Panorama da micologia médica atual e biologia dos fungos

Daniel A. da Matta, PhD

Micologista
Colaborador Unifesp
Centro de Infectologia Charles Merieux – AC

2022
 Agenda
• Hospedeiro:
• Paciente

• Patógeno:
• Fungo

• Antifúngicos:
• Mecanismo de Ação
• Mecanismos de Resistência
• Detecção da resistência
Os fungos na mídia
Mortalidade por doenças infecciosas no século XX – EUA

Fonte: CDC
Pergunta
• Porque existem tantos descendentes de Irlandeses comemorando o
dia de São Patrick em Nova York?
 A Grande Fome Irlandesa (1845-1852)
(Blight – fitopatógeno fúngico)

• Blight – doença causada por um fungo, Phytophthora infestans

• P. infestans mudou a história de uma nação
• 25% da população morreu ou fugiu da Irlanda
• 1 milhão de pessoas morreram e 1 milhão emigraram para os países
do Reino Unido, Austrália, principalmente EUA e Canadá
• Batata era o principal alimento (perdas chegaram a 75%)

Saint Patrick´s Day - NYC Foto Canal History: https://www.history.com/topics/immigration/irish-potato-famine

Gregory, 1983.
1) Histórico e conceitos importantes
 Doenças Infecciosas e Pandemias mais temidas
até o final do século XIX (1899)
Epidemia de cólera
em Hamburg 1892
• Varíola
• Sarampo *
• Sífilis *
• Poliomielite
• Tuberculose *
• Cólera *
• Difteria
• Malária *
• Tripassonomose
• Antrax
• Tipho
• Peste bulbônica La Miseria (1886), de Cristóbal
• Febre amarela* Rojas, autor acometido pela
Doença fúngica não era uma ameaça!!! tuberculose.
 Fim do Século XX (1999)

• Infeccões Fúngicas Invasivas aparecem no cenário mundial com uma das ameaças
em saúde pública

• Candida spp
• Aspergillus spp
• Cryptococcus spp. Incidência de Candidemia no Brasil
0,74 a 6,0 casos/1000 adm.
Entre outras infecções...
da Matta et al. 2017

OBS: Durante a pandemia

de COVID19, a incidência de
candidemia ultrapassou os
Candida spp Aspergillus spp Cryptococcus spp 12 casos por 1000 adm.

Homei, Worboys, 2013 livro

Impacto importante durante a epidemia de COVID19 Sobel, 2000 - guideline
1900 2000

O que aconteceu?

Representação da Caixa de Pandora

 Infecções Fúngicas Invasivas: O que mudou em 100 anos? ou em 120 anos ?

• Os patógenos fúngicos mudaram?

Não!
• O que mudou foi o hospedeiro!
(Fatores de Risco)
• UTI
• Antibiótico de amplo espectro
• Quimioterápicos (cancer)
• TX & Imunosupressores
• Grandes cirúrgias (TGI)
• NPT
• Extremo de idade (Prematuridade e senilidade)
Homei, Worboys, 2013 livro
• AIDS Colombo, Guimaraes, 2003
 Aumento da prevalência de Micoses

Tx de mortalidade por D. Infec. no século XX Aumento das micoses no século XX

Slides Casadevall ICAAC 2012

Bongomin et al. 2017
 Árvore Filogética da Vida

Analisado a partir de sequências de RNAr

Whoese, Fox, 1977

Crédito a Erik Gaba
O papel dos fungos na natureza : “Internet” subterrânea mediada por fungos

Fonte: BBC Network

 Tratamento de Infecções Fúngicas (panorama histórico)

• Diagnóstico tardio (às vezes o diagnóstico é fácil quando há suspeita de IF)

• Tratamento com antifúngicos

• Longo (geralmente de meses a anos)
• Alto custo $$$
• Relacionado a alguma toxicidade

Colombo et al., 2013

Pensando na terapia antifúngica, deve ser rápida depois do diagnóstico preciso Pappas et al. 2016
 Espectro de ação de antifúngicos sistêmicos
Antifúngicos com eficácia clínica e microbiológica comprovada

Resistência comumente relatada

Lewis, 2011
 Resposta do Hospedeiro em infec. fúngicas

Fraca Forte
Parábola de “dano e resposta” do hospedeiro humano frente a infecção fúngica.

Casadevall, Pirosfsky, 2003

 Biodiversidade dos Fungos

Fusarium oxysporum
Blackwell, 2011

Infectam: Biotecnologia,
- Vegetais Indústria
- Artropodes farmacêutica e
- Vertebrados Hawksworth, Lucking, 2017 alimentícia
- Anfíbios (devastador) Só algumas centenas de espécies causam doenças em
seres humanos
 Fungos no
ecossistema
aquático

16 gêneros: Aspergillus, Penicillium, Cladosporium, Fusarium, Alternaria,

Cryptococcus, Rhodotorula, Candida, Pichia, Malassezia
Grossart et al. 2019 - Nature
2) Biologia dos fungos

Livros:
Tópicos em Micol. Méd. Jeferson Oliveira 2012
Micol. Méd. à luz de aut. contemp. Sidrin & Rocha, 2003
Tratado de Micologia Médica , Lacaz 2002

Entre outras referências

 Fungos: características gerais

Cogumelos Fungos Leveduriformes Fungos Filamentosos

Célula fúngica:
Eucariontes: membrana nuclear
Heteretróficos: Absorção
Reserva energética: glicogênio
Aeróbios obrigatórios: Algumas leveduras fermentadoras
são anaeróbias facultativas.
Reprodução: Sexuada e assexuada Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
* Fermentação e produção de metabólitos secundários
 Timelapse

Crescimento do FF (apical) Crescimento da levedura (brotamento)

 Cicatrizes na célula mãe das leveduras

Saccharomyces cerevisiae S. cerevisiae

Nasa.gov
Bitterman et al. 2003
 Parede celular dos fungos

• localizada na porção externa da membrana plasmática (ambiente x meio

intracelular)

• protege o conteúdo da célula, dá rigidez e define a estrutura celular.

• um “esqueleto” de alta plasticidade que protege a célula de diversos estresses

(alterações osmóticas)

• permite a interação com o meio externo, uma vez que algumas de suas proteínas
são adesinas e receptores.

• certos componentes da parede podem conduzir a resposta imune do hospedeiro

(crescimento e disseminação do fungo) Garcia Rubio et al. 2020
Parede celular dos fungos

Erwig, Gow, 2016

 Cápsula de Fungos (fator de virulência)

• Cadeia de polissacarídeos: Glucoronoxylomanana (GXM), Galactoxylomana

e manoproteína.
• Espessura de 1 a 50 µm, dependendo das condições ambientais (nutrientes
e e CO2)
Os seres humanos modularam
• Ex: Cryptococcus neoformans o fungo a produzir cápsula?

ameba macrófago

Proteção contra a fagocitose

Derengowski et al. 2013
Livros:
Tópicos em Micol. Méd. J. Oliveira 2012
Micol. Méd. (...). Sidrin & Rocha, 2003
 Membrana Celular de Fungos

• Lipídeos: barreira semi-permeável composta por fosfolipídeos, ác. graxos,

glicolipídeos, ergosterol (estabilidade e fluidez).
• Proteínas: transporte específico (canais), enzimas catalizadoras de reações
associadas à membrana, ligação estrutural entre citoesqueleto, matriz
extracelular e receptores.

