Lista de Exercícios – Cromatografia

Análise Instrumental IQA 364

Professora Ana Lúcia de Lima

01) (Perito Criminal-PR) Embora a cromatografia gasosa e a cromatografia líquida tenham muitas
características em comum, há diferenças em relação aos requisitos de amostra e de analito, seus formatos e
o papel da fase móvel em ambas. A respeito das especificidades das cromatografias líquida e gasosa,analise
as afirmativas abaixo.
I. Para compostos termicamente instáveis, a cromatografia gasosa é mais adequada.
II. Em cromatografia líquida, a retenção entre os analitos pode ser alterada mudando a fase móvel.
III. A retenção de um soluto em cromatografia líquida depende da interação dos componentes da amostra
tanto com a fase móvel quanto com a estacionária.
Está correto o que se afirma em:

a) I, II e III
b) I, apenas
c) I e II , apenas
d) II e III, apenas
e) I e III, apenas

02) (UFES) A técnica de cromatografia é utilizada para separação, identificação e quantificação de

componentes químicos em misturas complexas. Essa técnica se baseia na distribuição de substâncias entre
duas fases químicas ou físicas, sendo uma fase estacionária e a outra fase móvel ao longo do sistema. Com
relação aos diferentes tipos de técnicas cromatográficas, é incorreto afirmar:

a) Um sistema de cromatografia gasosa é formado por uma fase móvel gasosa e inerte, e uma fase
estacionária líquida, imobilizada em um suporte capilar que compõe a coluna.
b) Na separação usando cromatografia líquida de alta eficiência, uma eluição com fase móvel formada por
um único solvente ou por uma mistura de solventes de composição constante é chamada de eluição por
gradiente, enquanto uma eluição com fase móvel formada por uma mistura de solventes, com composição
variável ao longo da separação, é chamada de eluição isocrática.
c) Na cromatografia planar, a razão entre a distância percorrida por um soluto (Ds) e a distância percorrida
pela fase móvel (Df) é chamada de Fator de Retenção (Rf), Rf = Ds/Df .
d) A técnica de Cromatografia em Camada Delgada é um tipo de cromatografia planar em que um
suporte particulado de sílica é uniformemente distribuído sobre a superfície de uma placa de material
apropriado.
e) Os detectores de maior aplicação na técnica de Cromatografia Gasosa são o detector por ionização em
chama e o detector de condutividade térmica.

03) (UFVJM) Sobre cromatografia, assinale a alternativa incorreta.

a) A cromatografia permite a separação, identificação e quantificação de componentes de misturas, sendo

a amostra transportada pela fase móvel, que pode ser um gás, um líquido ou um fluido supercrítico.
b) Na cromatografia gasosa (CG), a amostra é vaporizada e injetada no topo da coluna cromatográfica. A
eluição é feita por fluxo de um líquido inerte, que atua como fase móvel.
c) A cromatografia gás-líquido baseia-se na partição do analito entre uma fase móvel gasosa e uma fase
líquida imobilizada na superfície de um sólido inerte.
d) A cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) é adequada à separação de espécies não voláteis ou
termolábeis.

04) (Perito criminal-PE) A cromatografia é uma técnica de separação. Fundamentalmente, um fluido

contendo um conjunto de substâncias dissolvidas (fase móvel) passa através de um solido ou um líquido
adsorvido no sólido (fase estacionária). A cromatografia gasosa é uma das técnicas analíticas mais utilizadas.
Acerca das técnicas cromatográficas, assinale a opção correta.

a) A eficiência de uma coluna usada em cromatografia líquida diminui à medida que o tamanho das
partículas do recheio dessa coluna diminui.
b) Na análise quantitativa mediante cromatografia líquida de alta eficiência, o produto da intensidade pela
largura da base do pico do cromatograma é usado para determinar a concentração do analito.
c) A análise por cromatografia gasosa é limitada a amostras em estado gasoso e sob temperatura
ambiente.
d) Para aumentar a eficiência de separação entre compostos em cromatografia, busca-se controlar as
condições de eluição para se obter picos largos.
e) Na cromatografia por partição de fase reversa, a fase estacionária é apolar, e a fase móvel, polar.

05) (Perito Criminal - DF) A medida da eficiência de uma coluna cromatográfica é dada pelos pratos
teóricos. Essa denominação se deve aos pratos físicos utilizados para demonstrar a eficiência do processo
de separação por destilação. Com relação à cromatografia e às respectivas aplicações, assinale a alternativa
correta.
a) Quanto menor o número de pratos teóricos, menor é o comprimento da coluna.
b) Quanto menor o número de pratos teóricos, maior é a eficiência da coluna.
c) Quanto menor a altura do prato, mais larga é a banda.
d) Quanto maior o número de pratos teóricos, maior é a eficiência da coluna.
e) O número de pratos teóricos é proporcional ao coeficiente de difusão.

06) (IFBA) A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é um tipo de cromatografia líquida que
emprega pequenas colunas, recheadas de materiais especialmente preparados e uma fase móvel que é eluída
sobre altas pressões. Ela tem a capacidade de realizar separações e análises quantitativas de uma grande
quantidade de compostos presentes em vários tipos de amostras, em escala de tempo de poucos minutos, com
alta resolução, eficiência e sensibilidade. Uma de suas limitações é
a) alta resolução
b) boa sensibilidade
c) automação
d) alto custo da operação
e) menor tempo de análise

07) (COPASA) A cromatografia é um método físico-químico de separação. Ela está fundamentada na

migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interações, entre
duas fases imiscíveis, a fase móvel e a fase estacionária. A grande variedade de combinações entre fases
móveis e estacionárias a torna uma técnica extremamente versátil e de grande aplicação.Em
relação à Cromatografia gasosa, não é correto afirmar:
a) A fase móvel é um gás e a fase estacionária pode ser um líquido.
b) É utilizada quando os componentes a serem separados possuem boa volatilidade.
c) O eluente (fase móvel) é um gás que interage com a amostra.
d) Pode detectar compostos em escala de nano a pictogramas (10-9, 10-12g).
08) (Perito Criminal - adaptado) A cromatografia é um método físico-químico de separação, identificação e
quantificação de componentes de uma mistura e seu uso é difundido em diversas áreas, inclusive na área
forense. Tendo em vista que esse método pode ser executado de diferentes maneiras, julgue os itens a seguir
e faça a correção nas alternativas falsas:

I) Na cromatografia líquida por exclusão de tamanho, componentes de massa molar alta apresentam tempo
de retenção longo, enquanto componentes de massa molar mais baixa apresentam tempo de retenção curto.
II) Em cromatografia gasosa, podem ser utilizadas colunas com fase estacionária líquida ou sólida.
III) Em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), são utilizadas pré-colunas com o intuito de
diminuir as oscilações das bombas.
IV) As separações em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) só acontecem por adsorção devido
ao fato da fase móvel ser mais polar que a fase estacionária.
V) A cromatografia líquida utiliza temperaturas mais baixas para a separação de compostos termolábeis.

09) (IFCE) Na América Latina, a cromatografia tem início na década de 1950 em função da demanda de
produtos para a nova indústria petroquímica. Sobre cromatografia, é incorreto dizer-se que:

a) Se uma banda cromatográfica permanece por um largo período dentro de uma coluna de separação,
tenderá a difundir-se em todas as direções, produzindo um alargamento da banda.
b) Na cromatografia gasosa, utilizando-se colunas capilares, pode-se injetar maior quantidade de amostra,
porém, neste tipo de coluna, tem-se maior tempo de retenção e menor resolução.
c) Um prato teórico corresponde a uma etapa de equilíbrio da substância entre a fase estacionária e a fase
móvel, portanto, quanto maior o número de pratos teóricos maior será a eficiência (picos mais estreitos).
d) Na cromatografia líquida, ao se empregar colunas fechadas que contêm partículas muito finas que
proporcionam separações muito eficientes, a resistência da vazão da fase móvel é aumentada
significativamente. Por esta razão, é necessário empregar sistemas de bomba de alta pressão.
e) No bombeamento isocrático, a composição da fase móvel é mantida constante durante toda a análise
cromatográfica.

10) (Perito Criminal) A cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) é uma técnica utilizada na análise
de compostos tóxicos. Uma vez aceito o material para análise, o analista deve preparar a amostra para injetar
no cromatógrafo, de forma que preencha os seguintes requisitos, exceto:

a) Ser solúvel na fase móvel.

b) Não ter compostos que insolúveis que possam entupir a coluna.
c) Ser adsorvida irreversivelmente ou reagir quimicamente com a fase estacionária
d) Ter uma concentração compatível com o volume da válvula de injeção e com a característica do
detector empregado.
e) Não conter compostos que podem interferir na análise.

11) (Petroquímica SUAPE) A cromatografia em fase líquida é uma técnica de separação baseada nas
diferenças de interação das espécies químicas com as fases estacionária e móvel, fornecendo informações
quantitativas e qualitativas importantes sobre os componentes de uma mistura. Uma das características da
cromatografia em fase líquida é que:

a) A técnica pode ser acoplada com dispositivos de detecção baseados na medição de pressão osmótica
das espécies químicas.
b) A aplicação de eluição isocrática, isto é, com composição constante do(s) solvente(s) que compõe(m) a
fase móvel, objetiva a variação de polaridade dessa fase ao longo da corrida cromatográfica.
c) O tempo de retenção é um parâmetro que pode ser usado para identificar uma espécie química
específica.
d) O sistema com fase reversa, ou seja, com fase estacionária polar e fase móvel apolar, é usado na
separação de espécies apolares.
e) As espécies químicas, dissolvidas na fase móvel, cujos tempos de retenção se objetiva conhecer, não
devem interagir com a fase estacionária de modo a saírem no volume morto.

12) (Petrobras) A separação cromatográfica de duas substâncias é feita usando fase estacionária apolar e fase
móvel polar de composição constante (água/propanol 40/60% v/v). Nessas condições, a substância “M”
aparece com tempo de retenção t R1 igual a 10,2 min, enquanto o tempo de retenção t R2 da substância “N” é
15,2 min. A respeito desse procedimento de separação, afirma-se que a(o):

a) Separação ocorre em regime de gradiente de fase móvel

b) Substância “M” é mais polar que a substância “N”
c) Procedimento descrito é típico de cromatografia líquida de fase normal.
d) Aumento da polaridade da fase móvel não afetará o valores de tr1 e tr2.
e) Aumento da proporção de propanol na fase móvel aumentará a polaridade da fase móvel.

13) (Petrobras) Considere um sistema de cromatografia gasosa, formado por uma fase móvel gasosa e inerte,
e uma fase estacionária líquida, imobilizada em um suporte capilar que compõe a coluna. Uma dada análise
é conduzida no referido sistema a partir da injeção de uma amostra, que é carreada para a coluna e separada
ao longo da passagem por essa coluna. Com relação a potenciais amostras líquidas a serem analisadas nesse
sistema, sabe-se que elas são:

a) Vaporizadas ao longo do seu carreamento pela coluna.

b) Vaporizadas antes de alcançarem a coluna.
c) Vaporizadas parcialmente antes de alcançarem a coluna.
d) Impossíveis de serem analisadas por essa técnica.
e) Carreadas através da coluna na forma líquida.

14) (Petrobras) Em uma separação de duas substâncias por cromatografia de camada fina, utilizaram-se uma
placa recoberta com uma camada de alumina e, como fase móvel, hexano. Após certo tempo na câmara de
desenvolvimento, a linha frente do hexano atingiu 5,0 cm, com os centros das manchas das duas substâncias
separadas percorrendo respectivamente 2,5 e 4,0 cm.
O valor mais aproximado para o Rf da substância mais polar é

a) 0,5
b) 0,6
c) 0,8
d) 1,3
e) 2,0

15) (Petrobras) Na separação usando cromatografia líquida de alta eficiência, uma eluição com fase móvel
formada por um único solvente ou por uma mistura de solventes de composição constante, é chamada de
eluição isocrática, enquanto que uma eluição com fase móvel formada por uma mistura de solventes, com
composição variável ao longo da separação, é chamada de eluição por gradiente. Frequentemente, a eluição
por gradiente é usada para reduzir o tempo de análise, quando comparado àquele obtido na eluição
isocrática. Esse efeito é alcançado devido à variação da hidrofobicidade da fase móvel. A eficiência da
separação usando eluição por gradiente, comparada com a da separação usando eluição isocrática:

a) É aumentada devido à redução dos tempos de retenção dos picos dos analitos
b) É aumentada devido ao aumento das larguras dos picos dos analitos
c) Independe do uso de eluição por gradiente, tendo influência apenas nos tempos de retenção dos analitos
d) Decresce devido à redução dos tempos de retenção dos picos dos analitos
e) Decresce devido ao aumento das larguras dos picos dos analitos

16) (LIQUIGÁS – adaptada) Uma solução líquida contém duas substâncias denominadas I e II. Um volume
de 100 L da solução foi colocado perto da borda inferior (na linha da amostragem) de uma placa de
cromatografia de camada delgada, cuja fase estácionária tem caráter mais polar. A borda inferior da placa foi
mergulhada em solvente de caráter menos polar, de forma que este, por capilaridade, percolasse a fase
estacionária. Após 5 minutos, a linha de frente foi marcada 10,0 cm acima da linha de amostragem. Sabendo-
se que o fator de retenção (RF) da substância I foi de 0,9, que o da substância II foi de 0,6 e que os diâmetros
das manchas foram de 0,2 cm. Verifique as afirmativas a seguir e faça a correção nas afirmativas falsas.

I) A substância I é mais polar do que a substância II

II) A substância I tem maior afinidade com a fase estacionária
III) A substância II não tem afinidade alguma pela fase móvel
IV) A mancha da substância I subiu 3 cm na placa cromatográfica após 5 minutos

17) (MAPA –adaptado) A cromatografia faz parte de um importante grupo de métodos de separação, que nos permite
separar, isolar, identificar e quantificar substâncias, mesmo em misturas muito complexas. Sobre a cromatografia,
analise as afirmativas abaixo e faça a correção nas afirmativas falsas.

I) Na cromatografia gasosa, uma substância eluirá mais rapidamente quanto mais aquecido estiver o forno
da coluna
II) A ordem de saída das substâncias na cromatografia gasosa será regida por dois fatores simultâneos: a
afinidade de cada substância pela fase estacionária e a tendência de cada substância se manter na fase móvel;
III) Na cromatografia líquido-líquido, ocorre a partição, definida pela solubilidade relativa do soluto nos
dois líquidos;
IV) Na cromatografia líquida de alta eficiência, requer-se pressões de bombeamento de vários milhares de
libras por polegada quadrada (psi) e, por esse motivo, o equipamento necessário para CLAE é mais
sofisticado e caro do que os utilizados em outros tipos de cromatografia.
V) A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por comparação com padrões
previamente existentes para a purificação e compostos, separando-se as substâncias indesejáveis, e para a
separação dos componentes de uma mistura.

18) (Transpetro) A complexidade na determinação de compostos presentes em misturas homogêneas de

diferentes substâncias torna necessário, para viabilizar a sua análise, o uso de técnicas analíticas que
envolvam a separação e a identificação dos constituintes dessas amostras, como a técnica de CLAE
(Cromatografia Líquida de Alta Eficiência). Essa técnica tem a vantagem de não se limitar a substâncias que
apresentem volatilidade. Observe as afirmações a seguir que tratam dos detectores aplicados na técnica
analítica de CLAE e da sua habilidade na separação e quantificação de alguns compostos:
I - Detectores de índice de refração são aplicados na separação e identificação de açúcares e alcoóis, com
base nas propriedades de tais compostos alterarem o índice de refração da fase móvel.
II - Detectores eletroquímicos polarográficos são adequados para amostras que contenham moléculas ou íons
que sofram oxidação ou redução em um potencial superior ou igual ao fixado no equipamento.
III - Detectores óticos do tipo fotômetros podem ser aplicados em amostras que tendem a absorver radiações
na faixa do ultravioleta e atuam em comprimentos de onda fixos.
IV - Detectores óticos por absorbância na faixa do ultravioleta ou visível exigem utilização de uma fase
móvel de pureza espectroscópica, excetuando-se quando a detecção é realizada a comprimentos de onda
menores que 240 nm.

19) (Perito criminal) A cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-MS) e a

cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa (CL-MS) são amplamente empregadas em
laboratórios forenses. Indique a alternativa que apresenta, corretamente, vantagens e desvantagens dessas
técnicas:

Vantagem Desvantagem
a) CL-MS: versatilidade técnica devido a diferentes CG-MS: baixa especificidade na detecção de
métodos de ionização diferentes compostos
b) CG-MS: alta especificidade na detecção e CL-MS: problemas relacionados à interface do
quantificação de diferentes compostos sistema (velocidade de bombeamento, vazão de
eluente e fonte de ionização).
c) CL-MS: exclui a necessidade de etapas de CG-MS: não possibilita que uma única matriz
derivação da amostra. biológica possa ser usada para várias
determinações quantitativas.
d) b) CL-MS: análise de diferentes analitos devem CG-MS: tem limitações para aplicações em
ser realizadas em amostragens distintas. compostos pouco voláteis, necessitando de
tratamento de derivação da amostra.
e) CG-MS: amostras pouco voláteis não interferem CL-MS: não admite a utilização de amostrador
na análise de analitos muito voláteis, pois estes automático para amostras de drogas de abuso.
não são identificados pelo detector.

20) (IFSP) Na purificação de proteínas são empregados métodos que se baseiam nas diferenças de suas
propriedades. Algumas propriedades de proteínas e de outras biomoléculas usadas nos vários procedimentos
de separação são: solubilidade, carga iônica, volume hidrodinâmico, tamanho molecular e especificidade de
ligação com outras moléculas biológicas. Considere a seguinte técnica:
As moléculas carregadas ligam-se aos grupos de carga de sinal contrário imobilizados na matriz. Resinas à
base de celulose e agarose são as matrizes mais comuns usadas nesta técnica. A concentração de proteínas
no efluente da coluna pode ser monitorada por espectroscopia de absorção. As medidas são em geral feitas
em comprimento de onda próximo de 280 nm, região em que a maioria das proteínas absorve luz. O nome
da técnica de separação descrita e o nome da região do espectro eletromagnético em que as proteínas
absorvem luz são, respectivamente,

a) Eletroforese e infravermelho
b) Eletroforese e ultravioleta
c) Cromatografia de troca iônica e ultravioleta
d) Cromatografia de troc a iônica e infravermelho
e) Cromatografia por afinidade e infravermelho

21) (Perito Criminal - adaptado) A análise do perfil de truxilinas, principais alcaloides presentes nacocaína,
é feita por cromatografia gasosa com detector de captura de elétrons (CG-DCE). Durante a corrida
cromatográfica, a temperatura do forno permanece inicialmente a 100 °C por 5 min. Em seguida, a
 temperatura é elevada a 25 °C/min até 160 °C, depois a 4 °C/min até 245 °C e, finalmente, a 25 °C/min até
280 °C. Hélio é usado como gás de arraste a um fluxo de 1,0 mL/min. A amostra é injetada em uma alça de
injeção de 1,0 μL, em modo splitless, com o injetor mantido a 250 °C. O detector de captura de elétrons
permanece a 300 °C, com fluxo de nitrogênio de 60,0 mL/min. A tabela a seguir mostra as informações
obtidas através do cromatograma.

