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QUESTÃO-PROBLEMA
Como extrair o DNA a partir de células de tecidos vegetais?
INTRODUÇÃO TEÓRICA
Todos os seres vivos apresentam DNA nas suas células, esta molécula
armazena a informaçã o genética. Nas células eucarió ticas vegetais, a maior
parte do DNA encontra-se no nú cleo, nestas células, o DNA pode ser também
encontrado no interior de mitocô ndrias e dos cloroplastos.
Este á cido nucleico, DNA, é um polímero de nucleó tidos. Estes
conjuntos moleculares contém um grupo fosfato, uma pentose-
desoxirribose- e uma base azotada. Os nucleó tidos encontram-se ligados por
ligaçõ es fosfodiéster entre o grupo fosfato e o carbono 3 da desoxirribose
(5’->3’). Existem também ligaçõ es de hidrogénio entre as quatro diferentes
bases azotadas presentes no DNA, estas podem ser purinas-adenina e
guanina- ou pirimidinas-citosina e timina-, o que faz com que a molécula de
DNA tenha uma estrutura tridimensional em dupla hélice com duas cadeias
antiparalelas.
Uma célula eucarió tica vegetal apresenta parece celular e membrana
celular, logo para ser possível extrair o DNA é necessá rio destruir a parede
celular, triturando o material bioló gico, e a membrana celular, com o uso de
detergente. O sal é utilizado para neutralizar as cargas negativas do grupo
fosfato para o tornar menos solú vel. Existem também proteínas ligadas ao
DNA que dificultam o processo de extraçã o, para as remover é também
utilizado o sal, que aumenta a solubilidade das proteínas. É também
utilizado o etanol que cria um meio onde o DNA nã o se dissolve e pode ser
observado.
PROTOCOLO
MATERIAIS
Tomate maduro
Saco de plá stico com fecho hermético
Gobelé de 250 ml
Filtro de café
Funil
Tubos de ensaio e respetivo suporte
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Provetas de 100 ml
Pipeta de Pasteur
Colher de laborató rio
Á lcool etílico a 96%
Á gua
Detergente da loiça
Papel absorvente
Palito de madeira grande
Sal de cozinha
PROCEDIMENTO
1. Colocar dois tomates descascados dentro do saco de plá stico e
remover o ar do seu interior antes de o fechar hermeticamente.
2. Esmagar os tomates, pressionando o saco repetidamente entre
as duas mã os, até ficarem completamente desfeitos.
3. Colocar o funil com o filtro de café na abertura da proveta e
transferir o conteú do do gobelé para o filtro.
4. Adicionar o filtrado da proveta 50 ml de á gua, três gotas de
detergente da loiça e uma colher de sal. Misturar bem.
5. Distribuir a mistura obtida por tubos de ensaio.
6. Adicionar, com a ajuda da pipeta de Pasteur, á lcool etílico
arrefecido, deixando-a escorrer lentamente pela parede do
tubo de ensaio ligeiramente inclinado.
7. Observar a formaçã o de um precipitado esbranquiçado na fase
alcoó lica.
8. Recolher do á lcool, com um palito de madeira, uma amostra do
DNA
OBSERVAÇÕES
RESULTADOS
DISCUSSÃO
CONCLUSÃO
BIBLIOGRAFIA
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Odisseia – Biologia (Volume 1), 11º Ano – Jorge Reis, Antó nio
Guimarã es, Ana Bela Saraiva, Hugo Novais – Porto Editora (2022)
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