06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Vida Útil da Coluna HPLC

Como Saber Quando é a Hora de Dizer Adeus?

Autora convidada – Dra. Helen Whitby, Especialista Técnica

Deixar de lado sua Coluna favorita pode ser difícil, então quando é realmente hora de
dizer adeus? Abaixo estão alguns dos sinais que você deve observar quando a vida útil
da sua Coluna de HPLC está chegando ao fim.
Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 1/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Pressão alta que não diminui mesmo depois da limpeza da coluna

Picos Divididos
Perda de Resolução
Alargamento do pico
Variação no tempo de retenção

Alta Pressão:

Os aumentos na pressão são geralmente o resultado da obstrução no frit de entrada da

Coluna HPLC. Para remover a obstrução, na maioria das situações, é possível inverter o
fluxo do solvente pela Coluna a uma taxa de fluxo reduzida e deixar passar 100% do
solvente forte pela Coluna. Se a pressão não voltar ao normal, o frit está com uma
obstrução irreversível ou há um espaço vazio no leito da Coluna. As duas situações
exigem que a Coluna seja substituída.

Picos Divididos:

Muitos picos divididos também são o resultado de um frit obstruído na entrada da

Coluna, o que resulta em uma injeção canalizada. Para resolver isso, primeiro siga as
etapas descritas acima. Se o pico dividido permanecer, a causa provável são as
condições de funcionamento inadequadas da metodologia (trabalhar muito próximo ao
pKa do composto ou usar um solvente de injeção forte) ou a Coluna pode estar
comprometida com contaminantes fortemente retidos. Se a entrada estiver
irreversivelmente obstruída ou a fase estacionária estiver contaminada será necessário
substituir a Coluna.

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 2/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Perda de Resolução:

As Colunas HPLC são itens consumíveis e, como tal, ao longo do tempo, você começará
a perder a resolução dos seus pares críticos. Pode ser possível a regeneração de algumas
Colunas e cada Coluna terá seu próprio protocolo individual para isso, no entanto,
depois que a perda de resolução foi comprometida em um par crítico de compostos e
não pode ser regenerada, sua Coluna chegou ao fim de vida natural para a análise
específica que você está fazendo.

Alargamento do pico:

Alguns alargamento do pico podem ocorrer por motivos diferentes do fim natural da
vida útil de uma Coluna, incluindo: sobrecarga de injeção, tamponamento inadequado,
condições inadequadas do método e solventes fortes de injeção. No entanto, se esses
elementos foram eliminados, o alargamento do pico é um sinal de que a Coluna está
envelhecendo. Depois que o perfil cromatográfico deteriorou ao ponto de você não
conseguir mais atender a adequação do sistema ou resolver pares críticos, é hora de
dizer adeus.

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 3/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Variação no tempo de retenção:

Na maioria das vezes, as variações no tempo de retenção são os resultados de um

controle deficiente do método, porém, em caso de contaminação de fase, notará
variações no tempo de retenção dos picos, se a sua fase estiver ficando suja. Nem todos
os picos serão afetados igualmente e, se você já tiver eliminado todas dúvidas em
relação ao método para solução de problemas, a causa provável que sobrará será a
contaminação da fase estacionária e sua coluna precisará ser descartada.

Para ter certeza de que a coluna é o problema, existem coisas que você pode testar:

Limpe a Coluna seguindo as recomendações do fornecedor. Cada Coluna tem um

guia individual, mas um guia geral para a maioria das Colunas pode ser encontrado
clicando aqui.
Teste o desempenho da Coluna com a mesma solução teste indicada no certificado
de qualidade da Coluna. Isso informará como a seletividade mudou desde que você
começou a usar.
Verifique a data em que recebeu a Coluna. É provável que, se ela estiver em seu
laboratório desde 2008, seja o momento de atualizar para um modelo mais novo.

Todos esses pontos para solução de problemas são discutidos mais detalhadamente em
nosso Guia de Solução de Problemas em HPLC.

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 4/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Para mais informações sobre como cuidar melhor da sua Coluna, como fazer uma
análise ou qualquer outra coisa relacionada ao trabalho, a Allcrom oferece um serviço
técnico gratuito através do chat, que permite que você fale com especialistas.

 Posted in Atualidades, News

 Tagged Cromatografia, hplc, Phenomenex, uhplc

Deixe uma resposta

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 5/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

O seu endereço de e-mail não será publicado. Campos obrigatórios são marcados com *

Comment

Name*

E-mail*

Website

Salvar meus dados neste navegador para a próxima vez que eu comentar.

Publicar comentário

MAIS VISUALIZADOS

 O que é HPLC e como Funciona?

 A Ciência do Cianeto

 Por que a C18 é a Fase Estacionária mais Popu...

 Desafio da Flor de Lótus em Origami – D...

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 6/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

 Como Limpar uma Coluna HPLC usando Fluxo Inve...

 Sangue Venoso x Sangue Capilar

 Dica Técnica: Precipitação de Proteínas

 Como a Temperatura Afeta o Tempo de Retenção...

 Vida Útil da Coluna HPLC​

 Extração Líquido-Líquido vs. Extração Líquida...

MAIS RECENTES

 Como escolher seu Sistema de Filtração a Vácuo?

 Estabilidade de Medicamentos Baseados em Anticorpos

 Usando VAMS e HPLC-MS/MS para Triagem Toxicológica

 Pesquisa do Câncer Pediátrico

 Refrigeração Científica VS Modelos Domésticos

CATEGORIAS

 Atualidades (30)

 Axel (1)

 Freezers (1)

 Lançamentos (10)

 Marketing (1)

 Mitra (31)

 News (67)

 Notas Técnicas (10)

 Sem categoria (4)

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 7/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

 SPE (1)

Search 

 PREVIOUS

Como Limpar uma Coluna HPLC usando Fluxo

Invertido

NEXT 

Pré coluna de HPLC e UHPLC:

Nossa Empresa

Home
Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 8/9

06/11/23, 16:35 Vida Útil da Coluna HPLC​-

Nossa Empresa

 Certificado Maxcrom Eventos

Blog

Entre em Contato

Produtos/Serviços Solicite sua Cotação

Consumíveis (11) 3464 8900

Equipamentos Analíticos (11) 96499 5723

Equipamentos para Laboratório
Atendimento
Assistência Técnica
 sac@allcrom.com.br

São Paulo /SP – Brasil

Allcrom 2023
*As marcas, imagens, números, símbolos, descrições e nome dos fabricantes são somente usados como fins de referência, denominando que nenhum
produto mencionado ou anunciado por este site seja por nós fabricado. As marcas são de propriedade de seus respectivos proprietários ou detentores
do registro das mesmas.

Fale conosco, estamos online!

https://w w w .allcrom.com.br/como-saber-quando-e-a-hora-de-dizer-adeus/ 9/9