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INTRODUO

A Hematologia estuda os elementos figurados do sangue: hemcias (glbulos vermelhos),


leuccitos (glbulos brancos) e plaquetas. Alm disso, avalia tambm o estado de normalidade dos
elementos sangneos, dos rgos hematopoiticos e as doenas a eles relacionados. (TERRA, 2000)
O hemograma o exame que avalia as clulas sanguneas de um paciente e requerido pelo mdico
para diagnosticar ou controlar a evoluo de uma doena. Vale salientar que a expresso "Hemograma
Completo" de certa maneira redundante, j que todo e qualquer Hemograma avalia a srie vermelha,
branca e plaquetria.
As clulas circulantes no sangue so divididas em trs tipos: clulas vermelhas (hemcias ou
eritrcitos), clulas brancas (ou leuccitos) e plaquetas (ou trombcitos). No laboratrio de
Hematologia outros testes como TTP, TP, VHS e reticulcitos tambm so realizados.
A coleta de material o primeiro passo para todas as anlises efetuadas no Laboratrio Clnico
e dela dependem todas as etapas seguintes, por isso se faz necessrio o correto procedimento na coleta
das amostras. Toda aparelhagem selecionada dever estar calibrada e mantida dentro dos limites de
utilizao. evidente a necessidade de certos cuidados, tanto na manipulao quanto na limpeza. Os
materiais de vidro utilizados para a realizao das tcnicas exigem uma lavagem bem rigorosa,
qualquer resduo poder provocar falsos resultados nas anlises. Mas para que todos estes fatores
sejam contornados essencial que o analista esteja apto e preparado a realizar os ensaios e consciente
da responsabilidade do trabalho realizado, alm de ter um ambiente de trabalho sadio que oferea
todas as condies necessrias de trabalho. (MOURA et. al, 2006)
Este relatrio descreve as atividades desenvolvidas no estgio de Anlises Clnicas no setor de
Hematologia do Laboratrio de Hematologia do Centro Universitrio Paulista - Unicep, assim como as
principais atribuies do profissional biomdico no setor.

1.1 Esfregao sanguneo

O esfregao de sangue usado para fazer uma diferenciao entre os leuccitos, isto , fazer
uma contagem do nmero de neutrfilos, linfcitos, moncitos, eosinfilos e basfilos. Chegando-se a
uma porcentagem de cada clula encontrada. Usado tambm para avaliar a srie vermelha e as
plaquetas. feito com uma pequena gota de sangue sendo colocada sobre uma lmina de vidro, onde o
tcnico far um esfregao, arrastando a gota de sangue com outra lmina, com isso forma-se uma
pelcula.
O sangue tem que ser homogenizado antes de se fazer o esfregao para que as clulas estejam
bem distribudas. O esfregao corado e observado em microscpio com objetiva de aumento de
100X.
A vantagem de se fazer um esfregao que algumas clulas podem ser contadas erradamente
pelos processos automticos. Alguns aparelhos no contam clulas imaturas e podem levar a um erro
quanto a um diagnstico de leucemia.

Lamina de esfregao do sangue

1.2 Srie Vermelha e Srie Branca

1.2.1 Srie Vermelha

A contagem de hemcias a primeira informao fornecida e expressa em milhes por mm3.


Os nveis de hemcias iguais ou maiores que 6,20 milhes/mm3 em homens e iguais ou maiores que
5,70 milhes/mm3 em mulheres so considerados poliglobulina.
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A concentrao de hemoglobina expressa em g/dL, e sua avaliao de grande importncia


pelo papel no transporte de oxignio e por estar diretamente relacionada anemia, sendo sua melhor
forma de avaliao laboratorial.
O volume relativo das hemcias dentro do volume de sangue fornecido pela anlise do
hematcrito, que expresso percentualmente. A relao entre esses diferentes parmetros pode ser
obtida pela anlise dos ndices hematimtricos que iro fornecer informaes adicionais sobre
variaes de volume e concentrao da hemoglobina.
Os achados morfolgicos do esfregao corado fornecem mais informaes sobre contedo da
hemoglobina, forma, tamanho e incluses eritrocitrias.

1.2.2 Srie Branca

A contagem global e diferencial de leuccitos e suas alteraes quantitativas e qualitativas so


as principais informaes fornecidas na anlise da srie branca. Os leuccitos totais so expressos em
mil/mm3.
A contagem diferencial de grande importncia, podendo definir perfis patolgicos, e
fornecida pela anlise conjunta dos equipamentos automatizados e pela leitura do esfregao corado,
que avalia as diferentes formas leucocitrias e as expressa de forma percentualmente (relativa) e em
mm3 (absoluta).
A anlise das alteraes morfolgicas dos leuccitos tambm realizada por observao
microscpica do esfregao corado. Os leuccitos podem ser divididos em granulcitos (mielcitos,
metamielcitos, basto, neutrfilos, eosinfilos e basfilos), moncitos e linfcitos.
Hemcias ou eritrcitos (de 4,5 a 5,5 milhes/ml de sangue) Apresentam uma forma de disco
bicncavo circular, no possuindo ncleo nos mamferos. Nas aves, anfbios, rpteis e peixes possuem
ncleo e a forma da clula diferente. As hemcias coradas e vistas de cima tm a sua parte central
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mais clara, isto decorre do fato da clula ser mais delgada nesta rea, em virtude da forma de disco
bicncavo que apresenta.

