BIOLOGIA CELULAR E HISTOLOGIA

BIOTEC. MED. / FARM.

2022-2023

Tópicos a abordar:

- Mitocôndrias e Cloroplastos

MODELO EA.079.02
 MITOCÔNDRIA

q Apresenta um sistema duplo de membranas com um genoma próprio e várias

cópias de uma molécula de DNA que codifica algumas proteínas e
componentes do seu sistema de síntese proteica.

q Funcionam como as “fábricas” de produção de energia

q Forma de bastonetes;

q É o motor da célula, muito activa nas células

musculares;

q Seu conjunto é denominado de CONDRIOMA

MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E
S

A MAIOR PARTE DA ENERGIA QUE A

S
.
0
0
2

CÉLULA USA É FORNECIDA PELO ATP -

.
0
1

ENERGIA PARA?

MODELO EA.079.02
MITOCÔNDRIA

q A mitocôndria é o organito responsável pela transformação da energia

contida nos alimentos em energia metabólica (ATP). Estas transformações
designam-se, no seu conjunto, respiração celular.

q As mitocôndrias (grego mito: filamento e chondrion: grânulo) estão

presentes no citoplasma das células eucarióticas, sendo caracterizadas
por uma série de propriedades morfológicas, bioquímicas e funcionais.

q Geralmente, são estruturas cilíndricas com aproximadamente 0,5 μm de

diâmetro e vários micrômetros de comprimento.

q Uma célula humana contém, em média, cerca de 3000 a 5000 destes

organelos. Uma célula hepática normal pode conter de 1.000 a 1.600
mitocôndrias, enquanto alguns ovócitos podem conter até 300.000.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
MITOCÔNDRIA

ü As mitocôndrias são organelos notavelmente móveis e plásticos, mudando

constantemente a sua forma e mesmo fundindo-se umas com as outras e
separando-se novamente.

ü Possuem organização estrutural e composição rica em proteínas, lípidos,

ácidos nucleicos, e contêm um grande número de enzimas e coenzimas
que participam das reações de transformação da energia celular.
ü A maior parte dos lípidos são fosfolípidos e estão associados às suas
membranas.
ü As proteínas representam um grupo heterogéneo com funções vitais
para a mitocôndria.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E

ESTRUTURA MITOCÔNDRIA
S
S
.
0
0
2
.
0
1

MODELO EA.079.02
ESTRUTURA DA MITOCÔNDRIA

A membrana externa é lisa e fornece proteção,

Ø contém uma porina que a torna bastante permeável à maioria das

moléculas de dimensões reduzidas.

Ø Outras proteínas existentes nesta membrana incluem as enzimas

envolvidas na síntese de lípidos mitocondriais e enzimas que
convertem substratos lipídicos em formas que possam ser
subsequentemente metabolizados na matriz.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
 ESTRUTURA DA MITOCÔNDRIA

A membrana interna que está dobrada em pregas achatadas designadas cristas, que
aumentam grandemente a sua área. A membrana interna torna-se a única barreira
eficaz entre o citosol e a matriz. O número de cristas varia muito com a taxa
metabólica da célula.

Contém uma grande proporção de proteínas (76% do peso total) com três tipos de
funções:

q aquelas que conduzem as reações de oxidação da cadeia respiratória

q um complexo enzimático chamado ATPsintase, que produz ATP na matriz
q proteínas transportadoras específicas, que regulam a passagem para dentro e fora da
matriz. Uma vez que um gradiente eletroquímico é estabelecido, através dessa membrana
pela cadeia respiratória, para direcionar a ATPsintase, é importante que a membrana
seja impermeável a maioria dos pequenos iões. MODELO ESS.002.01

MODELO EA.079.02
 ESTRUTURA DA MITOCÔNDRIA

q A matriz é a região interna da mitocôndria, rodeada pela membrana interna. Contém uma mistura
altamente concentrada de centenas de enzimas, incluindo aquelas necessárias à oxidação do piruvato e
ácidos gordos e para o ciclo de Krebs. A matriz contêm também várias cópias do DNA mitocondrial,
ribossomas mitocondriais essenciais, RNAt, e várias enzimas requeridas para expressão dos genes
mitocondriais.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E
UMA MITOCÔNDRIA É ORGANIZADA EM QUATRO COMPARTIMENTOS
S
S
.
SEPARADOS. CADA COMPARTIMENTO POSSUI UM CONJUNTO ÚNICO DE
PROTEÍNAS QUE PERMITE A REALIZAÇÃO DAS SUAS FUNÇÕES DISTINTAS.
0
0
2
.
0
1

