cada linha em um espectro de precipitação corresponde a um par de Anticorpo-Antígeno.
6- O que caracteriza o método de citometria de fluxo e qual é a sua aplicabilidade
para a Imunologia Clínica. R: O método de citometria de fluxo é caracterizado por sua capacidade de quantificar, classificar e analisar as partículas microscópicas suspensas em um meio líquido. Sua aplicabilidade na Imunologia Clínica deve-se ao fator de possibilitar a identificação e contagem absoluta de populações de células imunes, tipagem de tecidos, estimulação de linfócitos e análise de citocinas.