Leuccitos (de 5 a 10 mil/ml de sangue). Podem ser classificados em granulcitos, com grnulos
especficos no citoplasma, e agranulcitos, sem granulaes especficas citoplasmticas.

Neutrfilos (de 55 a 65%): o ncleo de um neutrfilo apresenta at 5 lbulos, unidos por finas pontas
de cromatina. Quando a clula muito jovem, o ncleo no segmentado em lbulos, possuindo a
forma de bastonetes curvo. Neste caso, o neutrfilo chamado de bastonete. O citoplasma apresenta
granulaes bastante finas, que em geral apresentam cor salmo ou bege.

Eosinfilos (de 2 a 3%): seu ncleo apresenta, geralmente, dois lbulos, mas pode apresentar mais. No
citoplasma, notam-se grandes granulaes de cor vermelha ou alaranjada.

Basfilos (de zero a 1%): so os mais difceis de serem encontrados, devido sua pequena
porcentagem no sangue de indivduos normais. O ncleo irregular, em forma de S e totalmente
mascarado pelas granulaes citoplasmticas grandes e irregulares, coradas em azul escuro ou roxo.

Linfcitos (de 25 a 35%): so os menores leuccitos, sendo que seu ncleo ocupa quase toda a clula,
ficando uma pequena poro de citoplasma, de cor azul claro, sua volta, que geralmente no
visvel. O ncleo apresenta cromatina bem condensada, portanto bem escura, e no segmentado,
sendo esfrico, de modo geral.

Moncitos (de 4 a 8%): so as maiores clulas sangneas. Apresentam um ncleo reniforme ou oval,
e, em alguns casos, em forma de ferradura. A cromatina dispe-se numa rede de granulaes e flocos,
de textura mais delicada que a do ncleo dos linfcitos, dando a impresso de o ncleo estar
apagado ou mais claro do que o ncleo dos linfcitos. Seu citoplasma azul claro e, ao contrrio dos
linfcitos, abundante.

1.4 Plaquetas

As plaquetas so fragmentos do citoplasma de grandes clulas de medula ssea denominada


megacaricitos. So corpsculos anucleados esfricos, ovais ou alongados. Nos esfregaos corados
tendem a aparecer em grupos.
A avaliao das plaquetas pode ser feita de forma quantitativa, expressa em mm3, e de modo
qualitativo, pela avaliao das caractersticas analisadas no esfregao corado, o que permite a
identificao de alteraes morfolgicas das plaquetas.
A utilizao de equipamentos automatizados, alm de fornecer contagens mais precisas,
permite que se obtenham informaes em relao presena de anisocitose e grumos plaquetrios, e
tambm de ndices plaquetrios, que em sua maioria ainda no esto liberados para uso clnico. As
alteraes quantitativas podem ser tanto o aumento da quantidade de plaquetas, chamada
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hiperplaquetemia, quanto a diminuio, denominada plaquetopenia. Plaquetas so observadas em


relao quantidade e a seu tamanho. Seu nmero normal de 150.000 400.000 por microlitro de
sangue. O tamanho de uma plaqueta varia entre 1 a 4 micrometros.
A contagem de plaquetas feita pelo mtodo automtico. A maioria dos laboratrios usam
aparelhos cuja contagem de plaquetas se faz no mesmo canal de contagens de hemcias, sendo que a
diferenciao de ambas se d pelo volume (plaquetas so menores que 20 fl e hemcias maiores que
30 fl). Devido ao grande volume de exames feito por um laboratrio ficou invivel a contagem manual
de todas as plaquetas, mas a contagem manual no foi totalmente abandonada sendo que a contagem
automtica pode ser confirmada pela observao das plaquetas no esfregao ou pela contagem manual
feita em cmara de Neubauer.
Os erros mais comuns em uma contagem automtica so: aparelhos mal calibrados e
problemas na coleta do sangue. A coleta correta muito importante. Uma coleta muito lenta, agitao
errada do sangue colhido, entre outros problemas, podem fazer com que as plaquetas se agrupem e, ao
realizar a contagem em aparelhos, seu nmero se torne diminudo. O agrupamento de plaquetas no
um sinal clnico.

1.5 Contagem de Reticulcitos

Os Reticulcitos so hemcias imaturas no-nucleadas que permanecem no sangue perifrico


durante 24 a 48 horas enquanto maturam. Elas geralmente se apresentam como hemcias maiores que
as maturadas. Neste teste, os reticulcitos em uma amostra de sangue total so contados e expressos
em porcentagem da contagem total de hemcias.
Em razo do mtodo manual de contagem de reticulcito utilizar somente uma pequena amostra, os
valores podem ser imprecisos e devem ser comparados com a contagem de hemcias ou hematcrito.
A contagem de reticulcitos possui os objetivos de auxiliar na distino entre anemias
hipoproliferativas e hiperproliferativas alm de auxiliar na avaliao de perda sangnea, resposta da
medula ssea anemia e terapia para anemia.

Princpio: A extenso hematolgica submetida a ao de um fixador e duas solues corantes, por


meio de imerses de 5 segundos em cada, e ao final da ltima imerso encontra-se pronta para a
leitura.

Valores de referncia: De 0,5 a 1,5% de reticulcitos, ou de 20.000 a 75.000/mm3 de sangue. Em


bebs, a contagem normal de reticulcitos varia de 2 a 6% ao nascimento, diminuindo para nveis de
adulto em 1 a 2 semanas.

1.6 Contagem de Leuccitos

Leucograma o estudo da srie branca (ou leuccitos), faz-se uma contagem total dos leuccitos e
uma contagem diferencial contando-se 100 clulas. O adulto normalmente apresenta de 5.000-10.000
leuccitos por 1 mm de sangue.

Princpio: A partir da diluio de um volume conhecido de sangue total em um lquido diluente


(Lquido de Turk) contam-se as clulas na rea de volume conhedico em cmara de contagem (cmara
de Neubauer), obtm-se o nmero de clulas por microlitro de sangue.

As razes so determinadas atravs das frmulas:


ClulasL= n de clulas contadas x diluio
Volume
Temos:

GBL= n de clulas contadas x 20

4 x 0,1
Quando se utilizam os valores acima, obtm-se o fator de correo para a contagem de leuccitos.
GBL= n de clulas contadas x 50

Valores de referncia: Adulto 4500 - 9200L


1.7 Leucemia

A leucemia uma doena maligna dos glbulos brancos (leuccitos) de origem, na maioria
das vezes, no conhecida. Ela tem como principal caracterstica o acmulo de clulas jovens
(blsticas) anormais na medula ssea, que substituem as clulas sangneas normais. A medula o
local de formao das clulas sangneas, ocupa a cavidade dos ossos e conhecida popularmente por
tutano. Nela so encontradas as clulas mes ou precursoras, que originam os elementos do sangue:
glbulos brancos, glbulos vermelhos (hemcias ou eritrcitos) e plaquetas.
Os principais sintomas da leucemia decorrem do acmulo dessas clulas na medula ssea,
prejudicando ou impedindo a produo dos glbulos vermelhos (causando anemia), dos glbulos
brancos (causando infeces) e das plaquetas (causando hemorragias). Depois de instalada, a doena
progride rapidamente, exigindo com isso que o tratamento seja iniciado logo aps o diagnstico e a
classificao da leucemia.
As manifestaes clnicas da leucemia aguda so secundrias proliferao excessiva de
clulas imaturas da medula ssea, que infiltram os tecidos do organismo, tais como: amgdalas,
linfonodos (nguas), pele, bao, rins, sistema nervoso central (SNC) e outros. A fadiga, palpitao e
anemia aparecem pela reduo da produo dos eritrcitos pela medula ssea. Infeces que podem
levar ao bito so causadas pela reduo dos leuccitos normais (responsveis pela defesa do
organismo).
Verifica-se tendncia a sangramentos pela diminuio na produo de plaquetas
(trombocitopenia). Outras manifestaes clnicas so dores nos ossos e nas articulaes. Elas so
causadas pela infiltrao das clulas leucmicas nos ossos. Dor de cabea, nuseas, vmitos, viso
dupla e desorientao so causados pelo comprometimento do SNC.
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Como geralmente no se conhece a causa da leucemia, o tratamento tem o objetivo de destruir


as clulas leucmicas, para que a medula ssea volte a produzir clulas normais. O grande progresso
para obter cura total da leucemia foi conseguido com a associao de medicamentos
(poliquimoterapia), controle das complicaes infecciosas e hemorrgicas e preveno ou combate da
doena no sistema nervoso central (crebro e medula espinhal).
Para alguns casos, indicado o transplante de medula ssea. O tratamento feito em vrias
fases. A primeira tem a finalidade de atingir a remisso completa, ou seja, um estado de aparente
normalidade que se obtm aps a poliquimioterapia. Esse resultado conseguido entre um e dois
meses aps o incio do tratamento quando os exames no mais evidenciam clulas leucmicas. Isso
ocorre quando os exames de sangue e da medula ssea e o exame fsico no demonstram mais
anormalidades.
1.8 Anemias
A anemia caracterizada pela diminuio de hemoglobina no sangue, uma substncia presente
nas clulas vermelhas que transporta o oxignio para os diferentes rgos do organismo.
Assim, a anemia geralmente provocada por situaes que diminuem a quantidade ou a
funo da hemoglobina, como diminuio da quantidade de sangue, baixa produo de clulas
sanguneas ou produo anormal de clulas.
Dependendo do problema que est causando a diminuio de hemoglobina a anemia
classificada em diferentes tipos, sendo que os mais comuns incluem anemia falciforme, ferropriva,
hemoltica ou megaloblstica, por exemplo.
Anemia falciforme

Causas: doena gentica e hereditria que provoca a formao de clulas vermelhas


deformadas e com baixa capacidade para transportar oxignio.