Concentração padrão (mg/L) Área

0,94 43546
1,36 64748
2,19 114933
3,02 160984
3,85 203875
4,68 248663
Amostra A 179543
Amostra B 253459

a) Utilizando a técnica de padronização externa, construa a curva analítica para quantificação de truxilinas
presentes em amostras desconhecidas de cocaína A e B.
b) Diga se as amostras em questão podem ser analisadas a partir da curva analítica construída.
c) Descreva como seria construída a curva analítica se fosse utilizado um padrão interno.

22) (COMPESA) Foi realizado o desenvolvimento de um método cromatográfico para resolução e quantificação
de componentes principais, de diferentes polaridades, em uma mistura complexa. O cromatograma A foi obtido
em uma coluna apolar com o forno programado em modo isotérmico, a 45 °C. Modificações no método
cromatográfico foram realizadas em sequência, sendo obtidos os cromatogramas B e C. A sequência de
modificações no método cromatográfico adotadas pelo analista para a obtenção dos cromatogramas B e C,
partindo do cromatograma A, foram respectivamente:

a) Diluição da amostra e adoção de uma coluna de maior polaridade.

b) Aumento da temperatura do injetor e diminuição da temperatura do forno.
c) Diminuição da temperatura do forno em modo isotérmico e adoção de uma coluna de maior polaridade.
d) Aumento da temperatura do forno em modo isotérmico e aumento programado da temperatura do forno.
e) Aumento programado da temperatura do forno e diminuição da temperatura do injetor.
23) A figura abaixo representa um cromatograma obtido por cromatografia gasosa e corresponde à separação de
uma mistura contendo dois componentes x e y. Com base no que foi exposto, são feitas as seguintes afirmações:

I) Neste caso, a fase móvel é um gás e a fase fixa pode ser sólida ou líquida não volátil.
II) A figura mostra que o componente y foi mais retido pela coluna cromatográfica.
III) A capacidade de separar os componentes x e y depende das respostas do detector.
IV) O gás de arraste numa cromatografia precisa ser puro e ter inércia química.

24) (Perito Criminal): Embora a cromatografia gasosa e a cromatografia líquida tenham muitas características em
comum, há diferenças em relação aos requisitos de amostra e de analito, seus formatos e o papel da fase móvel
em ambas. A respeito das especificidades das cromatografias líquida e gasosa, analise as afirmativas abaixo.
I. Para compostos termicamente instáveis, a cromatografia gasosa é mais adequada.
II. Em cromatografia líquida, a retenção entre os analitos pode ser alterada mudando a fase móvel.
III. A retenção de um soluto em cromatografia líquida depende da interação dos componentes da amostra tanto
com a fase móvel quanto com a estacionária.

25) (Perito Criminal adaptado): O seguinte cromatograma refere-se a uma análise de 4 agrotóxicos da classe dos
carbamatos, realizada por cromatografia gasosa. Com base nas informações apresentadas no cromatograma e
sabendo que o pico 1 refere-se ao tempo morto da análise cromatográfica, assinale a alternativa correta.

a) Nas condições dessa análise cromatográfica, o composto 4 apresentou maior interação com a FE do que o
composto 5.
b) Pelo fato de o composto 2 possuir o pico cromatográfico com maior altura, obrigatoriamente o seu pico
terá maior valor de área que os demais compostos.
c) Sabendo que o pico 3 está relacionado com o um inseticida com alta toxicidade cuja fórmula molecular é
C11H15NO3, é correto afirmar que, se a mesma análise fosse realizada com um cromatógrafo gasoso
acoplado a um detector de condutividade térmica (DCT), o inseticida poderia ser analisado.
d) O tempo de retenção ajustado (t R’) é calculado dividindo-se o tempo de retenção (t R) do referido pico pelo
tempo morto (t M).
e) No modo de injeção com divisão (split), toda a amostra é introduzida no sistema cromatográfico; esta
técnica é adequada particularmente na análise de traços, bastante comum em peritagens.