Roteiro de Aula Prática

IBM – Introdução à Biotecnologia Microbiana

Prof. Marcela Pavan Bagagli

Aula 2 - Visualização de bactérias no microscópio óptico

Equipe:

1 – A Fresco – Lâmina com Lamínula

AMOSTRA - ________________________________

1 - Diluir a amostra Colocar no tubo com rosca:

1:1 (v:v) • 1 parte de amostra
• 1 parte de água destilada estéril
Homogeneizar (Vórtex ou manual)

2 – Preparar a Dividir a lâmina em 2 partes e no

lâmina centro de cada parte colocar:
• 1 gota de amostra diluída
• 0,5 gota de Azul de metileno + 1
gota de amostra diluída

Recobrir cada amostra com uma

lamínula
• Apoie a lamínula na lâmina
• Incline a 45 e solte
• Aguarde a acomodação

3 – Observar no • Posicionar a lâmina centralizando

microscópio óptico uma das amostras
• Posicionar a lente objetiva de menor
aumento
• Encontrar a amostra
• Aumentar gradativamente as lentes
de aumento, ajustando o foco
1
• Desenhar o observado
 Roteiro de Aula Prática
IBM – Introdução à Biotecnologia Microbiana
Profa. Marcela Pavan Bagagli

Aula 2 - Visualização de bactérias e leveduras microscópio óptico

2 – Coloração de Gram

AMOSTRA - ________________________________

1 - Diluir a amostra Colocar no tubo com rosca:

1:1 (v:v) • 1 parte de amostra
• 1 parte de água destilada estéril
Homogeneizar (Vórtex ou manual)

2 – Preparar a • Coloque uma gota da amostra

lâmina diluída em uma lâmina limpa,
aguarde secar
• Fixe a cultura passando
rapidamente a lâmina próximo à
chama até toda amostra estar
completamente seca

ATENÇÃO: Utilize uma pinça ou

luvas térmicas nesta etapa

Realize as etapas indicadas na figura abaixo,

3 – Coloração de enxaguando em água corrente a lâmina entre uma
Gram solução e outra. Observe no microscópio e registre o
resultado.

2
 Roteiro de Aula Prática
IBM – Introdução à Biotecnologia Microbiana
Profa. Marcela Pavan Bagagli

Relatório – Aula 2

1 – Introdução

- Aponte uma aplicação em que é útil observarmos micro-organismos no microscópio óptico.

- Qual a importância das colorações para observações de micro-organismos ao microscópio?
- Complete o fluxograma apresentado abaixo indicando a finalidade de cada tipo de coloração
utilizada em microscopia de micro-organismos e tipos de estruturas que podem ser visualizadas
utilizando coloração diferencial. Cite um tipo de coloração simples e um tipo de coloração
diferencial de identificação.

Tipos de
coloração

Simples Diferencial

Visualização
Identificação de estruturas

2 – Objetivos

- Apontar o objetivo geral e os específicos da aula

3
 Roteiro de Aula Prática
IBM – Introdução à Biotecnologia Microbiana
Profa. Marcela Pavan Bagagli

Relatório

3 – Resultados

3.1 – A Fresco – Lâmina com Lamínula

3.2 – Coloração de Gram

4
 Roteiro de Aula Prática
IBM – Introdução à Biotecnologia Microbiana
Profa. Marcela Pavan Bagagli

Relatório

4 – Discussões
- Comente sobre as diferenças observadas utilizando a visualização à fresco e com a coloração
diferencial de Gram.
- Comente sobre as formas observadas para as bactérias estudadas. Faça um esquema da
parede celular da(s) bactéria(s) observadas , indicando a sua nomenclatura de acordo com a
diferenciação gerada pela técnica de coloração de Gram.

5 – Referências

Apontar, no mínimo, duas referências para as informações apresentadas no relatório

Orientações Gerais

- O relatório deve ter no máximo 3 páginas

- Dever ser enviado em PDF, com arquivo nomeado conforme orientações do planejamento da
disciplina
- O texto deve trazer as respostas às questões apontadas neste roteiro, de forma CLARA e
SUSCINTA. Lembrem-se MENOS É MAIS!!!