A CLASSIFICAÇÃO BÁSICA DAS BACTÉRIAS

SEGUNDO A MICROSCOPIA ÓPTICA

OS ASPECTOS DAS ESTRUTURAS DAS

PAREDES CELULARES DESSES
MICRORGANISMOS E A COLORAÇÃO DE GRAM

Julye Zambrano
CLASSIFICAÇÃO
BACTÉRIAS
Podemos classificar as bactérias em três grandes
grupos: as Gram-positivas, as Gram-negativas
e os Micoplasmas.
As bactérias são classificadas de acordo com o formato da
célula; os três principais grupos são: cocos, bacilos e
espiroquetas. Os primeiros são arredondados — formato de
'bolinha' —, o segundo grupo possui forma de bastão e o
terceiro grupo é composto por células espiraladas.

A célula bacteriana é composta por membrana celular e

citoplasma, onde, além do cromossomo bacteriano, são
encontrados ribossomos e alguns plasmídios, fragmentos de
cromossomos com genes que podem determinar maior
resistência a fatores externos como antibióticos, por exemplo.
PAREDE CELULAR E
ESTRUTURA
As bactérias são organismos simples, formados por
apenas uma célula, sendo chamados, portanto, de
seres unicelulares. Seu material genético (DNA) é
encontrado disperso no citoplasma, pois não possuem
carioteca delimitando seu núcleo (seres procarióticos).
A maioria das células bacterianas possui parede
celular, localizada externamente à membrana
plasmática, formada por peptideoglicano ou mureína,
que garante proteção e forma à célula. Além da
parede, algumas bactérias possuem uma cápsula
polissacarídica que envolve essa estrutura.
No citoplasma observa-se a ausência de organelas membranosas e a presença de
ribossomos, estruturas relacionadas com a síntese de proteínas. Os ribossomos estão
presentes em grande quantidade e são menores que aqueles encontrados nas
células eucarióticas. Nas células bacterianas podemos encontrar também grânulos
de reserva, que variam de natureza química.

As bactérias podem ainda apresentar flagelos, estruturas locomotoras formadas

principalmente por uma proteína denominada flagelina. As bactérias que não
apresentam essa estrutura são denominadas atríquias.

Outra estrutura encontrada nas bactérias são as fimbrias, que lembram os flagelos,
porém, atuam auxiliando na fixação das bactérias. Essas estruturas são formadas pela
proteína pilina e se assemelham a pequenos pelos. São encontradas fimbrias
principalmente nas bactérias chamadas de Gram negativas.
 A coloração de Gram é utilizada para classificar bactérias

COLORAÇÃO com base no tamanho, morfologia celular e

comportamento diante dos corantes

DE GRAM Assim, por meio da coloração de Gram é possível verificar, além da

forma da bactéria, a cor que adquirem, de forma que as bactérias
podem ser classificadas em gram positivas ou gram negativas.
 PASSO A PASSO
1. Colocar algumas colônias da bactéria na lâmina, podendo ser acrescentando uma gota de água para facilitar a homogeneização das
colônias;
2. Deixar secar um pouco, podendo a lâmina passar rapidamente pela chama para favorecer a secagem, no entanto é importante ter
atenção à temperatura, já que se a temperatura for muito alta é possível que haja alteração na estrutura da bactéria, o que pode
interferir no resultado do exame;
3. Quando a lâmina estiver seca, cobrir com o corante cristal violeta e deixar agir por cerca de 1 minuto;
4. Lavar a lâmina com um filete de água corrente e cobrir a lâmina com o lugol, que tem como objetivo fixar o corante azul, e deixar agir
por 1 minuto. Ambos os tipos de bactérias conseguem absorver o complexo formado pelo corante e o lugol, ficando azuis;
5. Em seguida, lavar a lâmina com água corrente e aplicar álcool a 95%, deixando agir por 30 segundos. O álcool é responsável por
dissolver a membrana de lipídios formadora das bactérias gram-negativas e, assim, remover o complexo formado entre o corante e o
lugol, descorando essas bactérias. No entanto, no caso das bactérias gram-positivas, o álcool desidrata a parede celular das bactérias
gram-positivos, havendo contração dos poros e as tornando impermeáveis;
6. Depois, deve-se lavar novamente em água corrente e cobrir a lâmina com o segundo corante, a fucsina ou safranina e deixar agir por
30 segundos;
7. Em seguida, deve-se lavar a lâmina com água corrente e deixar secar à temperatura ambiente.
8. Assim que a lâmina estiver seca, é possível colocar uma gota de óleo de imersão e observar a lâmina no microscópio com objetiva de
100x, sendo possível verificar a presença ou ausência de bactérias, bem como a presença de leveduras e células epiteliais.
 GRAM POSITIVA
são visualizadas com a coloração azul
devido ao fato de não serem descoradas
pelo álcool, uma vez que possuem parede
celular mais espessa e os seus poros
contraem-se quando expostos ao lugol;
GRAM NEGATIVA
são visualizadas com a coloração rosa/roxo
devido ao fato de serem descoradas pelo
álcool e coradas pela safranina ou fucsina.
GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA