Universidade Federal do Oeste da Bahia

Centro das Ciências Exatas e das Tecnologias

Disciplina: Química Analítica Instrumental
Prof. Dr. Jonatas Gomes da Silva
Discente: Izabelle Ramos Pereira

Lista de Exercícios – Cromatografia

1) Quais são as diferenças entre a cromatografia gás-líquido e gás-sólido?

Na cromatografia gás-sólido a fase estacionária é um sólido e ocorre processo de adsorção.
Na cromatografia gás-líquido a fase estacionária é um líquido imobilizado em um suporte
sólido e ocorre processo de partição.

2) Quais tipos de misturas são separados por cromatografia gás-sólido?

Misturas do tipo volátil e que são estáveis. E também que o ponto de ebulição da mistura
não ultrapasse 300ºC.

3) Por que a cromatografia gás-sólido não é extensivamente utilizada como a

cromatografia gás-líquido?
Porque pode ocorrer retenção permanente de moléculas ativas.

4) O que é um cromatograma?
É uma técnica utilizada para a separação de misturas. A depender do tipo de mistura que vai
utilizar umas das técnicas adequadas para analisar a mistura de interesse, ou seja,
cromatografia a mistura é dissolvida num fluido chamado de fase móvel, na qual vai
transportar a estrutura para outra fase chamada de fase estacionária. Como os constituintes
da mistura são diferentes são transportados em velocidades diferentes, acontecendo assim
a separação.
5) O que significa programação de temperatura em cromatografia gás-líquido?
Significa um processo de separação, em que para que esse processo seja otimizado precisa
que a temperatura seja ajustada durante a fase de eluição. Ou seja, a temperatura é ajustada
em fornos do tipo termostatizados, durante o processo que ocorre a separação de
cromatografia as colunas vão sendo adicionadas, isto ocorre porque precisa ter uma
resolução ótima em um baixo tempo chamado de retenção. Pois, quando tem uma
temperatura baixa se obtém uma resolução melhor, já se a temperatura estiver elevada o
tempo de retenção será menor, porém a resolução não.

6) Descreva as diferenças físicas entre as colunas tubulares e as recheadas.

Quais são as vantagens e desvantagens de cada uma delas?
A coluna tubular na fase estacionária tem um revestimento na parede tubular que permite
um maior tamanho, porém tem como desvantagem um custo elevado e sua capacidade para
a amostra é menor. E como vantagem tem uma maior capacidade de ser eficiente,
apresentando uma maior velocidade de análise e uma pressão baixa, tem baixa sensibilidade
e também tem um controle de vazão difícil de ser controlado. Nas colunas recheadas tem na
sua fase estacionária tem sua coluna preenchida, apresentando as colunas com diâmetros
entre 3 a 6 mm com comprimento de a,5 a 5m. Tendo como vantagem uma sensibilidade
maior que a coluna tubular, e também uma maior economia, tem capacidade para uma
quantidade maior de amostra, a desvantagem é que apresenta baixa eficiência, a análise
demora muito tempo para ser analisada, a pressão tem altas quedas e pode ter um adsorção.

7) Quais variáveis devem ser controladas para se obter dados quantitativos

satisfatórios de um cromatograma?

As variáveis que devem ser controladas são as variáveis qualitativas.

8) Descreva o princípio no qual cada um dos seguintes detectores para

cromatografia gasosa está baseado:
a) Condutividade térmica;
(Detector universal), quando o corpo é aquecido perde o seu calor, mas essa a velocidade
que isso acontece vai depender da composição que o gás presente no ambiente ao seu
redor, a condutividade térmica tem seu princípio de funcionamento baseado nisto. Na
condutividade a passagem de gás passa por um filamento feito de metal que é aquecido
através de uma corrente elétrica, devido a velocidade constante o calor vai se dissipando. O
gás de arraste que acaba se misturando com moléculas presentes na amostra ela passa por
um filamento, e quando a resistência presente no filamento vai aumentando ocorre o
contrário com o calor pois ela vai diminuindo.

b) Ionização de chama;
Nesse tipo de método tem uma chama que se alimenta de hidrogênio e ar, é por essa chama
que o gás de arraste sai de uma coluna e passa. A fonte de ionização é a chama. Tem uma
diferença de potencial, que é devido a eletrodos que estão junto com a chama que faz esse
estabelecimento de diferença. A medida que o gás de arraste vai passando pela a chama,
tem um tipo de estabelecimento pequeno de eletrodos entre a corrente. As moléculas que já
passaram pela a chama ficam ionizadas, isso faz com que a corrente seja ionizada.

c) Captura de elétrons;
É um método que faz a detecção de ionização, mas para fazer a detecção é necessário a
utilização de uma quantidade pequena de material radioativo (3H ou então 63Ni), fazendo
que seja gerado elétrons livres. No anodo os elétrons são coletados, e gera uma corrente
eletronicamente amplificada, que tem como resultado uma linha de base. Quando está
utilizando uma amostra que tem afinidade por elétrons, acontece de ‘’capturar’’ elétrons ao
se passar pelo detector, e isso causa no sistema a diminuição de corrente que estava sendo
produzida e gera um sinal que é de acordo com a proporção da concentração.