Sintomas: o principal sintoma da anemia falciforme o surgimento de dor por todo o corpo
desde a infncia, mas tambm podem acontecer outros sintomas como cansao excessivo,
sensao de falta de ar, tonturas, dor de cabea frequente e mos e ps frios.

Tratamento: no existe cura para este tipo de anemia, porm possvel utilizar remdios
analgsico e anti-inflamatrios que ajudam a reduzir os sintomas. Entenda melhor o
tratamento em: Anemia falciforme.
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Diagnstico: normalmente feito logo aps o nascimento atravs do teste do pezinho, mas
tambm pode ser feito na idade adulta atravs de exames de sangue que identificam a presena
de hemoglobina S.

Anemia ferropriva

Causas: alimentao pobre em ferro, perdas de sangue ou problemas que diminuem a


absoro de ferro pelo organismo, como diarreia crnica ou doenas do intestino.

Sintomas: cansao excessivo, fraqueza geral, sensao de falta de ar e, por vezes, aumento
dos batimentos cardacos. Alm disso, tambm pode surgir vontade de comer comidas
estranhas como barro ou terra, por exemplo.

Tratamento: depende do problema que est provocando a diminuio de ferro, no entanto, na


maioria dos casos possvel tratar a anemia apenas com uma alimentao rica em ferro ou uso
de suplementos com ferro. Veja os alimentos mais indicados em: Alimentos ricos em ferro.

Diagnstico: exame de sangue que avalia a quantidade de hemoglobina e ferritina no sangue,


sendo que quando os valores esto abaixo de 12g/dl sinal de anemia ferropriva.

Anemia hemoltica

Causas: problemas ou doenas que levam destruio das clulas vermelhas, como infeces,
doenas autoimunes, aneurisma ou problemas cardacos, por exemplo.

Sintomas: pele e olhos amarelados, assim como dor na barriga, cansao excessivo, dores de
cabea, dificuldade para respirar ou tonturas frequentes.

Tratamento: alguns casos no necessitam de tratamento, no entanto, pode ser necessrio


utilizar remdios, fazer transfuses de sangue ou cirurgia.

Diagnstico: exame de sangue que avalia a presena de anticorpos capazes de destruir as


clulas vermelhas.

Anemia megaloblstica

Causas: baixa ingesto de vitamina B12 ou doenas que dificultam a utilizao da vitamina
B12 pelo organismo, como diabetes tipo 1, Vitiligo ou doena de Addison.

Sintomas: excesso de gases, diarreia, nuseas, vmitos, cansao excessivo e tonturas.


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Tratamento: geralmente feito com ao aumento da ingesto de vitamina B12, no entanto,


quando causada por outras doenas, tambm se deve fazer o tratamento dessas doenas para
evitar que a anemia volte a surgir.

Diagnstico: exame de sangue para observar a forma e tamanho das clulas vermelhas do
sangue, assim como para avaliar os nveis de vitamina B12 no organismo.

Anemia aplstica

Causas: doenas ou leses na medula ssea causadas pelo uso de pesticidas, radiao,
quimioterapia, hepatite ou doenas autoimunes como HIV ou artrite reumatoide.

Sintomas: cansao fcil, sensao de falta de ar, tonturas, dores de cabea, ps e mos frios,
pele plida e dor no peito.

Tratamento: em alguns casos pode ser curada com transplantes de medula ssea, porm, na
maioria dos casos, o tratamento feito com transfuses de sangue e medicamentos para
reduzir os sintomas.

Diagnstico: necessrio fazer um exame de sangue completo com sorologia para avaliar se
existem doenas virais que possam estar causando anemia. Caso o resultado seja negativo, o
mdico pode pedir raio X dos ossos ou bipsia da medula para verificar se existem leses na
medula ssea.

Anemia de fanconi

Causas: uma doena gentica transmitida de pais para filhos que diminui a produo de
clulas vermelhas no sangue devido a falha progressiva da medula ssea.

Sintomas: surgem desde a infncia e incluem manchas escuras na pele e problemas a nvel
cardaco, renal e pulmonar.

Tratamento: a transfuso de medula ssea a principal forma de tentar curar este tipo de
anemia, no entanto, podem ser usadas transfuses de sangue e medicamento
imunossupressores para controlar os sintomas.

