UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA

CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA
MOLECULAR

LABORATÓRIO DE BQI 470

BIOQUÍMICA DE CARBOIDRATOS

Relatório da aula prática Nº 02

QUANTIFICAÇÃO DE CARBOIDRATOS PELO MÉTODO

DE LANE & EYNOM

Estudantes: Camila Aparecida Martins Matrícula: 91501

Carlos Junior de Assis Estevão Matrícula: 97301
Kissyla Vitoria Reis Vitalino Matrícula: 98833
Marcella Dias Guimarães Matrícula: 98824
Wyver Moreira Gonçalves Matrícula: 95620

Professora: Marisa
Turma:2

VIÇOSA-MG

2023
 1. INTRODUÇÃO

A quantificação de carboidratos pelo método de Lane-Eynon, conhecido também

como método de Fehling, baseia-se na redução completa de íons cúpricos do reagente de
cobre alcalino à óxido cuproso com formação de um precipitado vermelho. A identificação do
ponto final da reação é indicado pelo azul de metileno, que reduz à sua forma leuco devido ao
excesso de açúcar redutor no meio (CARVALHO et al, 2002; INSTITUTO ADOLFO LUTZ,
2008).

Figura 1: Reação de oxidação pelo método de Lane-Eynom

Para que ocorra a determinação e quantificação adequada dos carboidratos redutores é

importante a atenção para dois pontos:

1. A solução deve ficar constantemente em ebulição durante a titulação, porque o

Cu2O formado pode ser novamente oxidado pelo O2 do ar e mudar a cor
novamente para azul.
2. A titulação deve levar no máximo 3 minutos pois pode haver decomposição dos
açúcares com o aquecimento prolongado.

2. OBJETIVOS
Dosar carboidratos redutores e totais pelo método de Lane-Eynom presentes no leite.

3. MATERIAIS E MÉTODOS

3.1.Equipamentos, Vidraria e Reagentes

● Solução de Fehling A
 ● Solução de Fehling B
● Indicador azul de metileno
● Béquer
● Balão volumétrico de 250 mL
● Proveta
● Bureta de 25 mL
● Bico de Bunsen
● Funil de vidro
● Pipeta
● Gazes

● Inicialmente, foi feita a padronização e cálculo do título referente ao reagente de

Fehling, pela titulação de uma solução de glicose padronizada em bureta e erlenmeyer
contendo reagente de Fehling A e B em ebulição promovida pela chapa de aquecimento;
● O volume gasto de glicose deve ser anotado para o cálculo do título;
𝑚𝐿 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑖𝑐𝑜𝑠𝑒 𝑥 0,5
FC = 100

● Posteriormente a esse procedimento, foi feito a preparação do leite medindo 10 mL deste

e em seguida 50mL de água destilada, homogeneizando com bastão de vidro;
● A solução é transferida para um balão volumétrico, e 5 mL de ferrocianeto de potássio a
15% e 5 mL de sulfato de zinco a 30% são adicionados, para então o volume ser
completado;
● Aguardar 10 minutos para precipitação da parte proteica;
● Filtrar a solução em funil de separação usando papel de filtro e coletar o filtrado para
preencher a bureta;
● Pipetar 5 mL de solução de Fehling A e 5 mL de solução de Fehling B para um
erlenmeyer e completar com 40 mL de água destilada;
● Com o preparo, posicionar o erlenmeyer em chapa de aquecimento, até que esta solução
entre em ebulição para dar início a titulação;
● A titulação não deve exceder 3 minutos, se atentando a adição, no início do processo, de
azul de metileno 1% para indicar o ponto de viragem;
● O final da titulação é alcançado quando a cor presente se torna vermelho terrosa;
● Posteriormente a prática, o volume gasto foi coletado para realização dos cálculos,
através da fórmula:
𝐹𝐶/2 𝑥 250 𝑥 100
Açúcares redutores em glicose (%) = 𝑉𝑥𝑃
3. RESULTADOS E DISCUSSÕES

O volume obtido durante a titulação na determinação de glicídios redutores em lactose foi de

21,,4 mL.

Cálculo do título da solução Fehling:

𝑚𝐿 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑖𝑐𝑜𝑠𝑒 𝑥 0,5

FC = 100

mL gasto de glicose: 10,5 mL

O valor de FC foi igual a 5,25.

𝐹𝐶/2 𝑥 250 𝑥 100

Açúcares redutores em glicose (%) = 𝑉𝑥𝑃

FC: Título da solução de Fehling

V: Volume gasto na titulação: 21,4 mL
P: Peso da amostra: 10,00 g

Açúcares redutores em glicose = 31 %

Figura 2: Precipitado contendo a parte protéica do leite

 Figura 3: Solução contendo Fehling A e B e água destilada

Figura 4: Reação de oxidação pelo método de Lane-Eynom

Como exposto na introdução, o cobre presente na reação de Fehling advém da redução

completa dos íons cuproso do reagente à óxido cuproso, causado pelos açúcares redutores,
formando o precipitado. A solução azul precisa ser gotejada em ebulição e levemente, ser
misturada ao ponto que a leitura sofre uma virada de titulação, tendo a coloração mudada
drasticamente. Nosso experimento foi errôneo por essa imprecisão da técnica de levemente
gotejar e levemente misturar, ocasionando na realização do experimento por duas vezes.
4. CONCLUSÃO

O método de Lane & Eynon representa uma ferramenta valiosa na quantificação de

carboidratos, oferecendo uma abordagem sólida e confiável para a análise desses açúcares em
uma variedade de contextos científicos e industriais. Ao longo deste relatório, exploramos os
princípios fundamentais deste método, que se baseia na reação de redução de Fehling e suas
modificações para melhorar a especificidade e sensibilidade na detecção de diferentes tipos de
carboidratos.
É importante mencionar que este método não está isento de limitações. A complexidade
de algumas reações envolvidas e a necessidade de cuidados na preparação das amostras podem
tornar a técnica mais demorada e propensa a erros, quando comparada a abordagens mais
modernas. Além disso, a interpretação dos resultados pode ser afetada por fatores como a
presença de interferentes.

5. EXERCÍCIOS

5.1 Qual a principal diferença entre o método do DNS com o de Lane-Eynon?

Em resumo, a principal diferença entre o método DNSA e o método Lane & Eynon é
a sua aplicação e especificidade. O método DNS é mais amplo e pode ser usado para
quantificar uma variedade de açúcares redutores, enquanto o método Lane & Eynon é
específico para a quantificação da glicose e é frequentemente aplicado em contextos clínicos
e médicos. Ambos os métodos utilizam reações químicas para produzir mudanças de cor que
são relacionadas à concentração de açúcares na amostra.
6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. A. DUNSMORE, P. MELLET, M. WOLFF. Some factors affecting the Lane and Eynon
titration method for determining reducing sugars in sugar products. Proceedings of The
South African Sugar Technologists' Association - June 1980.
2. Diaz, Marisa. LABORATÓRIO DE BQI 470 - Bioquímica de Carboidratos.
Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Universidade Federal de Viçosa.
Viçosa, 2021.
3. DONERMANN, G, M.Comparação de Métodos Para Determinação de Açúcares
Redutores e Não Redutores. Orientadora: Débora Jung Luvizetto Faccin. 2016. 47 f.
Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Engenharia Química). Escola de
Engenharia, UFRGS, Porto Alegre, 2016. Versão eletrônica.