MODELO EA.079.02
Eletromicrografia de mitocôndria de uma célula pancreática mostrando a memb. externa lisa
e as numerosas invaginações da membrana interna - cristas. Notar também grânulos
escuros de alta densidade no seio da matriz provavelmente constituídos por um arcabouço
protéico ou lipoprotéico ao qual se prendem íons de metais (cálcio e magnésio). Além desse
componemtes distingue-se com certa dificuldade no interior da matriz regiões filamentosas
constituídas por filamento de DNA e ribossomas.
MODE
LO
MODELO EA.079.02
- As mitocôndrias estão localizadas próximos dos locais de alta utilização de ATP.

- Numa célula muscular cardíaca, as mitocôndrias situam-se próximas dos aparelhos

contrateis, nos quais a hidrólise do ATP fornece a energia para a contração.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
COMO TERÃO SURGIDO AS
MITOCÔNDRIAS?

TEORIA AUTOGÉNICA

A célula eucariótica teria surgido através da especialização de membranas

internas, derivadas de invaginações da membrana plasmática.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
COMO TERÃO SURGIDO AS
MITOCÔNDRIAS?
TEORIA ENDOSSIMBIÓTICA

Teoria proposta por Lynn Margulis.

A célula eucariótica seria o resultado da

associação de células procarióticas simbióticas
( Bactéria Rickettsia prowazeki – Nature, 1998);

A simbiose entre estas células procarióticas

teria evoluído para graus de intimidade tais que
algumas células envolveriam outras
completamente, embora as 1as ficassem
intactas no interior do hospedeiro;

MODE
LO
MODELO EA.079.02
MITOCÔNDRIA

TEORIA ENDOSSIMBIÓTICA
Factos que apoiam a teoria endossimbiótica

q Material genético igual entre procariontes e eucariontes;

q Simbiose é um processo muito comum no mundo vivo;

q Tamanho dos cloroplastos e mitocôndrias muito semelhante ao dos
procariontes atuais;

q Síntese proteica das mitocôndrias e cloroplastos é inibida por substâncias

inibidoras de procariontes (estreptomicina e cloranfenicol) mas não por
inibidores de eucariontes ( cicloheximida);

q a.a iniciador da cadeia polipeptídica de uma mitocôndria ou cloroplasto é

a formil-metionina, como nas bactérias e não a metionina, como nos
eucariontes. MODE
LO
MODELO EA.079.02
Factos que apoiam a teoria endossimbiótica:
q Existência de um genoma do organelo.
q Genoma compacto: Poucas sequências regulatórias; poucos (ou nenhum) íntrons;
semelhança com genoma de Rickettsia.
q A transcrição do genoma completo é contínua (lembra RNA policistrônico bacteriano).
q Ribossomas e processo de síntese protéica similares à procariotes – Inicia com uma
formil-metionina.
q Sensibilidade à antibióticos que afetam síntese protéica de modo similar a procariotos.
q DNA mitocondrial circular - distribuído em vários agrupamentos chamados de nucleóides,
desprovidos de histonas (como em bactéria).
q Muitos dos genes nucleares que codificam genes mitocondriais assemelham-se a genes
bacterianos.

MODELO ESS.002.01
FUNÇÃO DA MITOCÔNDRIA

q A mitocôndria realiza a maior parte das oxidações celulares e produz a massa de ATP
(energia celular) das células animais. Na mitocôndria o piruvato e os ácidos gordos são
convertidos em acetil-CoA que são oxidados em CO2, através do ciclo de Krebs (ciclo
do ácido cítrico). Grandes quantidades de NADH e FADH2 são produzidas por essas
reacções de oxidação. A energia disponível, pela combinação do oxigênio com os
electrões reactivos levados pelo NADH e pelo FADH2, é regulada por uma cadeia
transportadora de electrões na membrana mitocondrial interna denominada de cadeia
respiratória.

q A cadeia respiratória bombeia protões ( H+) para fora da matriz para criar um gradiente
electroquímico de hidrogénio transmembrana. O gradiente transmembrana, por sua
vez, é utilizado para sintetizar ATP e para dirigir o transporte ativo de metabolitos
específicos através da membrana mitocondrial interna. A combinação dessas reações
é responsável por uma eficiente troca ATP-ADP entre a mitocôndria e o citosol de tal
forma que o ATP pode ser usado para prover muitas das reações celulares
dependentes de energia.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
FUNÇÃO DA MITOCÔNDRIA

q Produção de ATP

q Remoção de Ca++do citosol

q Síntese de aminoácidos a partir de compostos intermediários do ciclo de

Krebs (ex.hepatócitos)

q Síntese de esteróides (células do córtex da supra-renal, dos ovários e dos

testículos)

Divisão das mitocôndrias - divisão (fissão) de mitocôndrias pré-existentes

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L

FUNÇÃO DA MITOCÔNDRIA
O
E
S
S
.
0
0
2
.
0
1

MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E
S
S
.