Diagnstico: exame de sangue para fazer teste genticos para avaliar a presena da alterao
que provoca o surgimento da anemia de fanconi.

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Talassemia

Causas: doena hereditria que diminui a produo de clulas vermelhas saudveis,


provocando reduo de hemoglobina.

Sintomas: cansao excessivo, problemas de crescimento e desenvolvimento, pele plida,


diminuio do apetite e urina escura.

Tratamento: transfuses de sangue, uso de suplementos de cido flico ou ingesto de alguns


medicamentos para aliviar os sintomas.

Diagnstico: exame de sangue que avalia o formato das clulas vermelhas do sangue.

Diagnstico da Anemia
O diagnstico da anemia pode ser feito atravs do exame de sangue chamado hemograma.

Idade/ sexo

Hemoglobina Hb (g/dL)

Hematocrito Ht (%)

6 meses a 5 anos

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33

de 5 a 11 anos

1,5

34

de 12 a 13 anos

12

36

mulheres

12

36

mulheres grvidas

11

33

homens

13

39
13

A anemia est presente quando o exame de sangue apresentar


esses dados combinados ou valores inferiores a estes. Valores muito
baixos podem indicar anemia profunda. A anemia est presente
quando o exame de sangue apresentar esses dados combinados ou
valores inferiores a estes. Valores muito baixos podem indicar anemia
profunda.

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3 MATERIAIS E MTODOS

3.1 Esfregao:
Sangue
Lmina
Lmina extensora
Papel higinico
Corante Leishman
gua destilada
Capilar

Procedimento Esfregao:
Pipetou-se o sangue com um capilar e colocou-se na ponta da lmina. Em seguida com a lmina
extensora arrastou-se o sangue um pouco para trs preenchendo toda a borda e fez-se o esfregao.

Identificou-se a lmina e colocou-se o nome do paciente. Depois que secou-se o sangue, colocou-se o
corante leishman cobrindo toda a lmina e esperou-se 5 minutos. Passado os 5 minutos, colocou-se
gua destilada na lmina em cima do corante e esperou-se 5 minutos.
Passado os 5 minutos enxaguou-se a lmina segurando ela em p de baixo da torneira em jato
moderado de gua e enxugou-se atrs da lmina com pedao de papel higinico.

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3.2 TIPAGEM SANGUNEA

O sangue um lquido composto por trilhes de clulas, divididas em hemcias (glbulos


vermelhos), leuccitos (glbulos brancos) e plaquetas. Todas ficam suspensas no plasma. A funo
dessas clulas, constantemente produzidas pela medula ssea (tipo de tecido que fica nos ossos) e que
circulam por veias e artrias, nutrir tecidos e rgos com vitaminas, anticorpos e hormnios,
essenciais ao funcionamento do corpo. So quatro os tipos de sangue, A, B, O e AB, classificado
segundo a presena ou ausncia de antgenos (Ag) na superfcie das hemcias ou de anticorpos (Ac)
no plasma.
As pessoas que tem sangue do grupo apresentam anticorpos chamados de "Anti B", ou seja,
so incompatveis com o sangue do grupo B e vice e versa. J as do grupo O como no tm na
membrana da sua hemcia essas caractersticas de A e de B, possuindo, no entanto, ambos os
anticorpos. Por ltimo, as pessoas do grupo AB tm caractersticas tanto de A quanto de B e no
possuem anticorpos.
Essa a primeira seleo no sangue em funo do grupo sangneo ABO. Alm do tipo de
sangue A, B, AB ou O, h tambm na superfcie da clula outro marcador: protena D, a do fator Rh,
presente em mais ou menos 75% das pessoas.
Esse fator, quando presente, determina que o sangue do tipo positivo, e quando est ausente,
que trata-se de sangue do tipo negativo.

Esse item importante, por que uma pessoa com Rh ausente, ou seja, negativo, s gera
anticorpos quando for exposta, em sua vida, a uma transfuso de sangue do tipo positivo, ou nos casos
das mulheres com Rh negativo que contm no ventre um feto com RH positivo.

Tipagem Sangunea:
Sangue
Lanceta
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Lamina
Tubo de ensaio
Soluo fisiolgica
Anti A, B, AB, Rh
Centrfuga
Ponteira
Pipeta volumtrica
Sangue total
lcool

Procedimento Tipagem Sangunea:

Identificaram-se os tubos de ensaio e os numerou na seguinte ordem: A, B, AB, Rh.


Preparou-se a suspenso de hemcias, onde utilizou-se pipetas de 500 uL para soluo fisiolgica e 50
uL de sangue total em tubo de ensaio e homogenizou-se. Pingou-se 1 gota Anti A, B, AB e Rh em
seus respectivos tubos e adicionou-se em cada tudo 50 uL da suspenso de hemcias, onde trocou-se
as ponteiras. Homogenizou-se os tubos e centrifugou-se por 1 a 2400 rpm.

