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Microbiologia clínica

Meio de Cultura

• Utilizados com frequência em laboratórios;


• Substâncias formuladas com a finalidade de fornecer
nutrientes para que os microrganismos se multipliquem;
• O desenvolvimento destes organismos permite, entre
outras coisas, a sua identificação e análise.
Meio de Cultura
Em relação ao estado físico, podem ser:
✓ Líquidos – também chamados de caldos;
✓ Gelificados - acréscimo de ágar ao meio líquido.

Quanto à composição, são classificados como:


✓ Naturais;
✓ Sintéticos;
✓ Semissintéticos.
Meio de Cultura

•Meio de Enriquecimento: Preparações normalmente


líquidos que promovem o aumento do número de bactérias.
Ex: Caldo BHI
•Meio de Transporte: Não possuem nutrientes, apenas
um agente redutor. Previne desidratação e oxidação dos
patógenos

Ex: Stuart
Meio de Cultura

•Meio Seletivo: Utilizados para selecionar as espécies que


serão isoladas e impedir o crescimento de contaminantes.

Ex: Ágar Sal Manitol e Agar SS


•Meio Diferencial: Promove mudança na coloração das

colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários


gêneros e espécies.

Ex: Ágar EMB


Esterilização e preparo
de meios
METODOS FÍSICOS

•Fervura – Método caseiro (100º C 20 min.)

•Autoclavação – esteriliza por vapor úmido e


pressão (121ºC 30 min.)
Válvula de escape da
estufa de esterilização
Deionizador

❑Coluna catiônica - Troca de


íons hidrogênio por
contaminantes
catiônicos(ferro,zinco, cobre);
❑ Coluna aniônica - Troca de
hidroxila por contaminantes
aniônicos(sílica, nitrato, fosfato)
Destilador

❑Água purificada por


aquecimento;
❑Ocorre vaporização e depois
condensação.
Capela de exaustão

Usada para reagentes químicos apenas, pois


tudo é liberado no meio ambiente

O ar circula e sai sem


passar por um filtro
Capela de fluxo laminar

É a mais segura já que contem um sistema de


filtração e luz UV.
Consegue filtrar 99,6% dos
Microrganismos;
O ar é filtrado o tempo todo.
O filtro tem tempo de vida.
FLAMBAGEM

BICO DE BUNSEN
530ºC 1540ºC

300ºC
Lamparina
Esterilização por filtração

•Alguns meios não podem ser autoclavados ou


submetido a vapor fluente;
•O método mais eficaz é a filtração por vácuo;
•O método é simples e eficaz, pois não
compromete em perda de enzimas, aminoácidos
ou açúcares;
•Se utiliza uma bomba de vácuo para tal fim;
Membrana filtrante 0,45 µm

Copo de funil

Garra

Base suporte
sdsd kitassato

O produto filtrado
fica armazenado
no kitassato
❑Dentro da capela de fluxo laminar realizar a
filtração;
❑Não filtrar uma quantidade excessiva para não
haver rompimento da membrana;
❑Para não haver perigo colocar
um pulmão de kitassato para
evitar respingos na bomba.
Procedimento
sdsd
1. Acopla as vidrarias;
2. Ligar a mangueira
de silicone a bomba
sdsd
Filtro para seringa
Desvantagem – Só consegue filtra pequenas
quantidades.
Vantagem – Barato e descartável e fácil manuseio.
Esterilização por radiação

Vantagens – Pode ser usada para materiais que


não podem ser submetido ao calor(estufa ou
autoclave);
Alto poder de penetração;
Atravessa papelão, papel e plástico com
facilidade.
Esterilização por radiação

Desvantagens – Custo muito elevado,


necessidade de alta qualificação profissional;
Controle médico constante nos profissionais
(carcinogênico);
Conhecimento ainda escasso sobre os
radioativos.
EX: Raios gama, beta, ultra violeta
Como a radiação funciona?

❖Ruptura da estrutura do DNA

✓Hoje a luz de UV é muito utilizada em


laboratórios;
✓A desvantagem é que ela só funciona como
varredura e é muito carcinogênica.
Estufa de BOD (Demanda Bioquímica de Oxigênio)
• CuSO4 (Sulfato de cobre)
• Palha de aço
• Antiácido
• Água
• Copo descartável
• Saco de dindin (sacolé)
Microaerofilia
• Vela

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