UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ

Curso de Farmácia/CCS
CONTROLE DE QUALIDADE MICROBIOLÓGICO
DE MEDICAMENTOS E CORRELATOS

Controle Microbiológico
da Água

PROFA. DRA. MARCÍLIA COSTA

 Controle Microbiológico da Água

Introdução

Água
 Controle Microbiológico da Água

Aplicações farmacêuticas e cosméticas:

✓ Formulação de produtos;

✓ Preparo de reagentes;

✓ Agente extrator;

✓ Limpeza;

✓ Troca térmica;

✓ Insumo para água altamente purificada;

✓ Vapor.
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Monitoramento microbiológico da água

Limites de Alerta: são níveis ou faixas, que quando excedidos

indicam que um processo pode ter se desviado de sua condição
normal de operação.

✓ Advertência;
✓ Não necessariamente exige ação corretiva.
 Controle Microbiológico da Água

Monitoramento microbiológico da água

Determinação do Limite de Alerta:

Revisão histórica dos dados de monitoramento de água (período
de pelo menos 1 ano – considerando as variações sazonais).

Limite de Alerta < Limite de Ação.

Limite de Alerta - 50% ou menos do Limite de Ação.

Monitoramento microbiológico da água

Limite de ação: são níveis ou faixas, que

quando excedidos indicam que um
processo desviou-se de sua condição
normal de operação.

Limite de Ação – Investigar – Avaliar (impacto no produto/

paciente) Medidas Corretivas.
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Monitoramento microbiológico da água

Limite de Alerta Limite de Ação

300 UFC/mL

Reservatório

Medidas Corretivas
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Padrões Microbianos

✓ Os níveis de carga para água de uso industrial inexistem;

✓ Próprio padrão interno;
✓ Periodicidade na avaliação em distintos pontos da planta;
✓Legislação quanto a potabilidade da água.
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TIPOS DE ÁGUA

Graus de água (Farmacopeias internacionais):

✓ Bulk;
✓ Água acondicionada como produto.
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Tipos de água

Bulk: Acondicionadas como produto*:

✓Água purificada; ✓ Água estéril para injeção;
✓Água para injeção; ✓ Água estéril para irrigação;
✓Água para hemodiálise; ✓ Água estéril para inalação;
✓ Vapor puro. ✓ Água estéril purificada;
✓ Água bacteriostática para injeção.
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Tipos de água

FB 6ª ed:

✓ Água purificada;

✓ Água ultrapurificada;

✓ Água para injetáveis.

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Água Potável

✓ Pública/privada: tratamento preliminar necessário ao

atendimento das especificações de água potável.

✓ Aplicação direta nas instalações farmacêuticas;

✓ Etapas iniciais da limpeza de equipamentos;

✓ Água de origem para purificação subsequente.

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Água Potável

Portaria n° 2.914, de 12 de dezembro de 2011

✓ Ausência de E. coli/100 mL;

✓ Saída de tratamento – Ausência de coliformes totais/100 mL;

✓ Reservatórios e rede de distribuição - Ausência de E. coli ou

coliformes totais/100 mL;

✓ Mananciais: cianobactérias > 20.000 céls/mL – análise semanal

na água saída do tratamento e entradas das clínicas de
hemodiálise e indústria de injetáveis.
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Águas Bulk

Água purificada
Usos:
✓ Formulações não parenterais; não apirogênicos;
✓ Produtos tópicos e orais; granulação;
✓ Obtenção de água para injeção e vapor limpo grau
farmacêutico.

Limite de ação: 100 UFC/mL.

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Águas Bulk

Água altamente purificada

Usos:
✓ Preparações com água de alta qualidade biológica.
✓ Estéreis (apirogenicidade): oftálmicas, otológicas, nasais e
cutâneas;

▪ Frequentemente obtida por O.R.

Limite de ação: 10 UFC/100 mL.

