Polimorfismo

genético
 Quando comparamos sequencias
genômicas de diferentes indivíduos,
observamos que diferenciam entre si em,
O que é aproximadamente, 1 par de nucleotídeos
em 1.000.
polimorfismo
genético? A maioria dessas variações são comuns e
relativamente inofensivas.

Poli – múltiplas
Quando duas variantes de sequencias
Morfo - forma coexistem na população (não alteram o
fenótipo) e ambas são comuns, são
chamadas de POLIMORFISMOS.
 Conceitos
importantes

• Gene: Unidade funcional hereditária, que corresponde

a um segmento de DNA.
• Lócus: localização de um gene
• Alelos: Variações do mesmo gene (Gene A: A ou a).
• Fenótipo: Característica visível de um organismo.
• Genótipo: Conjunto específico de alelos que formam o
genoma de um organismo.
 Mutação
x
Polimorfismo
Mutação – alteração no DNA,
onde a frequência na população
é menor do que 1% (baixa
frequência).
Polimorfismo – alteração no
DNA, onde a frequência na
população é maior do que 1%
(alta frequência).
 • MUTAÇÃO (normalmente relacionada a
fenótipos mais graves)
• Anemia falciforme: alteração em um único
nucleotídeo no gene que codifica a beta globina
(uma das cadeias que forma a hemoglobina),
Mutação sendo sim a hemoglobina terá uma forma errada,
fazendo com que as hemácias apresentem-se em
x forma de foice, afetando o transporte de O2.
• POLIMORFISMO (normalmente relacionados
Polimorfismo a fenótipos que não tão graves)
• Cor dos olhos: dois indivíduos, um com olhos azuis
e outro com olhos castanhos, ambos apresentam
os mesmos genes para cores diferentes, a
diferença da cor dos olhos ocorre porque este
gene tem alterações que geram cores diferentes.
Tipos de polimorfismo

SNPs

STR
Repetições em
Tandem

VNTR
1) SNPs
• Polimorfismos de Nucleotídeo Único (do inglês, Single Nucleotide
Polymorphism, SNP) - variações pontuais de nucleotídeos do genoma, ou
seja, um único nucleotídeo é substituído por outro.
• Ocorre por todo o genoma, em éxons e íntrons.

Relacionados à:
• Cor dos olhos,
• Cor de pele,
• Metabolização de
medicamentos,
• Tolerância ou intolerância a
lactose
Análise de SNPs

• Utilizados como marcador genético para genes

relacionados a doenças.
• Estudos de população (podem ser exclusivos de
determinadas etnias ou grupos em diferentes regiões).
• Estudos de processos evolutivos, traços familiares,
diversidade entre indivíduos, entre outros.
• Estudo de metabolização de medicamentos (um
medicamento pode ser eficaz para um grupo de
indivíduos, porém tóxico para outro grupo, dependendo
da variante desses genes).
 Repetições em
Tandem: STR e VNTR

STR VNTR
 Tandem =
pequenas

2) STR unidades de
fragmentos
repetidos
• Repetições Curtas em Tandem (STR - Short Tandem
Read) ou polimorfismo de microssatélite.
• Repetições de 2 a 6 nucleotídeos e o número de vezes
que se repetem varia entre os indivíduos.
3) VNTR
• Número variável de repetições em série (VNTR- Variable
Number of Tandem Repeats) ou polimorfismo minissatélites.
• Repetições de mais de 7 nucleotídeos.
 Análise de STRs
e VNTRs

• EXTRAÇÃO DO DNA --- PCR ---

ELETROFORESE

• A PCR é feita de locus padrões já

bem estabelecidos na literatura e
bancos de dados (exemplo na
imagem ao lado).
 Teste de
Paternidade
 Teste de
Paternidade
DNA mitocondrial
• Representa uma valiosa ferramenta
para rastrear a linhagem materna.
• Isto porque a transmissão de DNA
mitocondrial se dá através da mãe,
visto que as mitocôndrias presentes
no espermatozoide não são passadas
para o zigoto.
• O DNA mitocondrial é extremamente
útil para identificar indivíduos que
foram separados de suas famílias.
 Análise de STRs e VNTRs

• EXTRAÇÃO DO DNA --- técnica de RFLP (sobre o DNA inteiro)

• EXTRAÇÃO DO DNA --- PCR --- técnica de RFLP (sobre o material
amplificado)

