Diagnóstico Laboratorial de Doenças

Infecciosas

Infecções Purulentas
Furúnculo: pode comprometer um
folículo piloso e também
comprometer uma glândula
sebácea e tecido subcutâneo.
Foliculite: processo inflamatório em Staphylococcus aureus é o principal
que ocorre a obstrução de um patógeno.
folículo piloso. Acontece muito nas
Úlcera: perda de continuidade do
nádegas e axilas que são regiões
epitélio. Algumas infecções fazem
quentes e úmidas e que
isso (inclusive de natureza fúngica
concentram muitas bactérias.
como a esporotricose).
80% das dermatoses e dos
problemas de pele de natureza
infecciosa e bacteriana são por
Staphylococcus aureus.
Erisipela: infecção que geralmente
acomete membros inferiores Pode Além dos processos purulentos,
ter febre, linfadenopatia e são acompanhadas de febre,
leucocitose. Geralmente causada principalmente em crianças. (por
por Streptococcus pyogenes. volta dos 5 anos)

Paroníquea: infecção na região A principal finalidade do exame

proximal do dedo que fica em
contato com a unha.
Staphylococcus aureus é um dos
principais agentes etiológicos.
Pseudomonas aeruginosa também
pode acometer e, no caso de
fungo, a Candida spp.
bacteriológico é identificar
Streptococcus pyogenes. (grupo A
de Lancefield)
É um coco gram positivo que tem
uma característica de cadeia.

Coleta:
 Usa dois swabs. Um swab vai
ser usado para
bacterioscopia (coloração de
gram) e o outro swab vai
ser usado para cultura.
O principal meio utilizado é o ágar
sangue que cresce tanto gram (+)
quanto gram (-). Temos o EMB
que é seletivo para gram negativa
e o manitol salgado que é seletivo
para bactérias do gênero
Staphylococcus. Essa seleção de
meios é a ideal.
Na hora da coleta, é importante
evitar contato com a língua, a
gengiva e a saliva porque essas
regiões são muito ricas em
bactérias da microbiota normal. O
paciente deve abrir bem a boca e
deve – se priorizar passar o swab
em uma placa purulenta. Nos casos
de material escasso, faz – se
enriquecimento com B H I (4h a
37ºC em banho Maria ou estufa).
Se só tem um swab, pode pegar
esse swab que estava lá na
solução salina ou no B H I e fazer
o esfregaço e o líquido que ficou
no B H I ou na solução salina, utiliza
para fazer a cultura.
Pega o meio de cultura e semeia
com o swab (faz o movimento de
estrias até esgotar o material).
Coloca na estufa a 37ºC por 24 –
48h
Leitura das placas:
 Ágar sangue: deve – se
procurar padrões de
hemólise (beta, alfa, gama).
Nesse caso, observaremos
uma beta hemólise (uma
hemólise total). Ao redor da
colônia, a cor vermelha do
meio some.
Beta hemólise: característica de
bactérias Staphylococcus aureus e
Streptococcus pyogenes. As
colônias de Streptococcus são
mais puntiformes (menores).
 Ágar MacConkey: meio para
bactéria Gram NEGATIVA.
Se crescer, é gram negativa.
 Ágar manitol salgado: meio
onde cresce Staphylococcus.
Teste da catalase:
 Teste para diferenciar
Staphylococcus de
 Streptococcus e não fez o
ágar manitol. Pega um pouco
da amostra e coloca em
contato com a água
oxigenada (peróxido de
hidrogênio). Se a bactéria
tiver a enzima catalase, ela
quebrar o peróxido de
hidrogênio vai liberar
oxigênio e se observa a
formação de bolhas (catalase
positiva).
Cuidado com o ágar sangue
porque ele tem hemácias e as
hemácias tem catalase. Se
hemácia entrar em contato com
o peróxido de hidrogênio, vai
haver uma reação falso +.
Se a catalase deu + será que é
S. aureus?
Teste da coagulase:
 É uma enzima (fator de
virulência da bactéria) e é
semelhante à protrombina
que transforma fibrinogênio
em fibrina e forma o
coagulo. Fator de
patogenicidade importante
para a bactéria. 97% dos S.
aureus é positivo.
 Uma das formas de fazer
esse teste é a prova em
tubo: detecta coagulase livre
ou extracelular. Pega a
colônia e adiciona 0,5 mL de
plasma diluído (proporção 1
para 4) e incuba em banho
Maria (37ºC). Avalia de uma
em uma hora até 4h e avalia
depois só com 24h. Se o
plasma coagular, é coagulase
positiva. Se o plasma não
coagular, é coagulase
negativa.
S. aureus é coagulase +
Teste da produção de DNAse
 Verificar a atividade da
enzima
desoxiribonuclease – S.
aureus é +
 Essa enzima
despolimeriza o DNA do
meio de cultura DNAse
 Serratia que é gram
negativa (+) Proteus (-)
 Semeia a bactéria no
meio DNAse + HCl (ácido
clorídrico) na
concentração de um
normal após 24 de
incubação. O DNA
despolimeriza e precipita
com o HCl.
A vantagem desse teste é que
em uma placa, pode – se fazer
vários testes.
Teste da Novobiocina do teste de sensibilidade à
Novobiocina.
 Os coagulase negativos,
 S. saprophyticus e S.
especialmente o S.
epidermidis são bactérias da
saprophyticus tem ganhado
microbiota normal.
importância clínica (se
 Se for sensível a esse
destacando como causador
antibiótico e tiver um aro de
de infecções urinárias).
inibição maior ou igual a
 A diferenciação com o S.
16mm é S. epidermidis.
epidermidis é feita através
Espécie Catalase Coagulase DNAse Novobiocina
S. epidermidis + - - Sensível
S. aureus + + + Sensível
S. saprophyticus + - - Resistente