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Águas Bulk

Água para hemodiálise

✓ Purificação de água potável para diminuir contaminantes
químicos e microbiológicos;

✓ Obtida: destilação, O.R. ou troca iônica.

Usos:
✓ Diluição das soluções concentradas para hemodiálise;
Limite de ação: 25 UFC/mL.
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Águas Bulk

Água para injetáveis

Usos:
✓ Excipiente na produção de parenterais ou outras preparações
cujos níveis de endotoxinas devem ser controlados;

✓ Limpeza de equipamentos e componentes que venham a entrar

em contato com os produtos parenterais.
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Águas Bulk

Água para injetáveis

Obtenção:
▪ Água potável - destilação ou O.R. (processo validado).
▪ USA (destilação ou O.R.), Europa (destilação).

✓ Parâmetros químicos os mesmos para água purificada

mudando apenas as especificações para endotoxinas
bacterianas.
Limite de ação: 10 UFC/mL.
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Águas Acondicionadas com Produtos

Água estéril para injetáveis

De mais alta qualidade usada na indústria farmacêutica.

Uso:
✓ Solvente ou diluente de medicamentos estéreis (isotonia).

Esterilidade comprovada - teste de esterilidade.

Nível permitido: 0,25 UE/mL.
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Águas Acondicionadas com Produtos

Água estéril para irrigação

Usos:
✓ Irrigação de tecidos e lesões;

Especificações de água estéril para injeção; exceto:

especificação não inclui material particulado.

Nível permitido: 0,25 UE/mL.

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Águas Acondicionadas com Produtos

Água estéril para inalação

Usos:
✓ Umidificação de gases;
✓ Reconstituir medicamentos para inalação.

Esterilidade / baixo nível de endotoxinas.

Nível permitido: 0,5 UE/mL.

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Águas Acondicionadas com produtos

Água bacteriostática

Água para injeção + conservantes.

Usos:
✓ Reconstituição de medicamentos injetáveis de dose múltiplas.

Obs: incapacidade de proliferar, e que possam ser mortos pelo

conservante.
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Águas Acondicionadas com produtos

Água purificada estéril

Mais recente monografia da USP.
Usos:
✓ Mesmo emprego da água purificada.

▪ Esterilidade, mas não potencial de endotoxinas.

Obs: aplicações de volumes baixos o suficiente para não

justificar um sistema de produção local.
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Microbiologia da água

Composição microbiana variável (origem)

Tratamento
QUALIDADE DA
MICROBIOLÓGICA DA Estocagem
ÁGUA
Distribuição
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Microbiologia da água

Vírus (0,3 – 0,02 µm)

Bactérias (0,75 – 5 µm)

Leveduras (2 – 4 µm)
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Microbiologia da água

A composição microbiana da água potável vai depender da sua

origem:

Pouco nutrientes:
✓ Composição microbiana predominante: Gram-negativas e
bactérias do grupo Prosthecate, como Hyphomicrobium,
Caulobacter e Gallionella;
✓ Pseudomonas ssp.
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Microbiologia da água

Níveis altos de nutrientes:

Achromobacter, Flavobacterium, Azotobacter, Brevibacterium,
Bacillus, Micrococcus, Mycobacterium, Nocardia, Pseudomonas,
Streptomyces, Spirochaetes, Thiobacillus e Vibrio.

Fungos, protozoários e algas e microrganismos potencialmente

patogênicos.
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Microbiologia da água

Análise microbiológica de águas:

A maioria dos organismos, principalmente as bactérias

Prosthecate, as espécies Mycobacterium, Spirochaetes e espécies
de Thiobacillus são incapazes de crescer em placas.

Para uns o meio muito rico, para outros

condições de cultivo insatisfatório.
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Microbiologia da água

Amostras de água para contagem de heterotróficos (método em

placa x método direto);

Resultados em placa 0,1 a 10% da contagem direta (UFC/mL).

