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LISTA 1

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Tema: Cromatografia em Camada Delgada e Reveladores
1. Após a realização de cromatografia coluna de fase normal, a análise dos resultados
por CCD em fase reversa apresentou as características apresentadas na figura
abaixo. Indique a ordem de eluição das substâncias na coluna. Justifique
detalhadamente sua resposta.

A B C D E F G H I

2. Como se classifica a cromatografia quanto técnica e quanto ao mecanismo de


separação? exemplifique.

3. Qual o tipo de mecanismo de separação envolvido na cromatografia em camada


delgada?

4. Considerando os solventes citados a seguir indique a ordem crescente de


polaridade dos mesmos.
Água, Cloreto de Metileno, Hexano, Acetonitrila, Álcool Metílico

5. Uma mistura contendo os compostos I, II e III representados abaixo foi analisada


pela técnica da cromatografia em camada delgada.

CH3
CH3

H3C
H2C CH3 H3C H2C CH3

I II III
A mistura foi aplicada em uma cromatoplaca de sílica gel. Após eluição com hexano:éter
etílico (4:1) e revelação sob luz UV 254 nm, a cromatoplaca apresentou o seguinte
aspecto.

Quando a cromatoplaca foi revelada com anisaldeído sulfúrico foram observadas três
manchas. Pode se afirmar que as manchar obtidas nos Rf 0,2 e 0,77 correspondem
respectivamente às estruturas:
a) I e II
b) I e III
c) II e I
d) II e III
e) III e I
f) III e II

6. Descreva quais são os três métodos para detectar substâncias por cromatografia em
camada delgada. Dê pelo menos um exemplo de cada um. A substância 3 foi isolada do
extrato etanólico das cascas do e apresenta um Rf em CCD de sílica eluída com
CHCl3/MeOH (9:1) maior do que o da substância 2 eluída com CHCl3/MeOH (95:5).
Como se explica este resultado?

H H

H H
Gli Glc 3
2 OH
OH HO
O O
Gli = O OH Glc = O
HO OH HO OH

7. Defina os seguintes termos em cromatografia:


a) Fase estacionária;
b) Fase móvel ou eluente; d) Revelador;
c) Matriz e) Câmara ou cuba cromatográfica;
d) Frente da fase móvel; f) Saturação da Cuba
e) Fator de Retenção;

8. O que é cromatografia de permeação em gel e como ela funciona?


9. Qual técnica cromatográfica depende das interações altamente específicas entre pares
de materiais biológicos, como enzima-substrato? Explique
A) Cromatografia de adsorção
B) Cromatografia de troca iônica
C) Cromatografia de afinidade
D) Cromatografia de permeação em gel

10. O uso do hormônio insulina para purificar seu receptor é um exemplo de


A) Cromatografia de troca iônica
B) Cromatografia de afinidade
C) Cromatografia de filtração em gel

11. A cromatografia de troca iônica é baseada na


A) atração eletrostática
B) mobilidade elétrica das espécies iônicas
C) cromatografia de adsorção
D) cromatografia de partição

12. Um laboratório precisa separar duas proteínas carregadas diferentes presentes em uma
amostra. Para isso, é proposta a utilização da cromatografia de troca iônica com uma
coluna de resina carregada negativamente. No entanto, ao realizar uma primeira análise
cromatográfica, foi observado que ambas as proteínas eluem muito próximas uma da
outra, o que torna difícil a sua separação completa. Como o laboratório poderia resolver
esse problema de separação e obter uma separação mais eficiente das proteínas presentes
na amostra usando cromatografia de troca iônica?

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