13/09/2021

Micologia e
Virologia
 Aprender a identificar as
Identificação das características
características macroscópicas e
macroscópicas e microscópicas
microscópicas de fungos
de fungos e Realizar a coloração
com lactofenol azul-algodão

Pedro Mareti Maçaira Fígaro

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Os fungos, foram classificados como pertencentes ao Reino Vegetalia

Apresentam características conflitantes com as típicas desse Reino

Não possuem clorofila nem pigmentos fotossintéticos, obtendo sua

Um pouco de energia por absorção de nutrientes.

teoria...
Não armazenam o amido e não apresentam, com exceção de alguns fungos
aquáticos, celulose na parede celular.

Os fungos têm, ainda, algumas semelhanças com o Reino

Animalia, ou seja, armazenam glicogênio e possuem quitina
na parede celular

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Os fungos são heterotróficos e eucarióticos A célula fúngica é constituída pelos principais componentes encontrados nos
organismos eucarióticos.
Com um só núcleo, como as leveduras, ou multinucleados, como os fungos
filamentosos ou bolores e os cogumelos (fungos macroscópicos).

Os fungos podem ser unicelulares ou multicelulares quando as células são tubulares

com um só núcleo, como as leveduras, ou multinucleados, como os fungos e denominada de hifas cujo conjunto constitui o micélio.
filamentosos ou bolores e os cogumelos (fungos macroscópicos).

Essas características resumidas é que justificaram, Todas as células fúngicas são eucarióticas, isto é, possuem
a partir de 1969, a criação de um Reino separado núcleo com membrana nuclear

Reino Fungi

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IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS: IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS:

Fungos Comestíveis: Fungos Comestíveis:

Agaricum bisporus
cogumelo champignon
Himematsutake

Cogumelo shimeji
Shitake Hiratake

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IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS: IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS:

Fungos Venenosos: Produção de Substâncias Químicas:

Psilocibe Semilanceata -
Chapéu da Liberdade
Amanita Phalloides –
Chapéu da morte

A. muscaria
Penicillium notatum

Creative Commons- Freepik: 14561214 Creative commons

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IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS: IMPORTÂNCIA DOS FUNGOS:

Produção de Alimentos: Doenças no Homem:

Produção de Vinho

Candidíase Inframamária
Onicomicose Tinea captis

Micoses Superficiais

Produção de Pão

LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu, 2009

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CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS FUNGOS

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS FUNGOS
 Supra-Reino: Eukarya

Características Gerais:  Heterotróficos LEVEDURAS:

 Parede celular rígida com quitina
 Unicelulares
 Ovoides
Estruturas Vegetativas:

Leveduras Filamentosos  Dimórficos

Reprodução: Gemulação

 Unicelulares  Longos filamentos

 Ramificações verdadeiras
 Ovoides
 Estruturas de frutificação
LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu, 2009

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As leveduras apresentam colônias pastosas, de cor creme, branca, preta, rosa, dependendo Reprodução
da espécie, sendo que a maioria varia de branca a creme

As leveduras são unicelulares não apresentando diferenciação

morfológica entre parte vegetativa e reprodutiva.

As células têm formas:

 Arredondadas
 Ovoides
 Alongadas

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FUNGOS FILAMENTOSOS:

Dente de Leão
Micélio Aéreo
Estrutura de
Frutificação
Hifa

Ramificação
Estrutura de Frutificação Hifas Aéreas
Reprodução: Esporulação

Micélio Esporos

Micélio Vegetativo

LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu, 2009

LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu, 2009 TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010

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FUNGOS FILAMENTOSOS:
Dimorfismo Fúngicas:

23ºC = Micélio

37ºC = Levedura

Paracoccidioides brasiliensis

MACROSCÓPICAMENTE:
 Colônias “Grandes”;
 Micélios aéreos;
 Pigmentação;

LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu, 2009

TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010

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LEVEDURAS FUNGOS FILAMENTOSOS

Eucariotas Eucariotas
Parede Celular contendo Parede Celular contendo quitina
polissacarídeo e/ou proteína e/ou e/ou celulose
glicosamina e/ou lipideo
Unicelulares Pluricelulares
Facultativos Aeróbios Estritos
ph preferencial: 4,0 a 4,5
Temperatura preferencial:
ph preferencial: 5,5 a 6,0
Temperatura preferencial:
Vamos para a
prática!
“ambiente” “ambiente”
Tolerância à alta osmolaridade Tolerância à alta osmolaridade

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Identificação de fungos e coloração Materiais para a Aula Prática

 Meios de cultura de fungos (Ágar Saboraud)

Proposta da Aula Prática:
 Corante Azul de Algodão (Lactofenol)
1. Observar as colônias de fungos pré-cultivadas e anotar as suas  Lamínula
características
 Lâmina

2. Coloração com lactofenol azul-algodão  Fio de platina ou alça

 Microscópio óptico

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Procedimento 1:
Meio de cultura de fungos - Ágar Saboraud
Observar as colônias de fungos pré-cultivadas e anotar as seguintes características:
 Micélio (leveduriforme, filamentoso, rastreio, aéreo) Seletividade e facilidade no cultivo de fungos

 Cor da colônia Favorece o crescimento de dermatófitos e inibe

pH Levemente ácido algumas espécies bacterianas de interesse clínico
 Bordos (inteiro, franjado, liso, ondulado)
 Superfície (lisa, rugosa, cerebriforme, coriácea, algodonosa, mucoide,
Cloranfenicol - antibiótico de amplo espectro
cremosa, concêntrica, opaca, aveludada, brilhante e pulverulenta)
 Tipo (seca, úmida) Elevada concentração de dextrose
 Protuberância central (presente ou ausente)  Proporciona uma vantagem para o desenvolvimento dos
 Elevação (achatada, levantada, amontoada) fungos estáveis por osmose

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Incubação do Ágar Sabouraud Mínimo 3 dias em temperatura de 25°C. Exemplos de colônias

Vantagens:
 Caldo presente no método serve para controlar a esterilidade e realizar procedimentos
baseados na utilização de membranas filtrantes

 Fornecido em placas prontas para o uso eliminando o complicado trabalho de preparar o

meio no laboratório.

Fonte: encurtador.com.br/agzR3 ; encurtador.com.br/krxy0

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Procedimento 2:

 Colocar uma gota de lactofenol azul-algodão sobre a lâmina.

Observação das colônias  Retirar pequeno fragmento da cultura de bolor ou uma alíquota da
Na bancada do laboratório cultura de levedura, utilizando alça ou fio de platina.
 Colocar o fragmento da cultura ou a alíquota de levedura sobre a gota de
lactofenol e homogeneizar.
 Cobrir com lamínula e examinar ao microscópio nas
objetivas de 10 e 40 vezes.

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Corante Azul de Algodão (Lactofenol)  O ácido lático preserva as estruturas fúngicas

Usado para tornar mais distintas as estruturas hialinas dos fungos - corante citoplasmático  O azul de algodão é incorporado à fórmula como corante diferencial

O lactofenol azul de algodão é composto de lactofenol, que atua como fluido de Para quitina e celulose
montagem, e de azul de algodão, um corante.

Os organismos suspensos no fluido de montagem são rapidamente mortos  A visualização e preservação de fungos através deste sistema são excelentes
pela presença do fenol que age como citotóxico

Precipitando proteínas celulares e

Não ocorre plasmólise ao matar os organismos.
inativando sistemas enzimáticos essenciais

Fonte: http://www.abq.org.br/cbq/2017/trabalhos/13/11610-24707.html

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Composição parede celular

Observar fungos do tipo
levedura no microscópio

TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010

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