• RFLP: Técnica utilizada para o estudo do genoma, pois indivíduos

diferentes possuem sequências de nucleotídeos diferentes ao longo
da fita de DNA.
 RFLP
• Polimorfismo no Comprimento do Fragmento de Restrição (RFLP -
Restriction Fragment Length Polymorphism)
• Técnica que utiliza enzimas de restrição (cortam o DNA em sítios
específicos), gerando fragmentos de diferentes tamanhos que são
separados e visualizados em forma de bandas após a eletroforese.
RFLP
 Curiosidade!
O teste de
paternidade por DNA
pode distinguir entre
possíveis pais que são
gêmeos idênticos?
 Gêmeos monozigóticos, ou univitelinos, se originam
Curiosidade! da divisão de um único óvulo fertilizado pelo mesmo
espermatozóide, portanto tem DNAs idênticos. Um
caso de dúvida como esse seria praticamente
insolúvel, porque os dois candidatos a pai da criança
são cópias idênticas de um mesmo indivíduo, como
se fossem clones naturais;

Uma vez que gêmeos idênticos partilham a mesma

carga genética, os testes de DNA não são indicados
para diferenciá-los. O mesmo não acontece com
impressões digitais, que estão entre as poucas
características não compartilhadas entre gêmeos
idênticos. Elas podem ser usadas para diferenciar
gêmeos na investigação de crimes, mas dificilmente
poderiam ajudar em disputas judiciais de paternidade;

Quando dois gêmeos idênticos estão envolvidos em

uma investigação de paternidade, não há nenhum
exame definitivo.
 Curiosidade!
Em exames de DNA tradicionais apenas uma pequena
parte do código é analisada, o suficiente para diferenciar
duas pessoas consideradas normais, mas não para
diferenciar gêmeos idênticos;

CIENTISTAS ALEMÃES recolheram amostras de um par

de gêmeos idênticos e analisaram toda a sequência de
três bilhões de letras. Com isso, encontraram algumas
dezenas de diferenças no DNA.
Os cientistas também analisaram o filho de um dos
homens e descobriram que ele herdou cinco destas
mutações do pai. Após analisar os resultados, eles
afirmam que agora podem diferenciar qualquer
gêmeo idêntico do outro e os filhos destes gêmeos.

A rapidez do resultado é importante nesses casos; o

teste alemão leva um mês para ser concluído.
 Video
https://www.youtube.com/watch?v=rdoFwlPepdk&ab_cha
nnel=InstanteBiotec
Referências Bibliográficas:
• ALBERTS, Bruces, JOHSON, Alexander, LEWIS, Julian, ROBERTS, Keith, WALTER,
Peter, RAFF, Martin. (04/2011). Biologia Molecular da Célula. 5ª edição. Porto
Alegre: Artmed.
• ALBERTS, Bruce, BRAY, Dennis, HOPKIN, Karen, JOHNSON, Alexander, LEWIS,
Julian, RAFF, Martin, ROBERT. (01/2015). Fundamentos da Biologia Celular. 3ª
edição. Porto Alegre: Artmed.
• LIPAY, Monica V. N; BIANCO, Bianca; Biologia molecular - métodos e interpretação
1. ed. - Rio de Janeiro: Roca, 2015.
• LODISH, H.; BERK, A.; MATSUDAIRA, P.; KAISER, C.A.; KRIEGER, M.; SCOTT, M.P.;
ZIPURSKY; DARNELL. Biologia Celular e Molecular. 5ª ed. Porto Alegre: Artmed,
2005. 1054p.
• BRUNO, A. N. (Org.). Biotecnologia II: aplicações e tecnologias. Porto Alegre:
Artmed, 2017.
 Estudo Dirigido

1) Diferencie SNPs, STR e VNTR.

2) O que é polimorfismo?
3) Quais são as técnicas usadas para avaliação de
polimorfismo?
A impressão digital do DNA é rotineiramente usada na determinação de paternidade. A técnica consiste em
extrair o DNA dos glóbulos brancos do sangue coletado da mãe, da criança e do(s) suposto(s) pai(s). O DNA de
cada indivíduo é tratado com a mesma enzima de restrição, e os fragmentos obtidos são separados, formando-
se, assim, o padrão de banda de cada indivíduo.

6
Legenda: M – mãe; F – filho; SP1 – suposto pai 1; SP2 – suposto pai 2
a) No esquema de um gel mostrado ao lado, indique o pai biológico da criança. Justifique a sua indicação.

b) Cite uma aplicação da investigação do DNA na análise forense e uma na prática clínica.

c) A maioria das células eucarióticas é diploide; seus dois conjuntos de cromossomos podem ser dispostos em
pares de homólogos. Por outro lado, as células eucarióticas haploides contêm um único conjunto de
cromossomos. Na espécie humana, é possível encontrar tanto células diploides, como células haploides.
Indique os tipos celulares que exemplificam o genoma haploide e diploide, respectivamente, na espécie
humana.