DINÂMICA MITOCONDRIAL
0
0
2
.
0
1

O número, tamanho, forma e localização das mitocôndrias na célula são

mantidos por crescimento, fissão, fusão e associação a estruturas do
citoesqueleto (motilidade ou ancoragem)
M
O
D
E
L
O
E
S
S
.
0
0
2
.
0
1

Em divisão
DNA MITOCONDRIAL (MTDNA)

q O mtDNA está localizado na matriz, estando por

vezes ligado à membrana interna.
q A transcrição do DNA mitocondrial é feita por
RNA polimerases específicas destes organelos.
Estas RNA polimerases são semelhantes às
polimerases de bactérias.
q Constituído por uma molécula de DNA circular
não associado a histonas
q Replicação do DNA dá-se durante todo o ciclo
celular e não só na fase S como no DNA nuclear
q O DNA mitocondrial é pequeno
q Código genético com diferenças relativamente
ao código nuclear
q Transcreve 22 tipos de rRNA (RNA ribossómico)
q Ribossomas (55S) diferentes dos ribossomas
citosólicos (80S)
q Ambas as cadeias são transcritas
q Hereditariedade apenas pelo gâmeta feminino
MODE
LO
MODELO EA.079.02
DNA MITOCONDRIAL (MTDNA)

Código genético do DNA mitocondrial

qO código genético do DNA mitocondrial é diferente
do DNA nuclear: no DNA mitocondrial, 4 dos 64
codões são diferentes dos existentes no DNA
celular

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E
S
S
.
0
0
2
.
0
1

DNA
mitocondrial
durante
replicação
DNA MITOCONDRIAL (MTDNA)

A transcrição da cadeia H (externa)

ocorre no sentido de rotação dos
ponteiros do relógio

A transcrição da cadeia L (interna)

sentido antihorário.

Todos os mRNAs e as proteínas

codificados no mtDNa ficam no
mitocôndrio.

Algumas proteínas ribossomais são

importadas do citoplasma

- DNA mitocondrial mais pequeno (16kbp)

- codifica 2 rRNAs, 22 tRNAs usados na tradução do mRNA
- tem 13 sequências que começam com o codão ATG (Metionina)
- Não possui intrões
MODE
LO
DNA
REPAIR
- Nucleotide Excision Repair (NER)
- Base Excision Repair (BER)
- Mismatch Repair
- Double-strand Breakage repair

Doenças associadas

- Xeroderme pigmentosa
- Cockayne syndrome (CS)

MODELO ESS.002.01
CARACTERÍSTICAS DNA
MITOCONDRIAL
Mismatch Repair
- Exonuclease
- Presença de grupos metilo ligados a adenosine (cadeia original)
- Em eucariotas não se sabe como é feita a distinção entre as duas cadeias

Double-strand breakage repair

- radiação ionizante
- Agentes químicos
-A quebra da dupla cadeia pode provocar anomalias nos cromossomas e a
morte celular.

Reparação: NHEJ - nonhomologous end joining (um complexo de proteínas

liga-se ao DNA e promove a ligação das cadeias.

MODE
LO
PORQUÊ O DNA MITOCONDRIAL?

• este “segundo” genoma encontrado na mitocôndria

pressupõe que o genoma mitocondrial esteja altamente
amplificado.

• Enquanto cada célula contém apenas duas cópias de um

dado gene nuclear (1 de cada par de homólogos), há
milhares de cópias de um dado gene mitocondrial por célula.

• Assim o DNA mitocondrial é o sistema genético adotado em

casos onde o tecido da amostra estão muito velhos, são
muito pequenos ou foram degradados pelo calor ou
humidade.
MODE
LO
MODELO EA.079.02
PORQUÊ O DNA MITOCONDRIAL?

• O DNA mitocondrial é o DNA humano mais fácil de amplificar

através de PCR. Este método examina uma sequência de 440
nucleotídeos de uma região não codificada do genoma
mitocondrial.

