Mecanismos de variações genéticas em

bactérias e suas consequências na resistência

aos antibióticos

PROFESSORA: TAYNNÁ EL
CURY FABRÍCIA RAGGI
 Transferência genética e recombinação
• O que é recombinação gênica? Qual a importância?

Troca de material genético entre duas moléculas de DNA.

Contribui para diversidade genética de uma população.

• Transferência Gênica: Ocorre quando os genes são passados de um organismo para o outro.

Transferência gênica vertical – Descendentes / Transferência gênica horizontal – mesma geração.

Fluxo: Célula DOADORA -> Célula RECEPTORA.

Transferência genética e recombinação
• Célula DOADORA -> Célula RECEPTORA.
Parte do DNA doador é transferido e incorporado pelo DNA receptor. O restante é degrado por
enzimas.
-> DNA recombinante = fragmento DNA doado + DNA original.

Transferência de material genético entre bactérias não é frequente.

Quais os tipos de mecanismos de variações genéticas entre bactérias?

TRANSFORMAÇÃO, CONJUGAÇÃO e TRANDUÇÃO.

 Transformação em
bactérias
• Fragmento de DNA
transferido de uma bactéria
para outra através do meio.
Conjugação em bactérias
• A conjugação requer o contato direto célula a célula,
no qual a célula doadora transfere uma cópia fita
simples do plasmídeo para célula receptora. Após
receber o plasmídeo, a célula receptora sintetiza a
cópia complementar. O pili sexual auxilia na troca de
material genético pela célula doadora.

•É o processo sexual de transferência de

genes de uma bactéria doadora para uma
receptora.
 Conjugação em bactérias
• Os plasmídeos diferem dos cromossomos bacterianos, pois os genes que eles transportam normalmente
não são essenciais para o crescimento da célula sob condições normais. Os plasmídeos responsáveis pela
conjugação são transmissíveis entre as células durante conjugação.

• O fator F (fator de fertilidade) foi o primeiro

plasmídeo observado a ser transferido entre as
células durante a conjugação.

•Doadores transportando fatores F (células F+)

transferem o plasmídeo aos receptores (células F–),
que, como resultado, tornam-se células F+.
Transdução em bactérias
• O DNA bacteriano é transferido de uma célula
doadora para uma célula receptora dentro de um
vírus que infecta bactérias, denominado bacteriófago,
ou fago.
Plasmídeos e Transposons
 Plasmídeos
• Fatores R (fatores de resistência) - transportam genes que conferem a célula hospedeira resistência a
antibióticos, metais pesados ou toxinas celulares.
 Dois grupos de genes:
- Fator de transferência de resistência (FTR): inclui genes para replicação do plasmídeo e conjugação. -
Determinante-r: possui os genes de resistência; ele codifica a produção de enzimas que inativam
certas drogas ou substancias tóxicas.

• Importância: Problemas para o tratamento de doenças infeciosas com antibiótico;

Ferramenta importante na engenharia genética.
Transposons
• Os transposons são pequenos segmentos de DNA que podem se mover (ser “transpostos”) de
uma região de uma molécula de DNA para outra – RAROS.

•Podem inativar genes, transportar genes e conceder resistência – dentro ou entre bactérias.
Antibióticos
• Quando as defesas normais do organismo não são capazes de impedir ou derrotar uma doença,
ela frequentemente pode ser tratada pelo uso de drogas antimicrobianas;

• Antigamente pouco podia ser feito para tratar muitas doenças infecciosas letais;

• Paul Ehrlich, na Alemanha – Imaginava “bala mágica” – cura de doenças;

• Antibióticos – observadas naturalmente na microbiologia, e o mecanismo de inibição – antibiose.

Antibióticos
• Identificação e o cultivo de colônias de
organismos produtores de antibióticos –
TRABALHOSO;

• Nem todo microrganismo produz antibióticos

compatíveis para uso – tóxicos ou inúteis.
O espectro de atividade
antimicrobiana
• Eucariota x Procariota – Os antibióticos antibacterianos atacam nossas células ??
• Patógeno eucarioto – dificuldade de tratamento aumenta;
• Antimicrobianos virais – geralmente mais tóxicos para os pacientes - patógeno está dentro da célula
do hospedeiro;
• Antibióticos de espectro restrito de atividade microbiana - alcance de tipos microbianos diferentes;
• Antibióticos de amplo espectro - antibióticos que afetam amplamente vários tipos de bactérias;
• Antibiótico - toxicidade seletiva – atua em diversas estruturas/componentes bacterianos;
• Quando a identidade do patógeno não é conhecida? Amplo espectro?
• Microbiota normal – microrganismos competem – antibiótico mata – infecções oportunistas.
Ação das drogas antimicrobianas
Ação das drogas antimicrobianas
1. Inibição da síntese de parede celular – ex. penicilina e alguns outros antibióticos previnem a
síntese de peptideoglicanos intactos; consequentemente, a parede celular fica enfraquecida e a
célula sofre lise - pouca toxicidade para as células do hospedeiro;
2. Inibição da síntese proteica - existem diferenças entre procariotas e eucariotas
na estrutura ribossômica - razão da toxicidade seletiva dos antibióticos;
3. Dano à membrana plasmática - induzem mudanças na permeabilidade da
membrana plasmática - essas mudanças resultam na perda de metabólitos
importantes pela célula microbiana. Ex. Antifúngicos.
 Ação das drogas antimicrobianas
4. Inibição da síntese de ácidos nucleicos - interferem nos processos de replicação de
DNA e transcrição em microrganismos – uso limitado;

