Coleta e preparo de amostras

biológicas - Microbiologia
 Micologia se dedica ao estudo dos fungos, microrganismos que,
morfologicamente, se apresentam tanto macroscopicamente, como é o
caso dos cogumelose quando microscopicamente, quando se trata de
leveduras.
Leveduras

Filamentosos
Fungos
 Leveduras

• Unicelulares
• Esféricas, ovais ou elipsóides
• Algumas formam pseudo-micélio
 Fungos filamentosos -Bolores

• Multicelulares e filamentosos
• Hifas: estruturas tubulares e
ramificadas.
• Conjunto de hifas -
massas filamentosas enoveladas -
micélio
 FungosDimórficos
Habilidade de alguns fungos de crescerem em duas formas distintas em
resposta à temperatura e a fatores nutricionais. Os fungos dimórficos,
quando cultivados à temperatura ambiente ou no seu nicho ecológico
apresentam-se na forma filamentosa; quando incubados a 37ºC em
meios especiais, ou em parasitismo, apresentam-se na forma de
levedura.
 FungosDimórficos

Paracoccidioides brasiliensis

23 oC 37 oC
 Fungos Dimórficos

Histoplasma capsulatum, um fungo dimórfico que causa a histoplasmose

Sporothrix schenkii, um fungo dimórfico que causa a esporotricose

 Morfologia dosFungos

Macromorfologia: características macroscópicas

(coloniais)

Micromorfologia: características microscópicas

 Fungos Filamentosos
Colônias de aspecto seco, aveludadas, algodonosas,
Macromorfologia
pulverulentas.
 Fungos unicelulares -leveduras

Macromorfologia Colônias de aspecto úmido, cremosa ou pastosa.

 Bacteriologia
Seres procarióticos;
Unicelulares;
Autotróficos (cianobactérias) ou heterotróficos.
Morfologia de Bactérias
COLORAÇÃO DE GRAM
Meios de cultivo para isolamento de bactérias
Meios de cultivo para isolamento primário de fungos
 TÉCNICAS DE INOCULAÇÃO DE MICRO-ORGANISMOS

Em microbiologia, há várias técnicas de inoculação de micro-

organismos; algumas são utilizadas para exames qualitativos e outras
para estudos quantitativos (contagem de bactérias). O inóculo é
definido como o material utilizado para iniciar uma cultura microbiana.
 Normas utilizadas
O fio e a alça de platina devem ser sempre flambados antes e depois de qualquer inoculação, ou
seja, devem ser aquecidos ao rubro no cone interno do bico de Bunsen.

Para a coleta do material, devem ser esfriados na parte interna do recipiente com meio de cultura;

Os recipientes (tubos de ensaio, placas de Petri etc) com meio de cultura devem sempre ser abertos
próximo ao bico de Bunsen;

A boca dos tubos de ensaio deve ser aquecida após a retirada e antes da colocação da tampa .A
tampa nunca deve ser colocada sobre a bancada, sendo retirada e mantida segura pelo dedo
mínimo da mão direita durante a inoculação.
 Técnica de semeadura em meio líquido

A cultura de micro-organismo é inoculada em um tubo de ensaio

contendo meio líquido estéril utilizando-se uma alça de platina ou
níquel cromo.
 Transferência asséptica.
(a) A alça é aquecida até a incandescência,
sendo rapidamente resfriada no ar.
(b) O tubo é destampado.

(c) A ponta do tubo é passada pela chama.

(d) A amostra é coletada com a alça estéril.

(e) Após a remoção da amostra, o tubo é

novamente passado na chama, e a amostra,
transferida para um meio estéril.

(f) O tubo é fechado e a alça é novamente

aquecida, antes de ser dispensada.
 Técnica de semeadura em meio sólido
inclinado
A cultura de micro-organismo é inoculada em um tubo de ensaio
contendo meio sólido inclinado estéril por meio de estrias na superfície
do Agar, utilizando a alça de platina.
Figura 2. Técnica de semeadura em meio sólido inclinado
 Técnica de semeadura em meio
semissólido por picagem profunda
A cultura de micro-organismo é inoculada em um tubo de ensaio
contendo meio semissólido estéril utilizando a agulha de platina: a
inoculação deverá ter a profundidade de 2/3 do meio e não deverá

ser mais do que uma única picada.

Figura 3. Técnica de semeadura em meio sólido por picagem profunda
 Técnica de semeadura por esgotamento

A técnica do esgotamento em placa consiste em depositar sobre um

ponto da superfície do meio uma alíquota do material e depois
espalhá-lo em dois ou três setores, por meio de alça de platina, sem
recarregá-la, de maneira a obter quantidades progressivamente
menores do material.
Técnicas de semeadura por profundidade
Técnicas de semeadura por profundidade
Microcultivo de
fungos
filamentosos