• O DNA mitocondrial não recombina. Há assim uma história

genealógica imutável - antropologia

MODE
LO
MODELO EA.079.02
HERANÇA MATERNA DO DNA
MITOCONDRIAL

• A mitocôndria e o seu genoma são herdados da linha materna.

• As crianças do sexo masculino partilham o genoma

mitocondrial com a sua mãe e parentes femininos.

• O genoma mitocondrial é herdado intacto através de milhares

de gerações.

• Embora algumas novas mutações apareçam ocasionalmente

numa linhagem são muito poucas e fáceis de identificar.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
Although the central dogma of maternal inheritance of mtDNA remains valid, there are
some exceptional cases where paternal mtDNA could be passed to the offspring

MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS ORIGEM

Todos os animais e a maioria dos microrganismos dependem da

captação contínua de grandes quantidades de compostos orgânicos
do ambiente. Estes compostos fornecem tanto os esqueletos de
carbonos para a biossíntese quanto a energia metabólica, que
dirige todos os processos celulares.

q os primeiros organismos da Terra primitiva tiveram acesso a uma

abundância de compostos orgânicos produzidos por processos
geoquímicos, mas a maioria destes compostos originais foram
utilizados há biliões de anos. Desde esse tempo, virtualmente
todos os materiais orgânicos necessários para as células vivas
foram produzidos por organismos fotossintetizantes, incluindo
muitos tipos de bactérias fotossintetizantes.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS

Nos vegetais, a fotossíntese ocorre num organelo intracelular especializado

- o cloroplasto.

qOs cloroplastos fazem a fotossíntese durante as horas

de luz diurna. Os produtos da fotossíntese são usados
diretamente pelas células fotossintetizantes para a
biossíntese e são também convertidos em açúcar de
baixo peso molecular (normalmente sacarose), que é
exportado para suprir as necessidades metabólicas das
outras várias células não-fotossintéticas do vegetal.
q Alternativamente, os produtos podem ser armazenados na forma de um
polissacarídeo osmoticamente inerte (normalmente amido), que é
mantido disponível como fonte de açúcar para uso futuro.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS

q São organelos típicos das células vegetais com membrana dupla, com
presença de DNA;
q Cromoplastos = contêm pigmentos
q Leucoplastos = armazenam material de reserva ( incolores)
q Estrutura:
q Envelope, os tilacóides e o estroma;
Estroma=região preenchida com material viscoso;
Tilacóides=Vesículas achatadas, mergulhadas no estroma;
Granum= pilha de tilacóides
Grana= conj. de todos os granum

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D
E
L
O
E
S
S
.
0
0
2
.
0
1

MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS

q os mecanismos fundamentais envolvidos na sintese de ATP dirigida

pela luz em cloroplastos e a síntese de ATP direcionada pela respiração
nas mitocôndrias são muito semelhantes.

O Cloroplasto é membro de uma família de organelos típica de vegetais -

os Plastídeos

q Os cloroplastos são os mais proeminentes membros da família de

organelos dos plastídeos. Os plastideos estão presentes em todas as
células vegetais vivas, onde cada tipo de célula tem o seu componente
característico.

q Todos os plastídeos se desenvolvem a partir de proplastídeos, os quais

são organelos relativamente pequenas presentes nas células imaturas
dos meristemas vegetais. Os proplastídeos se desenvolvem de acordo
com as necessidades de cada célula diferenciada, e o tipo que estará
presente é determinado em grande parte pelo genoma nuclear.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS
ESTRUTURA

COM três membranas distintas (a membrana externa, a membrana interna e a

membrana tilacóide) que definem três compartimentos internos separados (o
espaço intermembranas, o estroma, o espaço tilacóide). A membrana tilacóide
contém todos os sistemas geradores de energia do cloroplasto. Os tilacóides
individuais estão interconectadas, um que tende a se empilhar para formar
agregados chamados de grana.
MODE
LO
MODELO EA.079.02
 CLOROPLASTOS
ESTRUTURA

q Sistema muito desenvolvido de membranas, com um envelope

exterior constituído por duas membranas (cada de dupla camada)
e conjuntos de tilacóides bem desenvolvidos;

q Ao contrário das membranas da maioria dos organelos das células

eucariotas, contém poucos fosfolípidos, mas é rica em glicolípidos;

q No invólucro, a membrana exterior contém poros não específicos

que permitem a passagem de moléculas para o espaço
intermembranar até 10 kDa; esta membrana não se funde com a
interior, mas verificou-se que há proteínas que se ligam a ambas e
que medeiam a entrada de outras proteínas (codificadas pelo DNA
nuclear) para o estroma. MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS

q Os cloroplastos fazem as suas

interconversões energéticas por
mecanismos quimiosmóticos de
maneira muito semelhante àquela
utilizada pelas mitocôndrias, e são
organizadas pelos mesmos
principios.