5. Inibição da síntese de metabólitos essenciais – pode interferir por competição a

algum substrato prejudicando algum funcionamento enzimático essencial.
 Antibióticos antibacterianos
Inibidores da síntese de parede celular

• Penicilina - grupo que engloba mais de 50 antibióticos quimicamente relacionados;

• CARACTERÍSTICA: anel β-lactâmico;

• Tipos penicilina: natural (extraídas de culturas do bolor Penicillium - espectro reduzido/ sensíveis a
β-lactamases);

Semissintética: parte da penicilina é produzida pelo bolor e parte é adicionada sinteticamente

(manipulação da estrutura química)

• Efeitos da combinação de drogas – sinergismo.

Resistência a drogas antimicrobianas
https://portal.fiocruz.br/noticia/ameaca-global-das-bacterias-resistentes-aos-antibioticos
Resistência a drogas antimicrobianas
• Destruição ou inativação enzimática da droga - o anel β-lactâmico, que é alvo de enzimas β-
lactamases que hidrolisam seletivamente essa estrutura - Cerca de 200 variações das enzimas;

• Prevenção da entrada no sítio-alvo dentro do microrganismo - Bactérias gram-negativas –

mecanismo de defesa pela membrana - mutantes bacterianos modificaram a abertura das
porinas de forma que os antibióticos são incapazes de entrar no espaço periplasmático - β-
lactamases podem estar presentes no espaço periplasmático, mantendo o antibiótico fora da
célula.
Resistência a drogas antimicrobianas
• Alterações no sítio-alvo da droga – Pequenas modificações no sítio podem neutralizar os efeitos
dos antibióticos sem que ocorram alterações significativas nas funções celulares;

• Efluxo rápido (ejeção) do antibiótico - Certas proteínas na membrana plasmática de bactérias

agem como bombas que expelem os antibióticos, impedindo que alcancem uma concentração
efetiva.
Mecanismo de resistência
Uso inadequado de antibióticos
• Uso inadequado:
- dor de cabeça?????
- dor de garganta...
- compra sem receita...
- Tempo de uso mais curto que o necessário...
- medicamentos vencidos ou adulterados...
- resfriado...

• Custo e prevenção da resistência - A resistência aos antibióticos representa um alto custo.

Exame – Antibiograma - Testes de disco -
difusão
• Método - placa de Petri com meio de cultura sólido - superfície uniformemente inoculada com
microrganismo;

- Discos de filtro de papel impregnados com agentes terapêuticos em concentrações conhecidas são
colocados na superfície do meio de cultura;

- Durante a incubação, os agentes quimioterápicos se difundem dos discos para o ágar. Quanto mais
distante do disco o agente se difundir, menor será sua concentração;

- Efetivo contra o organismo testado - uma zona de inibição se formará ao redor do disco após um
período de incubação padronizado.
Exame – Antibiograma - Testes de disco -
difusão
- O diâmetro da zona de inibição pode ser medido e, em geral, quanto
maior a zona, maior a suscetibilidade do micro-organismo ao antibiótico;

- O diâmetro da zona de inibição é comparado aos valores em uma tabela

padronizada para a droga e a concentração, e o organismo pode ser
classificado como sensível, intermediário ou resistente.

- Droga que apresenta baixa solubilidade - a zona de inibição menor do

que a zona gerada por uma droga que é mais solúvel e se difunde melhor
no ágar.
Atividade
No seu caderno agora, desenhe o esquema:
- Você biomédico está testando três antibióticos (Antibióticos: X, Y e Z) para uma cepa de
Staphylococcus aureus que cresceu em seu meio de cultura Ágar Manitol. Todos antibióticos possuem
ótima solubilidade e estão em mesma concentração.

1) Como foi o crescimento na placa se essa bactéria foi resistente ao agente Y e sensível igualmente
para os agentes X e Z ? Desenhe.

2) Próximo Slide terá a resposta da questão 1. Com base nessa figura, relacione a numeração dos discos
com os antibióticos X, Y e Z.

3) O que é Zona de inibição?

4) Explique algum motivo que levou essa bactéria a se tornar resistente ao antibiótico Y.