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BIOSSEGURANÇA
RISCOS RISCOS
(Portaria do Ministério do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78)
1
08/04/2013
RISCOS BIOLÓGICOS
Agentes de risco biológico: bactérias, fungos, parasitos, MAPA DE RISCO
vírus, microrganismos patogênicos em geral.
MAPA DE RISCO
MAPA DE RISCO Cores usadas no Mapa de Risco e Tabela de Gravidade
2
08/04/2013
3
08/04/2013
EQUIPAMENTOS DE SEGURANÇA
4
08/04/2013
Classe I
• Jaleco comprido • Gorro Classe II
• Luvas • Luvas criopreservação
Classe III
• Óculos/Proteção facial • Luvas material aquecido
• MáscaraProteção • Respirador
• Sapatos • Vacinação
5
08/04/2013
1. NB-1
2. NB-2
Combinação de:
3. NB-3
Práticas
4. NB-4
Equipamento de segurança
Crescentes no maior grau de contenção e
complexidade do nível de proteção biológica
Instalações
6
08/04/2013
NB-1 – Agentes nunca descritos como causadores NB-2 – Agentes associados com doença humana com
de doenças e que não constituem risco para o meio pouco risco para os profissionais de laboratório.
ambiente. Baixo risco individual e coletivo. Moderado risco individual e baixo risco coletivo.
NB-3 – Patógenos associados com doença humana NB-4 – Agentes perigosos/exóticos que causam graves
podendo causar graves enfermidades aos profissionais doenças para o homem e representam elevado risco para
de laboratório. Risco individual elevado e risco os profissionais de laboratório e para a coletividade.
coletivo baixo.
Ex.: Laboratórios que trabalham com agentes altamente
Ex.: Laboratórios para pesquisa de AIDS e tuberculose infecciosos e que se propagam facilmente podendo
levar a morte (vírus Ebola, da Raiva, etc)
Sinalização Simbologia
Exemplos Exemplos
7
05/12/2017
Órgãos linfóides
Prática TIMO
Cápsula
Lâminas Septo
Timo
Linfonodo
Baço
Apêndice cecal
Tonsilas
Placas de Peyer Coloração Hematoxilina e Eosina
TIMO TIMO
Cápsula
Lóbulos
córtex: céls.
céls. imaturas
Septo medula: céls.
céls. maduras
TIMO Linfonodo
Corpúsculo de Hassal
1
05/12/2017
Linfonodo Linfonodo
Nódulos linfóides •Córtex:
Linfócitos B
Paracórtex
•Paracórtex:
Linfócitos T
•Medula:
Linfonodo Baço
Nódulos linfóides Arteríola
Baço Tonsila
Epitélio estratificado pavimentoso
Arteríola
Nódulos linfóides
•Bainha periarteriolar: Linf. T
•Folículos zona marginal: Linf. B Coloração Hematoxilina e Eosina
2
05/12/2017
Apêndice Apêndice
CL – Criptas de Lieberkuhn
NL - Nódulos linfóides
submucosa
2- Folículos linfóides
da submucosa
3
09/04/2013
Algodão
Álcool
Confecção esfregaços sanguineos
Lanceta
Lâminas
Luvas
Papel filtro
Lápis
Coleta sangue por punção capilar Coleta sangue por punção capilar
Assepsia
1. Fixar o esfregaço: cobrir a lâmina com álcool metílico. Deixar 3-5 min.
1
09/04/2013
Células sanguíneas
Leucócitos
LEUCÓCITOS Granulócitos
Neutrófilos
Granulócitos
Monócitos
Linfócitos
•Polimorfonucleares
•50-60% dos leucócitos circulantes
Granulócitos Granulócitos
Basófilos Eosinófilos
1
09/04/2013
Linfócitos Monócitos
Eosinófilo Neutrófilo
Eosinófilo tem grânulos eosinofílicos grandes
Neutrófilo tem grânulos pequenos
2
09/04/2013
Plasma
Porção fluida do sangue não
coagulado. Contém fatores de Plasma
Plaquetas/
Hemácias
Sangue total
com Plasma
anticoagulante
Céls. brancas e
plaquetas
Hemácias
Centrífuga
Soro
Porção líquida do sangue, após a Soro
Soro x Plasma
coagulação e remoção do coágulo.
