O uso de micropipetas

Prof. Dr. Heath Mills (Texas A&M University)

Tradução: Camila O. Pereira (FATEC Campinas)

Micropipetadores são equipamentos padrões

nos laboratórios utilizados para medir e transferir
pequenos volumes de líquidos.

A. Partes de uma Micropipeta (Figura 1):

a. Botão do êmbolo
b. Botão ejetor de ponteira
c. Seletor de ajuste de volume
d. Indicador digital de volume
e. Eixo
f. Ponto de fixação da ponteira

FIGURA 1

B. Tipos de micropipeta
As pipetas de um laboratório têm diferentes tamanhos e servem para
medir diferentes escalas de volumes. No laboratório de Química Geral da FATEC
Campinas temos pipetas que medem os seguintes volumes:
• 0,1 a 1 ml
• 0,5 a 5 ml
• 1 a 10 ml
• 10 a 100 µl

C. Ajustando o volume da pipeta:

O número no indicador de volume da pipeta permite ajustar o volume que
será medido. O seletor de ajuste pode ser virado para a esquerda ou para a
direita para aumentar ou diminuir o volume. A Figura 2 mostra exemplos 3 de
micropipetas com volumes que varia entre 0,5 - 20 µl (P20), 20 – 200 µl (P200)
e 100 - 1000 µl (P1000) e suas respectivas leituras de volumes.

D. Ponteiras das pipetas:

O liquido a ser medido é sempre pipetado em ponteiras específicas para
cada tamanho e modelo de pipeta. As ponteiras devem ter capacidade para o
volume total, ou seja, desde o menor até o maior volume que a pipeta é capaz
de medir.
 FIGURA 2. Lendo o volume nas pipetas (exemplos).

E. Configurações do êmbolo:
O êmbolo geralmente para em duas posições diferentes quando é
pressionado. A primeira delas é o ponto de resistência inicial e é o nível que vai
resultar no volume desejado de solução a ser medida. A segunda, serve para
escoar todo o volume de solução contido dentro da ponteira durante a
transferência ou retirar a ponteira, caso ela não tenha um botão ejetor.

F. Procedimento para medição e transferência de um volume de líquido:

Antes de medir e transferir líquido:
• Escolha a micropipeta de tamanho adequado ao volume desejado
• Ajuste o volume correto no seletor
• Insira a ponteira em sua extremidade
• Pressione com o polegar o botão até a primeira parada
Medindo e transferindo a solução:
• Imergir a ponta aproximadamente 3 mm na solução da amostra
• Libere lentamente o botão do polegar para a posição inicial. Veja como a
solução é sugada lentamente para a ponteira. Não solte o êmbolo rápido pois
pode causar bolhas e resultar em erros de medição
• Retire a ponteira da solução amostra e coloque contra a parede lateral do
recipiente que receberá o liquido.
• Pressione lentamente o botão do polegar até a primeira parada.
• Remova a ponteira descartável, pressionando firmemente o botão ejetor.