RNA

Israel José Pereira Garcia

 Hidroxila no carbono 2 da pentose (Ribose)

Relembrar Fita simples

alguns Armazenamento de informação e de catálise (Robozimas)

conceitos Proteína + RNA = Ribonucleoproteínas (RNP)

sobre Toda informação do RNA é derivada do DNA (exceto de vírus

RNA de RNA)

DNA para RNA (Transcrição)

Soma de todas moléculas de RNA produzida em uma célula é

chamada de transcriptoma.
 Tipos de RNA

RNA mensageiro • Codificam a sequência de aminoácidos de um ou

(mRNA) mais polipeptídios.

RNA • Leem a informação codificada no mRNA e transferem

o aminoácido adequado para uma cadeia polipeptídica
transportadores em crescimento.
(tRNA)
• São componentes dos ribossomos.
RNA ribossômicos
(rRNA)
• Função catalítica, estrutural e regulação.
RNA não-
codificantes (ncRNA)
Replicação x
Transcrição
 Replicação x
Transcrição
Parecido (igual)
• Mecanismo químico fundamental

• Polaridade (direção da síntese): 5’ para 3’

• Uso de molde (somente uma fita)

• Início, alongamento e terminação

 Replicação x
Transcrição
Parecido (igual) Diferente
• Mecanismo químico fundamental
• Não requer primer
• Polaridade (direção da síntese): 5’ para
• As enzimas não apresentam atividade
3’
exonuclease 3´- 5´.
• Uso de molde (somente uma fita)

• Início, alongamento e terminação

Quem realiza a síntese de RNA?
 Quem realiza a síntese de RNA?

RNA
 Quem realiza a síntese de RNA?

RNA
Ribonucleotídeos
(ATP, UTP, GTP e CTP)
 Quem realiza a síntese de RNA?
RNA

DNA subertorcido

DNA supertorcido
 Quem realiza a síntese de RNA?
RNA
 Qual é a RNA
Polimerase?
• Uma subunidade σ (sigma), se liga transitoriamente ao centro e
direciona a enzima para sítios específicos no DNA.

A RNA Polimerase não possui sítio ativo de

revisão 3’ para 5’ separado igual a DNA
polimerase (1 erro a cada 104 a 105 nt).
 Qual é a RNA
Polimerase?
• Uma subunidade σ (sigma), se liga transitoriamente ao centro e
direciona a enzima para sítios específicos no DNA.

Subunidade Função
α atua como andaime no qual outras
subunidade se unem
β Participa da iniciação e alongamento,
forma ligações fosfodiéster
β’ Liga-se a molde de DNA
ω Desconhecido
Transcrição em procariotos
• Início
• Alongamento
• Terminação
Como se inicia a transcrição em
procariotos?
 Como se inicia a transcrição em
procariotos?
• Se o início fosse aleatório seria um desperdício de energia.
• A RNA Polimerase se liga a uma região específica no DNA,
chamadas de PROMOTORES.
• Em E.Coli, a RNA polimerase se liga em uma região se cerca de 70
pb antes do sítio de inicio da transcrição até 30 pb depois (-70 e + 30).

Gene de Interesse
- 70 + 30
 Como se inicia a transcrição em
procariotos?
• Nos procariotos, são reconhecidas duas regiões localizadas, -10 e -35
nucleotídeos antes do início da transcrição (+1).

- 10 TATAAT
Região
Consenso
- 35 TTGGACA
Como se inicia a transcrição em
procariotos?
 Como se inicia a transcrição em
procariotos?
• Análises dos promotores mais comuns de bactérias, encontra-se duas
regiões semelhantes em torno das posições – 10 e -35.

Ligado a subunidade α da RNA

Polimerase
Como se inicia a transcrição em
procariotos?
Via de
Via de

O DNA ligado permanece

em dupla fita
Via de

O DNA ligado está

parcialmente
desenrolado próximo a
região -10
Via de
Via de
 Regulação da transcrição
• Proporções necessárias
• Qualquer etapa (início, alongamento ou termino)
• Promotor

Proteínas
próximas pode afetar os níveis de transcrição

Facilitar a ligação da RNA Polimerase Bloquear a ligação da RNA Polimerase

(Aumenta a transcrição) - Ativadoras (diminui a transcrição) - Repressoras
 Termino da Transcrição em procarioto
• Sequência de DNA específica que indicam o fim da transcrição.
• Procariotos: Duas Classes
• Fator ρ (Rho)
• Independente do fator ρ
 Termino da
• Independente do fator ρ

• Região produz transcrito de RNA com

sequências autocomplementares (Grampos) –
15 a 20 nt

• Filamento altamente conservado de três

resíduos A (AAA) na fita molde que são
transcritos para
 Termino da
• Dependente ao fator ρ

• Não tem os resíduos conservado AAA

• Regiões rica em CA (elemento rut)
• A proteína ρ se associa ao RNA que
irá dissociar o RNA da RNA
Polimerase
Transcrição em eucarioto
 Transcrição em
• Núcleo
• Três RNA-polimerases (I, II e III).