9) O cinamaldeído é o componente responsável pelo aroma de canela. Também é

um potente composto antimicrobiano presente nos óleos essenciais (ver M.
Friedman, N. Kozukue e L. A. Harden, J. Agric. Food Chem., 2000, v. 48, p. 5702).
 A resposta de CG de uma mistura artificial contendo seis componentes de óleo
essencial e benzoato de metila como padrão interno é mostrada na Figura a
seguir.

Os dados quantitativos foram obtidos empregando-se o benzoato de metila como

padrão interno. Os seguintes resultados foram obtidos para as curvas de calibração
de cinamaldeído, e eugenol e timol. Os valores abaixo de cada componente
representam a área do pico do componente dividida pela área do pico do padrão
interno. Concentração mg das amostras

10) Defina : Eluição isocrática

Quando se tem uma fase móvel e que apresenta concentração constante, ou seja, sem
mudanças ao longo do processo na cromatografia utiliza-se o termo eluição isocrática. No
processo tem um aumento da largura do pico, isso ocorre com o tempo de retenção de
linearmente do cromatograma.

b) Eluição por gradiente

Na fase móvel tem uma composição alterada de forma constante na corrida cromatográfica.
Recheio de fase reversa
E do tipo de recheio apolar
d) Recheio de fase normal É do tipo de recheio polar.
11) Descreva a diferença fundamental entre as cromatografias por adsorção e por
partição.

A cromatografia de adsorção apresentam separações baseadas em interação do tipo

eletrostáticas e também nas forças de Van Der Waals, ou seja, a fase estacionária que
permite separar a fase móvel, nessa fase o sólido é separado do líquido ou do gás na fase
móvel. Utiliza-se da sílica em gel, a cromatografia de adsorção é separada em três tipos que
são a cromatografia em camada fina, cromatografia do tipo gasosa e a cromatografia de
coluna, aplicadas em tratamento em água, teste em amostra biológica como teste de urina
de atletas dentre outras aplicações. A cromatografia de partição é baseada nas diferenças
de solubilidade dos componentes na fase estacionária (líquido) e na fase móvel (líquido) a
absorção ocorre no interior do filme da força estacionária.

12) Descreva a diferença fundamental entre as cromatografias por troca iônica e por
exclusão por tamanho.

A cromatografia de troca iônica é que na sua fase estacionária tem uma resina que faz a
troca de íons, de forma seletivamente o analito faz interação com a carga oposta a sua com
coluna, detector do tipo de condutibilidade que é usado para fazer a detecção.

13) Quais espécies podem ser separadas por CLAE, mas não podem ser separadas
por CG?

Na espécie CLAE apenas as que não são voláteis e que são estáveis, já na CG não pode.

15) Um método de CLAE foi desenvolvido para a separação e determinação de

ibuprofeno em amostras de plasma de rato como parte de um estudo do tempo de
permanência da droga em animais de laboratório. Vários padrões foram
cromatográficos e os seguintes resultados obtidos:

Depois, uma amostra de 10 mg Kg-1 de ibuprofeno foi administrada por via

oral a um rato de laboratório. As amostras de sangue foram retiradas a vários
intervalos de tempo após a administração da droga e analisadas por CLAE. Os
seguintes resultados foram obtidos:

Concentração X área relativa do pico

Encontre a concentração de ibuprofeno no plasma sanguíneo para cada intervalo de
tempo e faça um gráfico da concentração versus tempo. Em bases percentuais, em
qual período de meia hora (1o, 2o, 3o etc.) a maior parte do ibuprofeno é perdida?

Gráfico de concentração X Tempo

y = 6,2669x + 3,2695 24 ,2=6,2669x + 3,2695

91,3= 6,2669x + 3, 26 95 x=14, X=3, 34 µg/mL
0 5 µg/m L
21 , 2 =6, 2 66 9x + 3,2 69
80,2= 6,2669x + 3, 26 95 5
X=12,2 8 µg/mL x= 2, 86 µg/mL

52,1= 6,2669x + 3, 26 95 1 8,5=6,2 66 9x + 3, 26 95

X=7,79 µg/mL x=2, 43 µg/mL

38,5= 6,2669x + 3, 26 95 1 5,2=6,2 66 9x + 3, 26 95

X=5,62 µg/mL x= 1,90 µg/mL