Fungos

Fungos são organismos eucariontes, maioritariamente heterotróficos podendo obter

energia proveniente de matéria orgânica viva ou em decomposição. Na sua maioria os
fungos são multicelulares e formam uma rede filamentosa chamada hifa onde os esporos
são produzidos.(MADIGAN 2014)

Coloração diferencial (Azul de Lactofenol ou Lactophenol Cotton Blue)

A coloração com lactophenol cotton blue é uma técnica bastante usada em

microbiologia para visualização e identificação morfológica e estruturas de fungos.

A solução de lactofenol apresenta cor azula e é feita pela combinação de três reagentes:

 Fenol: Desempenha o papel de desinfetante, matando outros microrganismos

 Acido Lático: preserva as estruturas dos fungos
 Anilina azul(cotton blue) :responsável pela coloração da parede celular dos
fungos e de outras estruturas.

Procedimento para preparação do lactophenol Cotton Blue

Matérias necessários para preparar 50 ml de Lactophenol Cotton Blue

 50ml de água destilada

 0.125g de anilina azul
 50 g de cristais de fenol
 100ml de glicerol
 50ml de acido láctico
 Etanol 70%

Obs: A solução de lactophenol Cotton Blue deve ser preparada 2 dias antes da
utilização .

1º dia Dissolução do Cotton Blue: No primeiro dia, misture o Cotton Blue com água destilada e
deixe de um dia para o outro ((ajudará a eliminar o corante insolúvel)) para a devida dissolução.

2º dia Dissolução dos cristais de fenol: No segundo dia, dissolva os cristais de fenol em
ácido lático usando um misturador magnético até que o fenol seja dissolvido.
3. Adicione glicerol a mistura e certifique-se de homogeneizar a solução .

4.Filtracão: Filtre a solução da anilina azul e agua destilada na solução de

Fenol,Glicerol e ácido láctico e misture.

5. Armazene a temperatura ambiente.

Procedimentos da coloração de Lactoferol azul de algodão.

Regras básicas:

 Desinfeção do local de trabalho

 Esterilização

Materiais necessários

 Lamparina
 Lamina
 Lamela
 Agulha de inoculação

Reagente.

 Lactofenol

1º. Esterilizar a lamina passando-a vezes repetidas sob a chama da lamparina

2º Coloque uma gota de Lactofenol nesta lamina

3º Esterilizar a agulha de inoculação e remover uma amostra do material a ser

observado e colocar sob a lamina.

4º Com auxilio da agulha de dissecação espalhe com cautela a amostra sob lamina, em
seguida cubra a lamina com uma lamela.

6º Selar as bordas da lamina com um esmalte – Opcional

7º leve a lamina ao microscópio e observe.

NB:Os esporos, hifas e outras estruturas apresentaram uma cor azulada a submissão
destes procedimentos.
Esta técnica pode ser usada para coloração de diferentes fungos como é o caso do
Aspergillus niger um dos fungos responsáveis pelas machas escurecidas em vegetais e
frutas.

Made up by Shélzio Cuamba

Referências

 MADIGAN M. Et al; Brock Biology of microorganisms;14th ed;person

education; San Francisco, 2015
 https://microbenotes.com/lactophenol-cotton-blue-staining/
 https://microbenotes.com/aspergillus-niger/

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