Mitocôndria e cloroplasto tem

suasprópriaRNA
polimerases, semelhantes a
bactérias
 Transcrição em
• RNA-polimerases II
• Grande variedade de promotores

Iniciadora
 Transcrição em
• RNA-polimerases II

• 12 subunidades

• A maior subunidade é a RBP1 (homologa a β’ das bactérias)

• Longa cauda carboxiterminal (-YSPTSPS-)(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser): Domínio
carboxiterminal (CTD)
• Fatores de transcrição (TFII).

• RBP2 (homologa a β das bactérias)

• RBP3-RBP11 (homologa a α das bactérias)

• Montagem, Iniciação, Alongamento e Terminação

Terminação
 RNA Polimerase são alvos de fármacos
Rifampicina: antibiótico para o tratamento da turbeculose (Mycobacterium turbeculosis) –
mata 1,8 milhão por ano

Asp 516
His 526
Ser 531
 Processamento do
• Em alguns RNA de procariotos
• Praticamente todos de eucariotos
• Processamento: Adição ou deleção de nucleotídeos, bem com sua
modificação.
 Processamento do
• Em alguns RNA de procariotos
• Praticamente todos de eucariotos
• Processamento: Adição ou deleção de nucleotídeos, bem com sua
modificação.

RNA recém-sintetizado: Transcrito primário

 Processamento de RNA em

5’ 3’
DNA Região Intergênica Região Gênica Região Intergênica Região Gênica Região Intergênica
(Íntron) (Éxon) (Íntron) (Éxon) (Íntron)

Transcrito Região Intergênica Região Gênica Região Intergênica Região Gênica Região Intergênica
primário
de RNA
(Íntron) (Éxon) (Íntron) (Éxon) (Íntron)

Splicing de RNA

mRNA Região Gênica Região Gênica

maduro (Éxon) (Éxon)

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 Processamento de RNA em
• Modificados na extremidades (5’ e 3’)

• 5’ = Modificação na estrutura do nucleotídeo = 5’ cap

• 3’ = Clivagem de alguns nucleotídeo e a adição de 80 a 250 nt de A = Cauda poli (A)

42
 Processamento Co-Transcricional
• Adição do “cap” no terminal 5’

• “Splicing" - Montagem de segmentos codificadores

• Adição da cauda poli-A (Poliadenilação) no terminal 3'

 Adição do “cap” no terminal 5'
• 7-metilguanina

Proteção do mRNA

• Ligaçãodo mRNA ao
ribossomo
 “Splicing" - Montagem de segmentos
codificadores
• Há quatro classes de íntrons
 Splicing: Grupo 01 e 02
• Duas reações de transesterificação

• Grupo 01: grupo 3’-hidroxila Adenina (nucleófilo) - Linear

• Grupo 02: grupo 2’ hidroxila Guanina (nucleófilo) - Laço

 Spliceossoma
• Um grande complexo de ribonucleoproteínas
pequenas (snRNPs)

• Cada snRNPs contém uma classe de RNA de

eucarioto (100 a 200 nt) – snRNA

• U1, U2, U4, U5 e U6 (núcleo)

• U3 também é encontrada no núcleo, mas está

envolvida na montagem do ribossomo e não faz parte
do spliceossoma
 Adição da cauda poli-A (Poliadenilação)
no terminal 3'
• 50 a 250 resíduos de A (Cauda poli-
A)
• Pol II sintetizar 5’-AAUAAA-3’

• Proteção do mRNA e ligação ao

ribossomo
 Splicing alternativo
• Um gene pode dar origem a vários produtos por meio do
processamento.
• Tecido específico
• Quando um éxon pode ou não ser incorporado ao transcrito maduro.
• 95 % dos genes humanos pode sofrem Splicing alternativo.
Splicing alternativo (Escolha do sítio poli (A)
Calcitonina é um hormônio peptídico
produzido primariamente na glândula tireoide.
Sua secreção é normalmente controlada de
acordo com o aumento e queda dos níveis de
cálcio, se ocorre aumento do cálcio do sangue
também ocorre aumento das concentrações de
calcitonina. Seus efeitos são a redução da
reabsorção óssea osteoclástica.

CGRP é um peptídeo relacionado ao gene da

calcitonina, crises de enxaqueca.
Bom almoço!