Só a membrana celular (ergosterol)

Livros:
Tópicos em Micol. Méd. J. Oliveira 2012
Micol. Méd. (...). Sidrin & Rocha, 2003
Produção de Proteases por Fungos (fator de virulência)
 Produção de Melanina (fator de virulência)

• Melanina: resistência a raios UV e enzimas líticas

Fungos melanizados, negros ou

demáceos.
Nosanchuk, Casadevall, 2003
Livros:
Tópicos em Micol. Méd. J. Oliveira 2012
Micol. Méd. (...). Sidrin & Rocha, 2003
Produção de Melanina

Nosanchuk, Casadevall, 2003

 Polimorfismo (fator de virulência)

Candida albicans

Formação da tubo germinativo

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
 Dimorfismo (fator de virulência):
P. brasiliensis (morfologia distintas)

4um

KOH
Colônia
leveduriforme
Colônias (35-37°C)
filamentosas
(25-30°C) Doença

inoculação
40-um

Micelial: hifas delgadas, Levaduriforme: céls arredondadas\ovais, multinucleadas,

hialinas, septadas, multinucleadas e parede celular espessa, birrefringente, rodeadas por Moreira, 2008
ramificadas multibrotamentos. Sturme MHJ et al. 2011
“Roda de Leme ou Mickey Mouse” em Grocott Restrepo et al. 2015
Medeiros et a. 2018.
Distribuição mundial de micoses endêmicas

Lee PP, Lao YL. Front Immunol, 2017.

Micoses endêmicas Ambiente: fase filamentosa Hospedeiro: fase leveduriforme

✓Acometem pacientes
imunocompetentes
(maioria)
Blastomyces

✓Doença mais grave nos

pacientes
imunocomprometidos
Histoplasma

Paracoccidioides
Teixeira MM et al. Med Mycol, 2014,
Bagagli E et al. Plos Neg Trop Dis, 2015,
Dukik k et al. Mycosis 2017.
 Morfologia dos fungos e fagócitos

Células fúngicas de
leveduras e fungos
filamentosos

Fagócitos

Erwig, Gow, 2016

Fungo e bactéria interagindo em meio de cultivo

Pseudomonas putida e Cunninghamella spp (0:20s)

ALGUMAS DEFINIÇÕES IMPORTANTES…

Livros:
Tópicos em Micol. Méd. Jeferson Oliveira 2012
Micol. Méd. à luz de aut. contemp. Sidrin & Rocha, 2003
Tratado de Micologia Médica , Lacaz 2002
 Estruturas básicas dos fungos filamentosos

Hifas e suas variações

Conídios / Esporos / Propágulos

Células conídiogênicas
Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Definições

• Hifas: Estrutura tubular de paredes paralelas; pode ser septada ou

cenocítica. Representa a unidade estrutural dos fungos filamentosos.
• Micélio: Conjunto de hifas.

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Características das hifas

CENOCÍTICA
SEPTADA DEMÁCEA
OU MELANIZADA

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
SEPTADA HIALINA Lacaz, 2002
 Definições

• Conídios: Estrutura de reprodução dos fungos

filamentosos. Geralmente são formados a partir de
células especializadas. Cada espécie apresenta um
formato diferente.

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Definições

• Células conidiogênicas: especializadas em formar

conídios. Existem basicamente dois tipos: Anélides e
Fiálides.

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Estruturas básicas dos fungos leveduriformes

Blastoconídios

Pseudohifas

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Definições

• Blastoconídio: Esporos leveduriformes formados a partir de uma célula-

mãe; geralmente são arredondados. Representam a unidade estrutural das
leveduras.

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
 Definições

• Pseudohifa: Estrutura semelhante a hifa, porém com

constrições nos septos. É formada pela união sucessiva de
blastoconídios alongados.
• Pseudomicélio: Conjunto de pseudohifas.

Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
3) Infecções fúngicas e antifúngicos
sistêmicos
 Fungos: como agentes de infecções

 HOSPEDEIRO IMUNOCOMPETENTE
 Sistêmicas ≅ 25 espécies

 Cutâneas ≅ 35 espécies
Superficiais
 Subcutâneas ≅ 10 espécies

 PACIENTES IMUNOCOMPROMETIDOS
 Oportunistas ≅ 400 espécies

Butler, 2010
Sistêmicas
Oportunistas IF Implantação
(subcutâneas)
 1500 pacientes - Candidemia UTI (India)

 31 espécies de Candida
Chakrabarti et al. 2015

Sistêmicas
Endêmicas  Mais de 625 espécies de fungos
associado aos seres humanos (infecção,
comensalismo, microbioma)
Fisher al. 2020
 Patologias causadas por Fungos

• ALERGIAS: Decorrente da inalação do fungo ou de antígenos destes, em

indivíduos atópicos

• TOXICOSES:
• Micetismo (ingestão de fungos venenosos)
• Micotoxicoses (ingestão de alimentos contaminados com toxina pré-formada)
• Micotoxinas são metabólitos secundários (mais de 400 micotoxinas
conhecidas).