q possuem uma membrana externa

altamente permeável, uma
membrana interna muito menos
permeável na qual proteínas
carregadoras especiais estão
embebidas, e um espaço
intermembranas muito estreito.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS

q A membrana interna circunda um grande espaço chamado de estroma, o

qual é análogo à matriz mitocondrial e contém várias enzimas, ribossomos,
RNA e DNA.

q Há, entretanto, uma importante diferença entre a organização das

mitocôndrias e a dos cloroplastos.
q A membrana interna dos cloroplastos não é dobrada em cristas e não
contém uma cadeia transportadora de electrões.
q Ao invés disso, a cadeia transportadora de electrões, bem como o
sistema fotossintético que absorve luz e uma ATP sintase, estão todos
contidos numa terceira membrana distinta, que forma um conjunto de
sacos achatados semelhantes a discos, os tilacóides. Acredita-se que o
lúmen de cada tilacóide está conectado com o lúmen de outros
tilacóides, consequentemente definindo um terceiro compartimento
interno chamado de espaço tilacóide, o qual é separado do estroma pela
membrana tilacóide.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS
FOTOSSÍNTESE

Os cloroplastos e bactérias
fotossintetizantes obtêm electrões de
alta energia por meio de fotossistemas
capazes de capturar electrões
excitados, quando a luz solar é
absorvida pelas moléculas de clorofila.

Os fotossistemas são constituídos por um

complexo de proteínas e pigmentos
precisamente ordenados, em que a
fotossíntese ocorre.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS
FOTOSSÍNTESE

q Há dois fotossistemas em cloroplastos e cianobactérias.

q Os dois fotossistemas estão normalmente ligados em série e transferem electrões da
água para o NADP+ para formar o NADPH, com a concomitante produção de um
gradiente electroquímico de protões transmembrana; o oxigénio molecular (O2) é gerado
como produto 2ário.

q Todos os processos de transporte de electrões ocorrem na membrana

tilacóide:
q para fabricar ATP, H+ é bombeado para o espaço tilacóide e um refluxo de H+, através da
ATP sintetase, produz o ATP no estroma cloroplástico. Este ATP é usado em conjunto com o
NAPH feito pela fotossíntese para direccionar um grande número de reacções
biossintéticas no estroma cloroplástico, incluindo as reacções de fixação de carbono
(Ciclo de Calvin-Benson), mais importantes, que geram hidratos de carbono a partir de
CO2. Juntamente com outros produtos dos cloroplastos, estes são exportados para o
citosol celular onde são utilizados.

MODE
LO
MODELO EA.079.02
M
O
D

CLOROPLASTOS
E
L
O
E
S

FOTOSSÍNTESE
S
.
0
0
2
.
0
1

MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS VS MITOCÔNDRIAS

q Comparados com as mitocôndrias, os cloroplastos são maiores e têm um compartimento extra.

q Os cloroplastos contêm além das membranas interna e externa, uma membrana tilacóide que
delimita o espaço tilacóide.
q A membrana tilacóide contêm os sistemas de captação de luz, as cadeias transportadoras de
eletrões e a ATP-sintase.
q Ao contrário da membrana interna cloroplástica, a membrana interna mitocondrial é dobrada em
forma de cristas de forma a aumentar a sua área superficial. MODELO ESS.002.01

MODELO EA.079.02
CLOROPLASTOS VS MITOCÔNDRIAS

Há uma importante diferença entre a organização das mitocôndrias e a dos cloroplastos.

q A membrana interna dos cloroplastos não é dobrada em cristas e não contém uma cadeia
transportadora de electrões.
q Ao invés disso, nos cloroplastos, a cadeia transportadora de electrões, bem como o sistema
fotossintético que absorve luz e uma ATP sintase, estão todos contidos numa terceira membrana
distinta, que forma um conjunto de sacos achatados semelhantes a discos, os tilacóides.
q O lúmen de cada tilacóide está conectado com o lúmen de outros tilacóides, consequentemente
definindo um terceiro compartimento interno chamado de espaço tilacóide, o qual é separado do
estroma pela membrana tilacóide.
MODE
LO
MODELO EA.079.02