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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEAR

PROCESSAMENTO HISTOLGICO

Professora Dra. Janana Evangelista

Introduo:
Para estudarmos as patologias e buscarmos tratamentos,
necessrio primeiramente estudar as clulas e os
tecidos de maneira saudvel,
tornando possvel a identificao
de qualquer alterao sofrida.
Para o estudo de estruturas to
pequenas como clulas e tecidos,

necessrio
o
uso
de
equipamentos que ampliem (os Estudantes observando lminas
microscpios) e mtodos que possibilitem uma posterior
visualizao clara do objeto de estudo em tais equipamentos
(processo histolgico).

Metodologia:
Antes de ir ao microscpio, o tecido precisa passar por diversas
etapas que visam uma melhor visualizao e durabilidade da lmina:
Coleta: A obteno do material estudado pode ser feita em seres
vivos ou mortos, por bipsias cirrgicas ou punes (feita por
uma agulha, sem cirurgia)
Fixao: A fixao tem como objetivo
estabilizar
estruturas e conservar
componentes, pois mergulha e perfunde o
tecido em formol a 10% por um perodo
entre 12-24h, desnaturando enzimas
evitando a autlise celular.
Descalcificao: Sendo uma etapa
facultativa
no
processamento,
a
descalcificao do tecido tem como Tecidos em processo de
fixao. As bandejas
objetivo diminuir o desgaste da navalha e auxiliam na
e no
a possibilidade de criar artefatos. identificao
manejo das amostras
Utilizando cidos, pode haver uma danificao dos tecidos, j
com um agente quelante (EDTA) h um menor dano, porm um
processo mais lento.

Desidratao: O material mergulhado em concentraes


crescentes de lcool etlico (70-100%), que propicia uma
desidratao gradual, sem prejuzo estrutura das clulas.
Diafanizao/clarificao: Esse processo utiliza o xilol, uma
substncia miscvel tanto no lcool quanto na substncia utilizada
na prxima etapa, para retirar o lcool e clarear o tecido, num
total de 3 banhos (assegurar a total remoo do lcool).
Incluso: Para que o tecido fique rgido e possa ser cortado em
finssimas lminas no micrtomo, necessrio um
endurecimento. A amostra colocada em resina ou parafina
lquida e depois levada estufa, onde fica em uma temperatura
de 60C em 3 banhos de 30min
de durao cada. A temperatura
faz com que o xilol evapore,
permitindo que a substncia
(parafina ou resina) penetre na
amostra. Aps ser retirado da Amostras com resina
estufa, o material endurece e pode ser levado ao micrtomo.
Microtomia: O bloco levado ao micrtomo, aparelho com
lminas de ao ou vidro que corta
fatias de espessura entre 1 e 10 m. Essa
etapa tambm pode ser feita em
micrtomos de congelamento ou
criostatos , que congelam a amostra e
dispensam a incluso.
Banho-maria: Ao sair do micrtomo, Cortes no micrtomo
a amostra fica enrugada, sendo necessria
uma imerso em gua em um aparelho
com termostato, onde ela distendida.
Pescagem: A amostra retirada do
banho-maria, colocada na lmina e levada
para a
secagem em estufa.
Pescagem no banho-maria
Colorao: Para que determinadas
estruturas sejam vistas, necessrio colorir a amostra de acordo

com o que quiser ser visto. A combinao mais utilizada a de


Hematoxilina com Eosina (HE). A Hematoxilina cora em azul ou
violeta (corante bsico que cora estruturas cidas) e a Eosina
(corante cido que cora estruturas bsicas), em cor-de-rosa.
Outros corantes utilizados so os tricrmios (corantes de Mallory
e Masson), importantes na diferenciao entre colgeno e
msculo liso. Alm deles, a impregnao por metais, como a prata
e o ouro, comum no estudo de tecido nervoso.
Processa-se atravs dos seguintes passos:
Desparafinar em xilol durante 10 min.
Hidratar em lcool
Imerso em lcool absoluto (2x)
Imerso em lcool 95% (2x)
Lavar a lmina em gua corrente durante
3 min.
Corar pela hematoxilina durante 5 min.
Lavar a lmina em gua corrente durante
5 min.
Corar, pela eosina durante 30 segundos
Desidratar o corte em lcool
Imerso em lcool 95% (2x)
Imerso em lcool absoluto (2x)
Diafanizao ou clareamento.
Imerso em xilol (3x)

A colorao ajuda na
observao e no estudo
da amostra

Montagem: Coloca-se uma resina sinttica e uma


lamnula, pressionando e retirando todo o ar que
possa prejudicar a lmina final.

Lmina com resina

Concluso:
Estudando as etapas
do

processamento
histolgico
percebemos
o
quo
complicada e demorada a
montagem de uma lmina .
Sem
todas
essas as
tcnicas
de

clareamento e colorao no seria possvel


observarmos os tecidos e estud-los, destacando assim a sua
importncia no estudo da medicina veterinria e na atuao de tal
profisso, j que podemos identificar problemas em meio a uma
cirurgia, em uma bipsia laboratorial, etc. Se cada etapa do
processo histolgico for realizada de maneira correta, a lmina
poder ser vista de maneira ntida e durar por um longo tempo,

como as que existem desde a fundao da FAVET, tornando


possvel o estudo das clulas, estruturas, funcionamento e funes
dos diversos tecidos.

Bibliografia:
http://focobiomedico.blogspot.com.br/2011/03/histologia-montagem-delaminas.html
http://histologiavet.blogspot.com.br/2007/02/etapas-na-preparao-dostecidos-ou-rgos.html
https://sites.google.com/site/mostradebanners/resumos/substanciasparadesc
alcificacaodetecidoosseocomotecnicarotineiraemprocessamentohistologico
http://compartilhandoamedicina.blogspot.com.br/2013/12/histologiatecnicas-de-preparacao-de.html
http://www.apanalys.com.br/sitevelho/exames.php?
u=&c=&op=ListarExames&id=9
http://es.slideshare.net/luisduque9461/tcnica-histolgica-37891778
Anotaes das aulas