3.3 D- FRACO

Sistema Rhesus Rh (D)

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A determinao do Sistema Rhesus de um indivduo se d por: Determinao Rh:


determinao do antgeno D do Sistema Rhesus nas hemcias do paciente. Controle Rh: um reativo
controle com ausncia de anticorpo Anti-D e de qualquer outro tipo de anticorpo para todos os
sistemas eritrocitrios. Este reativo controle tem por finalidade detectar erros ou patogenias existentes
no paciente que resulte numa reao positiva do controle. (Exemplo: casos de hiperproteinemia).
Contudo, diversos laboratrios no fazem uso deste controle em sua rotina ou tm encontrado
resultado positivo para este controle, arriscando assim a confiabilidade de seus resultados. bom
lembrar que no se deve usar albumina bovina, 22% ou 30%, em substituio a esse reativo
controle. O correto usar o Reativo Controle Rh comercial, no importando se ele produzido com
plasma ou albumina, desde que tenha os mesmos conservantes e estabilizadores do reativo do soro Rh
(D), ou seja, do mesmo fabricante. Para liberar um resultado como Rh positivo deve-se fazer um
estudo mais aprofundado da imunohematologia do paciente, o que inclui a observao de autoanticorpo frio ou quente (se a auto-prova for positiva), hiperproteinemia, etc.

Pesquisa D fraco e Controle: devem ser feitos, quando na classificao do Rh (D) existe ausncia de
aglutinao (negativa). Sua finalidade detectar o anticorpo fracamente formado, devido a sua
transmisso gentica.
Nesta prova necessrio usar tcnicas mais sensveis (Tcnica do Coombs Indireto-TCI) para
confirmar sua positividade ou negatividade. A metodologia em Gel no dispensa a realizao desta
prova. Os fabricantes tm adotado a incluso desta prova no carto. Neste caso, o laboratrio est
realizando a prova no carto automaticamente. Assim, os resultados destas determinaes devem ser
interpretados da seguinte forma:
Determinao Rh Controle Rh Pesquisa D fraco Controle D fraco Sistema Rhesus Rh(D)

D Fraco:
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Tubo de ensaio
Pipeta volumtrica
Ponteira
Soro de coombs
Centrifuga
Soluo salina
Banho Maria
Cronometro

3.4 COLETA DE SANGUE A VACUO

a coleta de sangue venoso (das veias) para exames laboratoriais solicitados pelo
mdico.Nosso sistema circulatrio composto pelo corao que bombeia sangue para todo o nosso
corpo (sangue arterial) e deste tambm recebe (sangue venoso), portanto, os vasos que levam sangue
rico em CO2 do corpo ao corao so as vnulas e as veias e, os vasos levam sangue do corao ao
corpo (sangue rico em O2) so as artrias.

COLETA DE SANGUE
Adaptador
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lcool etlico a 70%


Agulha
Torniquete
Algodo
Tubo de Edta
Curativo
Luvas descartveis

Procedimento Coleta de sangue vcuo:

Lave as mos e rena todo o material necessrio de acordo com a solicitao dos exames que
sero realizados (seringa compatvel com o voluma de sangue, ou sistema a vcuo que inclui a agulha
especfica rosqueada no adaptador, e todos os tubos necessrios;
Chame o paciente pelo nome completo na sala de coleta, receba-o de forma cordial,
apresente-se a ele, explique-lhe o procedimento e verifique se ele est nas devidas condies para a
coleta, tais como: perodos de jejum determinado usam de certos medicamentos que possam interferir
nos resultados;
Aps confirmar todos os dados pr-analticos do paciente, rotule todos os tubos de coleta de
forma legvel, com o nome completo do paciente, nmero de registro, data, horrio da coleta, e, se
um paciente que est internado tambm colocar nmero do quarto do paciente, assinatura e carimbo do
responsvel pela coleta nas requisies dos exames que depois sero enviadas juntamente com os
tubos das amostras para o laboratrio;
Como j dito antes, se ainda no tiver feito, agora, comunique o paciente que voc ir coletar
uma amostra de sangue e explique o procedimento para diminuir a ansiedade e garantir a cooperao
do paciente;

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Lave as mos aps rotular os tubos e reunir o material; Coloque o material na mesa de
cabeceira ou em uma bandeja prxima a voc na sala de coleta;
Posicione o paciente de forma confortvel, sentado ou deitado em decbito dorsal para
garantir uma melhor visualizao das veias. Calce as luvas de procedimento. Selecione e palpe a veia a
ser puncionada.
Prenda o garrote aproximadamente 5 cm acima do local da puno e pea para que o paciente
abra e feche a mo.
Faa antissepsia ampla da rea com algodo embebido em lcool a 70% no sentido do retorno
venoso, para estimular o aparecimento das veias. Deixe o algodo na bandeja ou segure-o com o dedo
mnimo. Com o polegar da mo no-dominante fixar a veia, esticando a pele abaixo do ponto da
puno.
Segurar a seringa horizontalmente, com a mo dominante, mantendo o indicador sobre o
canho da agulha.
Introduzir a agulha com o bisel e a graduao da seringa voltada para cima. A agulha deve
penetrar na veia aproximadamente 1 cm e ser mantida num ngulo de 15 graus. Aspirar seringa com
a mo que fixava a veia. Isso evitar movimentos desnecessrios e evitar o deslocamento da agulha
(obs.: esta uma das tcnicas da forma de segurar a seringa para aspirar o sangue, sendo que h outras
formas que vocs podero perceber nos vdeos sobre o assunto de Puno Venosa postados).
Aps o sangue fluir para dentro da seringa ou do tubo (depende de qual voc est utilizando),
pea para o paciente abrir a mo, desprenda o garrote e remova a agulha com movimento nico e
suave, apoiando o local com algodo.
Para facilitar a hemostasia, fazer leve presso no local, e, se a puno para coleta foi realizada
em veia da fossa ante cubital do brao, pea para que o paciente no dobre o brao para no formar
hematomas no local da puno.
Se voc coletou com sistema a vcuo o sangue necessrio j se encontra dentro de cada tubo
especfico, bastando apenas voc desprezar a agulha no Descarpack, agora, se voc coletou com
seringa e agulha, agora voc deve transferir o sangue para os tubos, como proceder:
Escorra vagarosamente o sangue da seringa pela parede do tubo, evitando a hemlise. Se o
frasco contiver anticoagulante, aps tam-lo, homogenize-o virando o tubo algumas vezes para
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misturar o anticoagulante com o sangue de forma homognea para evitar a coagulao desta amostra.
Observar a hemostasia no local e desprezar o algodo.
Deixar o ambiente em ordem e o paciente confortvel tirar as luvas e lavar as mos. Enviar o
material ao laboratrio com a requisio. Registrar o cuidado prestado, descrevendo as observaes,
carimbar e assinar.

3.5 TESTE DE COOMBS INDIRETO


Este teste para se detectar a presena de anticorpos anti-Rh no aglutinantes no soro dos
indivduos Rh negativos. Neste teste o soro inicialmente incubado com hemcias do tipo O Rh
positivas, que se ligaro caso os anticorpos anti-D estejam presentes. Utiliza-se hemcias do tipo O
para evitar a ligao cruzada de antgenos A ou B cujos anticorpos tambm podem estar presentes no
soro testado (por exemplo se o indivduo Rh negativo for do tipo sangneo O).
Depois deste passo, as hemcias so lavadas para retirar os anticorpos no ligantes e, em
seguida incubadas com anti-imunoglobulina. Este passo levar aglutinao das hemcias indicando a
positividade do ensaio. Este mesmo ensaio feito para determinar a presena do antgeno Du.
Pesquisa Anticorpo Extra-Vascular - AEV (Coombs Indireto) Hemcias: O soro do paciente
deve ser pesquisado com hemcias de fentipos conhecidos para os principais sistemas eritrocitrios
(tipadas), formando assim um painel de seleo. Normalmente so adotadas duas hemcias, mas o uso
de uma terceira pode ocorrer para complementar as duas hemcias normalmente usadas.
O importante que as hemcias usadas contenham os principais antgenos que caracterizam os
anticorpos dos principais sistemas eritrocitrios (Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Luth e Xg).
Com isto, j se obtm um resultado satisfatrio.

Auto-prova: A auto-prova visa avaliar a formao de auto-anticorpos produzidos pelo prprio


paciente (sistema imunolgico) ou por um medicamento que est sendo ministrado, funcionando como
um complemento e auxiliando no diagnstico e possvel tratamento.

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Neste teste realizada a tcnica do Coombs Indireto com o soro e a suspenso de hemcias do
prprio paciente. Exemplo: Um indivduo em tratamento com L-Dopa (dopamina) reproduz nas
hemcias uma simulao de um auto-anticorpos, devido a substncia medicamentosa envolver as
hemcias, de modo a reproduzir uma reao similar de auto-aglutinao. A simples suspenso do
medicamento suficiente para que no haja mais esta reao. Assim, os resultados destas
determinaes devem ser interpretados da seguinte forma:

3.6 COOMBS INDIRETO:


Pipeta volumtrica
Ponteira
Anti-D
Soluo salina
Soro do paciente
Centrifuga
Piopeg
Banho Maria
Soro de Coombs
Cronometro

Procedimento Coombs:

