Universidade Federal do Piauí

Disciplina: Hematologia médica

Professor: Giovanny Rebouças
Monitoras: Line Monteiro e Renata Coelho

AULA PRÁTICA- CÂMARA DE NEUBAUER, CONTAGEM GLOBAL DE LEUCÓCITOS E HEMÁCIAS,

VHS.

 CÂMARA DE NEUBAUER

Utilizada para a determinação das contagens celulares globais. É uma espessa lâmina de vidro
retangular, que possui duas áreas reticuladas, divididas por um sulco central, cada uma
medindo 3mm x 3 mm (9mm²). Cada área reticulada é dividida em nove quadrados grandes
que medem 1mm x 1mm (1mm²). Cada quadrado grande é dividido em 16 quadrados médios
que medem 0,25mm x 0,25mm (0,0625mm²).

Figura 1.

 CONTAGEM GLOBAL DE LEUCÓCITOS

A contagem é feita na câmara de Neubauer, analisando os quatro quadrantes externos (A, B,

C e D) e realizando a contagem em “L”. O sangue é diluído com um fluido que causa a
hemólise dos eritrócitos, mas que não tenha efeito sobre os leucócitos. Esse fluido é
chamado Solução de Turk (Ácido acético– Lisa as hemácias, Azul de Metileno ou Violeta de
Genciana – Cora os núcleos dos leucócitos).

Figura 2.

METODOLOGIA:

1- Fazer a diluição 1/20 usando 380µl do líquido de Türk e 20µl de sangue, em um tubo de
ensaio (homogeneizar a amostra).

2-Colocar uma lamínula sob os retículos e com uma pipeta encher os retículos da câmara de
Neubauer, evitando excesso de líquido e bolhas de ar sob a lamínula.
3-Focalizar a preparação em pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e
observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Em seguida, contar as células nos quatro
quadrados grandes laterais.

4- Fazer a contagem de todos os leucócitos encontrados nos quatro quadrantes da câmara

de Neubauer, ou seja, 4 mm².
5- Ao final, somam-se os valores encontrados nos quatro quadrados e multiplica-se por 50.
 CONTAGEM GLOBAL DE HEMÁCIAS
As hemácias são contadas no quadrante central da câmara de Neubauer (e, f, g, h, i) indicados
na figura 2. É utilizada a solução de Hayem ou solução fisiológica para realizar a diluição.
METODOLOGIA
1- Fazer a diluição de 1/200, utilizando 20 microlitros de sangue e 4ml (4000 microlitros) de
solução diluidora e homogeneizar.
2-Fixar a lamínula sobre a câmara de Neubauer, preencher os retículos com o sangue diluído.
3- Contar os cinco quadrados (e, f, g, h, i) do centro, ou seja,
4- Ao final, somam-se os valores encontrados nos cinco quadrados e multiplica-se por 10000.

 VHS- VALOR DE HEMOSSEDIMENTAÇÃO

É um exame que avalia a velocidade de sedimentação do sangue em um determinado intervalo
de tempo, significa a velocidade com que os glóbulos vermelhos se separam do soro. Utiliza-se
um tubo de diâmetro interno constante e com escala graduada em milímetros (Pipeta de
Westergreen). A velocidade de hemossedimentação está aumentada nos processos
inflamatórios, neoplásicos, infecciosos. Altera-se nas doenças autoimunes, infarto do
miocárdio, gravidez e hipotireoidismo. As hemácias possuem em suas membranas o potencial
zeta (cargas negativas) que provoca repulsão entre elas, essa força de repulsão se contrapõe à
gravidade e naturalmente diminuem a velocidade com que as hemácias caem. No entanto
quando há presença de outras estruturas positivas (proteínas de fase aguda), estas vão anular
as cargas as cargas negativas das hemácias e também a repulsão magnética entre elas,
permitindo a sua aglutinação. Neste caso a gravidade age
sozinha e a velocidade com que elas caem é acelerada. Não é um
exame específico, porém bastante sensível.

METODOLOGIA
1- Realizar a coleta de 5 ml de sangue, colocar em tubo com
anticoagulante e homogeneizar.
2- Preencher a pipeta de Westergreen até a marca zero, e
colocá-la em um suporte.

3- Marcar o tempo e realizar a leitura após uma hora, verificando

a distância percorrida pelos eritrócitos.