Viáveis não cultiváveis (VNC): microrganismos não passíveis de

cultivo por técnicas atuais (recuperação, isolamento e cultivo).
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Microbiologia da água

Fornecedor de água:

Responsabilidade de reduzir o número de organismos viáveis ao

padrão de água potável.

▪ Filtração em leito de areia;

▪ Cloração da água.

Poços artesianos - água de lençóis subterrâneos - filtração através

do solo.
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

✓ Bactérias proliferam em sistemas de alta pureza.

✓ Proliferação em estado de livre flutuação plantactônica.

✓ Mais de 99% de toda atividade microbiana do planeta ocorre em

biofilmes.

▪ Favorecimento da nutrição;
▪ Proteção de efeitos de substâncias químicas.
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

Imagens de bactérias e matriz de biofilme, captadas através Microscopia Eletrônica.

Fonte: http://www.medonline.com.br/biern4.htm.
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

Impacto do crescimento do biofilme:

Locais de formação:
▪ Superfície formada por grânulos: (carvão ativado e resinas).

Carvão ativado: sítios ativos na superfície remoção de cloretos,

cloraminas e moléculas orgânicas (adsorção).
Manutenção: lavagens de retorno e sanitização com água quente
(80°C).
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

Resinas de troca iônica:

✓ Resinas de troca iônica, que incluem resinas de retenção de
material orgânico são mais propensos a formação de biofilme.

✓ Fisicamente mais frágeis, menos tolerantes a água quente e

danificados com cloreto.
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

Filtros:
✓ Oclusão por biofilme; diferencial de pressão: passagem de
microrganismos em filtros esterilizantes.

✓ Estratégias para impedir ou reduzir a passagem de

microrganismos por filtros: Sanitizador UV / Filtros (0,1 µm) /
Filtros em série (0,22 µm);
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Crescimento microbiano em sistemas de água purificada

Membranas de O.R.:

✓ Fluxo de água tangencial não é suficientemente rápido para

impedir que o biofilme possa crescer.

✓ Sanitização com água quente.

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Superfície & Desenvolvimento do Biofilme

Natureza química e lisura das superfície;

✓ Hidrofóbicas (PVDF);

✓ Carregadas positivamente (aço inoxidável);

✓ Carregadas negativamente (vidro);

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Superfície & Desenvolvimento do Biofilme

✓ Tubulações plásticas (PVC grau farmacêutico):

Agentes de liberação e plastificantes lentamente;

Limitam as possibilidade de sanitizantes.

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Sistemas de água

✓ Reduzir os níveis de compostos químicos;

✓ Reduzir a biocarga microbiana;

✓ Remover endotoxinas e evitar ocorrência.

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Sistemas de água

✓Leitos de carvão ativo;

✓Tanques de tratamento;

✓ Abrandadores de água;

✓ Dispositivos de deionização;

✓ Sistemas de osmose reversa (O.R.);

✓ Destilação;

✓ Estocagem e distribuição.
 Controle Microbiológico da Água

Sistemas de água

Leitos de carvão ativo

✓ Adsorve: materiais orgânicos de baixo peso molecular e

agentes oxidantes;
✓ Maioria dos colonizadores – produtores de endotoxinas;
✓ Sanitização (H2O quente ou vapor) /substituição.
 Sistemas de água

Tanques de tratamento

✓ Água potável de entrada;

✓ Gram-negativos;

✓ Formação de biofilme.
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Sistemas de água

http://wdez.com.br/comercial/link/produto.php?id=830
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Sistemas de água

Abrandadores de água

Coluna de resina que removem cátions bivalentes: cálcio e

magnésio.

Regeneração com NaCl.

 Controle Microbiológico da Água

Sistemas de água

Dispositivos de deionização

✓ Colunas/eletrodeionização (resina, membrana e

carga elétrica) /eletrodiálise (membrana com campo

elétrico);

Resina Catiônica – troca H+ por cátions: cálcio,

sódio, potássio, magnésio.

- Resina Aniônica – troca OH- por ânions:

fluoretos, bicarbonatos, cloretos, sulfatos, etc.

