Estudo dirigido 2.

Métodos cromatográficos de análise (pré-aula)

Química Analítica C
Prof. Rachide

1. Defina Cromatografia.
Cromatografia é um método físico de separação que consiste na migração dos componentes de uma
mistura entre duas fases imiscíveis, a fase móvel e a fase estacionária.

2. Descreva, de forma resumida e objetiva, como se dá uma análise cromatográfica. Ilustre.

Inicia-se a análise cromatográfica com a purga e a estabilização do sistema (cromatógrafo). Após a linha
de base do cromatograma ser estabilizada, inicia-se a injeção da amostra. A fase móvel irá carrear a
amostra para a coluna, onde acontecerá a separação cromatográfica. Após sair da coluna, o analito irá
para o detector, que irá identificá-lo. Caberá ao computador registrar os dados obtidos.

3. Qual a função da fase móvel e da fase estacionária?

A fase móvel tem como finalidade transportar o analito para a fase estacionária, que será o local onde
ocorrerá a separação cromatográfica.

4. Como os métodos cromatográficos são classificados?

Depende do parâmetro de classificação. Se for quanto ao método de separação: em planar ou em coluna;
se for quanto a fase móvel: líquida, gasosa ou por fluido supercrítico; e se for quanto à fase estacionária:
por adsorção, partição, troca iônica ou exclusão de tamanho.

5. Qual a função do solvente e/ou gás de arraste?

Transportar o analito para a fase estacionária. Além disso, a fase móvel também participa da separação,
no momento da partição, por exemplo, ou da dessorção.

6. Quais são os tipos principais de coluna cromatográfica?

Fase normal (NP) e fase reversa (RP)

7. Quais os mecanismos principais que atuam na separação cromatográfica?

Diz respeito à classificação quanto à fase estacionária: cromatografia por adsorção, partição, troca iônica
ou exclusão de tamanho.
8. O que é um cromatograma e quais os seus elementos principais? Ilustre um cromatograma (inidicando
suas partes) em um sistema de representação cartesiana.
Cromatograma é o sinal gráfico obtido na separação cromatográfica, representado em um plano
cartesiano, onde o eixo x é o tempo de análise e o eito y é a intensidade do sinal. Lembre-se que a área
do pico cromatográfico equivale à concentração do analito na amostra. Quanto à ilustração do
cromatograma, ver desenho no slide e consultar outros cromatogramas na bibliografia.

9. Qual a função da velocidade de injeção do solvente e/ou gás de arraste na resposta do sinal
cromatográfico?
Uma menor velocidade resulta em um maior tempo de análise e permite um maior distanciamento entre
os picos cromatográficos. Uma maior velocidade resulta em um menor tempo de análise, contudo pode
acontecer dos picos cromatográficos se sobreporem. Problematizar o porquê.

10. Qual a função da temperatura na resposta do sinal cromatográfico?

A temperatura pode influenciar a separação cromatográfica ao aumentar a solubilidade do analito na fase
móvel, fazendo com que seu tempo de retenção seja menor. Assim, pode acontecer sobreposição de picos,
dificultando a interpretação dos resultados. Além disso, um aumento na temperatura diminui a largura do
pico cromatográfico, deixando-o com uma melhor resolução. Problematizar o porquê.