Não contém elementos celulares, Coágulo Amosta de Coágulo
sangue sem
nem fatores de coagulação. anticoagulante
Soro
Soro claro
(amostra aceita)
Amosta de
Temperatura Coágulo sangue com Plasma
Amosta de
anticoagulante
sangue sem Céls. Sang.
anticoagulante ambiente
Glóbulos vermelhos Soro mais
Centrífuga
Soro hemolisado Células brancas e fatores de
(amostra rejeitada) Plaquetas coagulação
Coágulo
Soro x Plasma
Amosta
de Plasma
sangue
Céls. Sang.
+ outros
Plasma Soro Fibrinogênio fatores de
coagulação
+ outros
Soro Fibrinogênio
Plasma fatores de
coagulação
1
09/04/2013
Sistema ABO
Prática Grupos Sanguíneos • Ag presente nas hemácias e em outras células do
organismo, exceto SNC (leucócitos, endotélio
vascular, etc)
Sistemas sanguíneos por ser o mais imunogênico, ou seja, por ter maior capacidade de
ABO
São conhecidos mais de 270 antígenos provocar a produção de anticorpos, seguido pelo sistema Rh.
Rh
eritrocitários herdáveis, constituindo MNS
mais de 20 sistemas de grupo Kell
sangüíneos. Lewis
Duffy
Kidd
etc...
Naturais Imunes
Presentes sem imunização anterior Presentes somente se houver imunização anterior
IgM IgG
Origem (α
(α-Ag presentes em microorg. e vegetais) Reação com o Ag > 37º
37º (Ac quentes)
Aparecem meses após o nascimento
Reação com o Ag < 37º
37º (Ac frios)
1
09/04/2013
Imunes B Anti A
Gravidez: Rhesus, Kell, + Outros AB -
Transfusão: Rh, Kell, + Outros
O Anti A/Anti B
• Antígenos C, D e E
Eritrobastose Fetal
Frequência de Grupos ABO & Doença Hemolítica do RN (DHRN)
Rh(D)
TIPO SANGUÍNEO INCIDÊNCIA
O Rh+ 38 %
O Rh- 7%
A Rh+ 35 %
A Rh- 6 %
B Rh+ 8 %
B Rh- 1 %
AB Rh+ 3 % O antígeno D é a mais importante causa de DHRN
AB Rh- 2 % (mãe D neg, pai D pos, e feto D pos), na 2ª gestação
2
09/04/2013
3
Imunodiagnóstico
• Anticorpo
• Antígeno
g
Sorologia ou Diagnóstico sorológico
Imunodiagnóstico
Sinalizadores da interação Ag-Ac
Concentração de Ag ou Ac •Afinidade
pH
H •Avidez
Temperatura
Tempo de reação
Afinidade Afinidade
• Força da reação entre um determinante antigênico
e um único sítio de ligação do anticorpo
Ac
Ac
Avidez Avidez
Sensibilidade Sensibilidade
• Capacidade que o teste tem de discriminar,
dentre os suspeitos de uma patologia, aqueles
realmente infectados.
• Avaliação:
•Prognóstico da doença
•Eficácia terapêutica
•Estado imune
Reações Ag/Ac
Artifício laboratorial para demonstrar a reação Os ensaios imunológicos podem ser realizados por
meio de técnicas não quantitativas (qualitativas ou semi
q
quantitativas)
)
Antígeno X Anticorpo
Reações de precipitação e aglutinação
Imunoensaios Imunoensaios
Ac - Ag solúvel
Reações de Aglutinação
Aglutinação/Hemaglutinação
Pesquisa de Ac
+
Ensaio Imunoenzimático (ELISA)
Anticorpo
Substrato secundário
Ensaio Imunoenzimático (ELISA)
Produto
colorido
Pesquisa de Ag
Anticorpo
primário
Antígenos na placa
+
substrato
Imunofluorescência
• Direta
– Ac contra Ag fixado a lâmina é marcado com
Reações para detectar fluorocromo
antígenos
g associados a células A marcado
Ac d
com
fluorocromo
Ag
Tecido
Imunofluorescência Imunocromatografia
• Indireta
– Ag fixado na lâmina
– Ac teste (não marcado)
– Anti-Ac marcado com fluorocromo é usado para
detectar o 1º anticorpo.
POSITIVO
NEGATIVO
INVÁLIDO
Ag Ag