DNA

RECOMBINANTE

BIOLOGIA, 12.º ANO

David Gomes, 12.º B, n.º 5

 O que é?
◦ O termo DNA recombinante refere-se à junção ou combinação de dois
fragmentos de DNA de dois organismos diferentes. As técnicas usadas
permitem que o investigador possa clonar um gene de uma espécie inserindo-
o em DNA de outra espécie, que será replicado junto com o DNA da célula
hospedeira.

26-09-2023
 26-09-2023

A tecnologia do DNA recombinante começou a ser definida no início do ano de 1970. A partir de uma
amostra contendo moléculas do DNA de interesse ou DNA doador, são utilizadas enzimas de restrição, que
permitem cortar o DNA em pontos bem definidos, isolando fragmentos de ácido nucleico. estes são
introduzidos ao cromossomo vetor, formando assim as moléculas de DNA recombinante.
 A clonagem de DNA acontece em sequência. Dessa forma, as
novas moléculas de DNA produzidas são inseridas em células
bacterianas que são amplificadas por replicação, resultando em
clones bacterianos idênticos que contêm o DNA recombinante.

◦ Se soubermos a sequência de algumas partes

dos genes ou a sequência de interesse, é
possível amplificá-la in vitro utilizando o
procedimento chamado
reação em cadeia da polimerase (PCR) ao invés
da clonagem. A PCR utiliza iniciadores de DNA e
a enzima Taq polimerase associadas a processos
de diferentes temperaturas para amplificar o DNA
de interesse.

26-09-2023
 26-09-2023

ENZIMAS DE RESTRIÇÃO

As enzimas de restrição (ou endonucleases de restrição) são enzimas que

cortam o DNA em locais específicos. As enzimas reconhecem determinadas
sequências nucleotídicas do DNA e fragmentam a molécula sempre que identificam
essa sequência, produzindo extremidades coesivas.
As enzimas de restrição foram descobertas em bactérias que resistiam à
infeção dos vírus (bacteriófagos) produzindo enzimas que seccionavam o DNA
viral, fragmentando-o em porções inofensivas.
◦ As enzimas atuam quando identificam determinadas
sequências específicas – locais de restrição –
geralmente compostas por 4-6 nucleótidos. As enzimas
cortam as ligações entre o grupo hidroxilo 3’ de um
nucleótido e o grupo fosfato 5’ do nucleótido adjacente.
As extremidades das cadeias seccionadas –
extremidades coesivas – quando contactam com outras
resultantes da ação da mesma enzima podem
emparelhar por complementaridade.

26-09-2023
 APLICAÇÕES DA ENGENHARIA GENÉTICA
◦ Esta tem aplicação na medicina, na pesquisa,
◦ Quanto mais se aprende sobre o genoma dos
seres vivos, mais aplicações da engenharia
genética surgem.
na indústria e na agricultura, e, pode ser usada em
diversas plantas, animais e micro-organismos. Aí
estão as produções, em larga escala: de insulina; de
hormonas do crescimento; de interferon alfa
humano com atividade biológica contra infeções
ocasionadas por vírus e contra algumas formas de
tumores malignos humanos; de vacinas e anticorpos
monoclonais humanos; uso de organismos
geneticamente modificados para a produção de
biocombustível, biorremediação e biomineração;
produção de alimentos geneticamente modificados,
como soja, milho, peixes.
26-09-2023