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Em um tubo de ensaio adicionar 100 L de soro da paciente Rh negativo a ser testado,


adicionar em seguida 100 L de hemcias O Rh positivas;
Incubar por 5 minutos a temperatura ambiente; Encher o tubo com aproximadamente 2,0mL
de soluo salina para retirar excesso de anticorpos no ligados;
Centrifugar o tubo a 1.000 rpm por 2 minutos temperatura ambiente; Desprezar o
sobrenadante na pia com cuidado para no jogar fora o boto de hemcias; Adicionar em seguida
100L de anti-IgG humana (soro de Coombs);
Centrifugar o tubo a 1.000 rpm por 2 minutos temperatura ambiente; Para visualizar com maior
preciso se houve aglutinao, derramar o sangue centrifugado em uma lmina de microscpio

3.7 RETICULOCITO:
Sangue
Azul de cresil brilhante
Tubos de ensaio
Banho-maria 37C
Valor de referncia:
Percentual: 0,5% a 1,5%
Quantitativo: de 25.000 a 75.000/mm
Valores aumentados: ocorrem em estados hiper-regenerativos da medula ssea, como
nas anemias hemorrgicas e hemolticas, e especialmente como crise reticulocitria aps a
administrao de ferro na anemia ferropriva ou depois da administrao de vitamina B12 ou
cido flico na anemia perniciosa e anemias sensveis a estes medicamentos. Alm dessas
condies, os nveis de reticulcitos podem ser altos em: pessoas que vivem em altitudes
elevadas, fumantes, gestantes e recm-nascidos.

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Valores diminudos: ocorrem nas anemias no-regenerativas, como anemias aplsica,


carncias (ferropriva no-hemorrgica ou megaloblstica) no tratadas, secundrias a processos
crnicos (inflamatrios ou neoplsicos) e diseritropoticas.
Procedimento Reticulcito:

3.8 VHS:
Pipeta de Westergren
Sangue
Suporte
Cronmetro

Procedimento VHS:
Com a pipeta de Westergren aspira-se o sangue homogenizado ate exatamente a marca zero,
coloca-se a pipeta no suporte de modo que permanecesse na posio vertical.
Marca-se o tempo, fazem-se as leituras em mm aps uma ou duas horas ao nvel de separao
do plasma e hemcias.

3.9 Microhematcrito (Ht)

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um ndice, calculado em porcentagem, definido pelo volume de todas as hemcias de uma


amostra sobre o volume total desta amostra (que contm, alm das hemcias, os leuccitos, as
plaquetas e o plasma).
O Ht depende no somente do nmero de hemcias, mas tambm do volume destas. Os
valores variam com o sexo e com a idade.

Valores de referncia: Homem de 39 - 50% e Mulher de 35 - 45%.

Princpio: O processo de centrifugao do sangue separa as unidades da composio sangunea de


acordo com suas densidades. A fora centrfuga atua sobre as hemcias, mais densa que os sobre os
leuccitos e as plaquetas, aquelas so compactadas no fundo do capilar.
2 OBJETIVO:
A hemoterapia estuda os elementos figurados do sangue: hemcias (glbulos
vermelhos),leuccitos (glbulos brancos) e plaquetas.
Estuda tambm a produo desses elementos e os rgos onde eles so produzidos (rgos
hematopoiticos): medula ssea, bao e linfonodos.
Alm de estudar o estado de normalidade dos elementos sanguneos e dos rgos
hematopoiticos, estuda as doenas a eles relacionadas.

4 RESULTADO E DISCUSSO:
RESULTADO COOMBS:
Se aglutinar sinal que a paciente tem anticorpos anti-D classe IgG em seu soro que esto de
forma perigosa atravessando a placenta e se ligando s hemcias Rh positivas do beb promovendo
sua lise e fagocitose. Se no aglutinar, porque no houve sensibilizao da me com este antgeno
em gestaes ou transfuses anteriores.
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RESULTADO RETICULCITO:
RESULTADO TIPAGEM:
RESULTADO D FRACO:

RESULTADO VHS:

RESULTADO TIPAGEM:

5 CONCLUSO

No setor de hematologia trabalha-se com sangue total e neles so feitos exames como
hemograma, VHS, e tipagem sangnea. O sangue colhido tem o objetivo de estudar as freqentes
alteraes dos seus componentes quando o organismo acometido por doenas.
Muitos so os meios para a obteno do sangue usado para o exame hematolgico, como por
exemplo, sangue o venoso, capilar, arterial, puno da medula ssea de ossos como o externo, tbia,
ilaco e apfises espinhosas, dos gnglios, bao e tumores, porm o sangue usado na maioria das vezes
o venoso e o capilar.

6 REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
MOURA, Roberto A.de Almeida. Colheita de material para exames de laboratrio: Assegurado a
qualidade dos servios no laboratrio clinico. So Paulo: Atheneu, 1998.
VALLADO, Edgar. Manual de tcnicas hematolgicas. So Paulo: Atheneu, 2002.
WADA, C.S; ADHEMAR, P; ROBERTO, A.M. Tcnicas de laboratrio. So Paulo: Atheneu, 2002.
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