• MICOSES: Decorrente da presença e crescimento do fungo no tecido

 Infecções Fúngicas

Fontes de Infecção Vias de Transmissão

1. Saprófitas da natureza (solo, vegetais, 1. Inalação

madeira) 2. Traumatismo
2. Alimentos (Toxinas) 3. Contato direto
3. Água 4. Translocação (endógena)
4. Animais domésticos 5. Transmissão Horizontal (exógena) -
5. Homem profissionais de saúde, sondas,
ventiladores, cateter
Livros Micologia:
J. Oliveira 2012
Sidrin & Rocha, 2003
Lacaz, 2002
Diagnóstico de Infecções fúngicas: acurácia e rapidez salvam vidas

✓Comensal (Candida spp.)

✓Coloniza (Aspergillus spp.)
✓Agente etiológico é essencialmente patogênico para os humanos (P.
brasiliensis, C. neoformans)
• Não são parte da microbiota
• Não há dúvidas entre colonização versus infecção
✓Fase da doença: aguda, sub-aguda ou crônica
• Candidemia e aspergilose (demanda rapidez)
• PCM e micoses superficiais. Há mais tempo para o diagnóstico (para o
técnico!)***
✓Exame direto, microscopia, histopatológico,imagens,
sorologias/biomarcadores e ferramentas moleculares para o diagnóstico

*** para o paciente, quanto mais rápido procurar o sistema de saúde, menos sequelas\ fibroses nos pulmões na PCM
4) Considerações finais
 Temperatura como modulador para os fungos

Temperatura:
Psicrófilos, mesófilos, termófilos.
o. F

20 a 30ºC
.

OBS: pH entre 1,5 e 11

 Hospedeiro imunocompetente, fungo e esteróide

T = 40oC-41oC

Inoculação sistêmica Coelho saudável:

+ proteção contra
infecção fúngica

Inoculação testicular Orquite

+ crônica

Inoculação sistêmica MORTE

+
+ Esteroides

Perfect et al. 1980

 Infecção fúngica em animais (como trata-los?)

• Sapo (fungo Chytridiomycosis spp) – extinção de espécies (entre 100 a 200)

• Morcego (Pseudogymnoascus destructans) – Síndrome do nariz branco

De onde vem a capacidade dos seres humanos em metabolizar álcool?

• Elefante embriagado com a Marula

•

• (fruta fermentada)

• Primata comendo marula do solo

 Armazenamento inadequado

Micotoxinas – temperatura e umidade

Fungos Toxinas
• Aspergillus spp • Aflatoxinas
Milho contaminado
• Penicillium spp • Ocratoxina
• Claviceps spp • Alcalóides Ergolínicos
• Fusarium spp • Tricotecenos
• Zearalenona
Amendoim contaminado
• Fumonisina
Aspergillus spp
Fusarium spp
Penicillium spp
Claviceps spp
 Conclusões sobre micoses “invasivas”

• Baixa frequência no passado; atualmente cada vez mais comum

• Diagnóstico tadio; Última suspeita;

• Tratamento com antifúngico é muito longo e caro

• Frequentes relatos de resistência a antifúngicos (micoses invasivas) \

espécies raras e complexos

• Preocupação Resistência Clínica X ambiente (agricultura e agropecuária)

• Falta pessoal especializado; Graduação e pós-graduação: difícil acesso a

micologia;
 Obrigado!

Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Edifício de Pesquisas 2

Antiga Escola Paulista de Medicina (EPM) LEMI - UNIFESP