DIFERENÇÃ DE SEPSE E BACTERIMIA

Infecções que podem levar à sepse começam mais comumente nos pulmões, abdômen ou
trato urinário. Na maioria das pessoas, essas infecções não levam à sepse (infecção
generalizada).

Bacteremia é a presença de bactérias na corrente sanguínea.

Tecnica hemocultura

É coletado sangue

Um total de duas a três culturas em 24 horas costuma.

6 horas, 12 horas e 24 horas, marcar sempre data da coleta e horário na amostra.

Coletar três amostras de punções venosas diferentes (braço direito e esquerdo), com intervalo
de 15 a 30 minutos, 1-2 horas antes da antibioticoterapia.

Volume se possível, 10 a 20 mL por amostra.

Coleta de Paciente com picos febris depende do estado imunológico paciente

BHI + SANGUE

Semeia em ágar sangue coloca na jarra 24 horas se positivo semeia no mac conkey e manitol
estufa.

Na jarra acender a vela na hora que apagar saiu todo ar, colocar na estufa.

Se negativo repetir a cultura por 7 dias.

Pode fazer esfregaço a fresco direto

Coloração de Gram.

Principais patógenos

Nesseria meningites

H. influenza

Staphylococcus pneumunae

Cocos + staphylococcus aureus e epidemides

Bactérias – E.coli, klebisiella pneumunae, pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter

Bactérias fastidiosas são aquelas bactérias que exigem niveis de nutrientes altíssimos e
específicos e temperaturas ótimas, ou seja, são mais difíceis de cultivar em laboratório devido
essas exigências.

Fungos Candida sp, aspergillus e fumigatus.

Ponta de cateter

Ágar sangue

Com a pinça flambada fazer rolamentos.

Na jarra acender a vela na hora que apagar saiu todo ar, colocar na estufa.

Se positivo mais 6 colônias semear em MacConkey Manitol.

Faz se em conjunto com a hemocultura, uma comparação dos 2 resultados.

Testes para leveduras

Tubo germinativo

2 ml soro de paciente

1 porção levedura

Estufa por 2 horas

Meio utilizado para vê a constrição e diferenciação das cândidas albicans de não albicans, a
constrição é a divisão celular do brotamento, a cândida albicans não tem constrição as demais
tem.

O meio não pode passa de 3 horas por causa dos dimorfismos que a Cândia albicans sofre após
esse período.

Micro cultivo de ágar fubá

Em uma placa de Petri revestida com papel filtro embebido de água destilada autoclavada 2
lâminas em forma de cruz com meio solidificado passar com a alça em L passar duas carreiras
formam lateral de leveduras, colocar na estufa por 72 horas fazer leitura, para ver o filamento
da levedura. (Hifas são as estruturas que compõem as células de um fungo. Ou seja, são os
filamentos que constroem uma trama, representando assim o corpo do fungo).

Leitura

Retirar a lâmina limpa e observar objetiva de 40x

Exemplos

C. Tropicalis pobre de filamentos

C.albicans rica em filamentos

Cromoagar colorimétrico separa as cândidas por cor

O CHROMagar Candida Medium é um meio de cultura seletivo de cor acizentada/acastanhada

utilizado para identificação de espécies de Cândida através de diferentes colorações formadas
pelas colônias devido ao substrato cromogênico presente no meio.

- Candida albicans: colônias verdes claras.

- Candida tropicalis: colônias azul cobalto ou lilás.

- Candida krusei: colônias rosadas.

- Candida glabrata: colônias bege/creme.

- Candida parapsilosis: colônias rosas lisas.

Auxonograma

Meio feito com

Salina

Meio

Carboidratos específicos

O auxonograma consiste na capacidade que uma levedura apresenta de crescer aerobiamente

na presença de determinado carboidrato, fornecido como única fonte de carbono.

utilizado para assimilação de carboidrato utiliza a tabela para definição espécie.

Micro cultivo em ágar batata ( fungos filamentosos)

Em uma placa de Petri revestida com papel filtro embebido de água destilada autoclavada 2
lâminas em forma de cruz recortar 2 quadrados um em cada extremidade da lâmina com a alça
em L fazer piques em nas 4 pontas dos quadrados cobrir com a lamínula deixar em
temperatura ambiente por 5 dias na estufa observar todos os dias, leitura é feita na lâmina
pinga uma gota de coloca a lamínula aonde no aspergilus podemos observar os
conidióforos.

Observar objetiva de 40x

Para ver se ouve a produção de conidióforos, estrutura de reprodução assexuada.

Antifungigrama visa a determinação de resistência a antifúngicos.

Escala 1 Mac Farland

Método de disco difusão

Método de Kim bauer

Estufa 24 horas

Medir alo e lê tabela.

Tinta da China

1 gota de levedura 1 de tinta da china lâmina lamínula

Objetiva de 40x

Positivo céu estrelado Cryptococcus (capsula polissacarídeo não cora).

Negativo Cândida colore tudo fica preto

Ureia

Cryptococcus positiva rosa

Cândida negativa não altera o meio.

Na microbiologia temos 2 grandes grupos

Levedura

Cryptococus neoformans

Cândidas sp

Filamentoso

Aspergillus sp.

Penicillium sp

Fsarium sp

Diferença entre demácios e hialinos

Fungos demácios são encontrados na natureza e possuem como característica a presença de

melanina, responsável pela pigmentação escurecida de seus esporos e conídios e que parece
se comportar como um fator de virulência. São os fungos marrons

O que significa presença de hifas hialinas?

São aquelas nas quais o fungo acomete camadas mais superficiais da córnea da pele ou a haste
livre dos pelos. Aspecto azulado

Cândida hemólise

A atividade hemolítica representa um mecanismo de captação do ferro e expressa a

capacidade da levedura em destruir as hemácias.

Muitos microrganismos patogênicos utilizam a hemoglobina como fonte de ferro, fundamental

para a sobrevivência e o estabelecimento da infecção.
o. Estes patógenos secretam fatores hemolíticos com o objetivo de obter hemoglobina ou o
grupo prostético heme como fontes de ferro, a partir da lise de eritrócitos. Pouco se conhece
sobre a atividade hemolítica das espécies de Candida, mas sabe-se que o potencial patogênico
dessas leveduras pode estar associado a produção de hemolisinas (α e β), fator que contribui
para a disseminação (Luo et al., 2001; Negri et al., 2010), particularmente facilitando a invasão
hifal na candidíase disseminada.

No presente estudo as espécies C. parapsilosis e C. albicans e foram as leveduras mais isoladas

de casos de candidemia, com isolamento da espécie emergente C. guilliermondii. Todas foram
produtoras de hemolisinas e proteases, com destaque para a espécie C. parapsilosis, já citada
na literatura como sendo a mais envolvida a biofilmes e dispositivos médico-invasivos.