✓ Regeneração (HCl e NaOH) - sanitização.

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Sistemas de água

Sistema de osmose reversa (O.R.)

 Controle Microbiológico da Água

Sistemas de água

Destilação

✓ Sistema de escolha (Europa) – água para injeção.

✓ Retenção de contaminação (endotoxinas).
 Controle Microbiológico da Água

Sistemas de água

Estocagem e distribuição

✓ Colonização;
✓ Sistemas com circulação: 65-80°C;
✓ Pontos frios não abaixo de 65°C.
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Sanitização

✓ Controle de biofilme;
✓ Sanitizantes: matar as células do biofilme/removê-los;
✓ Água quente: matar / não remove.

✓ Sanitizantes químicos:

Biofilme pouco espesso e acessíveis

– oxidantes fortes;

✓ Água quente/Sanitizante químico.

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Sanitização

Uso efetivo do processo de sanitização:

✓ Sanitizante/tempo de contato;

✓ Avaliação: Contagens microbianas (pós sanitização);

✓ Periodicidade;

✓ Evitar recolonização (remover células/fragmentos).

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Sanitização

Sanitizantes para água

Água quente

✓ Uso > 55°C – desnaturação enzimática;

✓ Sistemas: 65 – 80ºC; aço inoxidável;

✓ PVDF – não condutor; valores abaixo de 50ºC (biofilme).

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Sanitização

Sanitizantes para água

Vapor

Ozônio

✓ Gás solúvel em água/oxidante agressivo;

✓ Moléculas orgânicas são degradadas (lisa células; degrada

exopolímero; degrada endotoxinas);

✓ Muito reativo com os materiais do sistema de água.

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Sanitização

Sanitizantes para água

Peróxido de hidrogênio (-O-O-)

✓ Compatibilidade superfícies;

✓ Estabilidade (temperaturas, pH).

✓ Pós-sanitização: remoção do sistema.

 Controle Microbiológico da Água

Sanitização

Sanitizantes para água

Ácido peracético
✓ Pouco usado em sistemas de água;
✓ Pós-sanitização: remoção do sistema.

Misturas peróxido de hidrogênio e ácido peracético

✓ Mais efetivos (matar/remover biofilme);
✓ Comercial: 5:1 – diluição 1:100;
✓ Determinar tempo; Pós-sanitização: remoção do sistema.
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Sanitização

Sanitizantes para água

Cloro e hipoclorito
✓ Tempo de contato; inativação (sulfito de sódio ou bissulfito);
✓ Incompatibilidade (aço inoxidável).

Dióxido de cloro

✓ Oxidante gasoso; Crescente aplicação farmacêutica;

✓ Reatividade seletiva; não degradação de biofilme/desprendimento.

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Sanitização

Sanitizantes para água

Formaldeído
✓ Carcinogenicidade/O.R. (penetração).

Glutaraldeído
✓ Menos tóxico;
✓ O.R./limitações (não penetra nas membranas).
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Sanitização

Sanitizantes para água

Detergentes catiônicos

“Quaternários de amônia” / limitação (não

penetra no exopolímero).
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Sanitização

Sanitizantes para água

Substâncias cáusticas
✓ Superfícies intensamente revestidas por biofilmes;
✓ Associados com agentes oxidantes (H2O2);
✓ Descarte seguida de ajuste de pH antes do descarte.

Brometo e Iodeto
✓ Menor potencial de oxidação que cloreto.
✓ Penetração no biofilme – morte celular; mais caros.
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Referências bibliográficas

PINTO, T.J.A.; KANEKO, T.M.; PINTO, A.F. Controle Biológico

de Qualidade de Produtos Farmacêuticos, Correlatos e Cosméticos.
4ª ed., São Paulo: Editora Manole, 2015.

BRASIL. FARMACOPEIA BRASILEIRA, 6 ed., Volume I /

Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Brasília: Anvisa, 2019.