Teste da Bacitracina
 Identificação de
 S. pyogenes é sensível
Streptococcus beta
 Ver a hemólise (tem que
hemolíticos do grupo B
ser beta hemolítico)
(S. agalactiae) muito
 Suspensão
comum na microbiota
 Plaquear em ágar sangue
vaginal.
 Disco de bacitracina 0,04
 Produzem fator Camp
unidades
 Fator Camp atua
 Incubar numa atmosfera
sinergicamente com
de CO2 (jarra de
betalisina de algumas
Gaspark)
linhagens de S. aureus
 Halo de qualquer
ATCC – 25923
intensidade é S. pyogenes.
 Semeia a S. aureus e de
Bactéria que é beta hemolítico e forma perpendicular a ela,
bacitracina negativa semeia a amostra.
Acontece uma distorção
Teste de Camp da hemólise. Próximo ao
S. aureus, a bactéria da
 amostra produz uma  Hidrólise de esculina =
hemólise (aspecto de glicose e esculeteína +
seta) citrato férrico do meio =
escurecimento.
Teste da Optoquina:
Prova de tolerância ao sal (NaCl de
 Colônias produzem alfa
6,5%)
hemólise (parcial)
 Diferenciar Streptococcus  Diferenciação de
pneumoniae de Enterococcus dos não
Streptococcus viridans Enterococcus (S. bovis)
Fazem parte da microbiota  Enterococcus faecalis
(S. viridans na microbiota crescem em B H I + 6,5%
bucal e S. pneumoniae no de NaCl
pulmão pode causar  Prova segura e definitiva;
pneumonia).  Observar turvação (turvação
 Semeia a bactéria em ágar em meio líquido significa que
sangue amostra cresceu)
 Coloca disco de Optoquina
 Incubar em jarra de
anaerobiose
 Halos maiores ou iguais a O escarro reflete qualquer infecção
14mm = S. pneumoniae que possa estar ativa na árvore
brônquica e pulmões.
Suponha – se que a bactéria é
bacitracina negativa, Camp Principais causadores de infecções:
negativo, posso pensar numa
 Klebisiella pneumoniae (gram
bactéria do grupo D (S. bovis ou
Enterococcus) negativa)
 S. aureus (gram positiva)
 Mycobacterium tuberculoses
Prova da bile esculina (bacilo álcool ácido
 Streptococcus e bactérias resistente)
Enterococcus ambos do O uso indiscriminado de antibióticos
grupo “D” hidrolisam a pode promover o surgimento de
esculina em presença de 1 – bactérias que não são tão comuns
4% de sais biliares..
como Proteus spp. E. coli,
Pseudomonas aeruginosa

1. Diagnóstico de pneumonias
bacterianas.
 Exame a fresco (não é tão
A Mycobacterium tuberculoses ou
comum)
Bacilo de Koch é a bactéria
 Gram
causadora, afeta principalmente os
 Cultura: ágar sangue,
pulmões. A transmissão ocorre por
MacConkey e ágar
via respiratória através do espirro,
chocolate.
tosse ou fala. Uma pessoa com
2. Diagnóstico de casos
tuberculose pode infectar em
suspeitos de tuberculose
média outras 15 em um ano. Após
 Pesquisa de BAAR
15 dias de tratamento, o risco de
 São necessárias 3 amostras
transmissão é muito baixo.
consecutivas
É importante o diagnóstico  Bacterioscopia: cocobacilos a
precoce e o tratamento em que o bacilos longos e delgados
paciente tenha uma adesão à
terapia. Preparo do esfregaço MÁXIMO
CUIDADO – a flambagem da alça
pode produzir aerossóis. Para o
Sintomas: descarte, o ideal é que use fenol a
5%.
 Tosse seca ou produtiva
(quando há muco ou catarro)
 Febre vespertina Leitura e interpretação – escala
 Sudorese noturna logarítmica de Ridley:
 Emagrecimento
(0) Ausência de bacilos em 100
 Cansaço e fadiga campos examinados
 Tosse por mais de 3
semanas precisa ser (1+) Presença de 1 a 10 bacilos
investigada. em 100 campos

(2+) Presença de 1 a 10 bacilos a

cada 10 campos
(3+) Presença de 1 a 10 bacilos,
em média, em cada campo
examinado.
(4+) Presença de 10 a 100
bacilos, em média, em cada
campo examinado.
(5+) Presença de 100 a 1000
bacilos, em média, em cada
campo examinado.
(6+) Presença de mais de 1000
bacilos, em média, em cada
campo examinado.
Cultura
Para casos suspeitos de
tuberculose: meio Loewenstein
– Jensen (meio de alto custo).
Leva em torno de 30 a 60 dias
de encubação.
Teste rápido para a tuberculose
será oferecido no SUS – o
GeneXpert
 Nova tecnologia com
diagnóstico em 2h
 O MS vai disponibilizar
gratuitamente na rede
pública
 Especificidade de 99%
 Identifica resistência a
rifampicina
O microrganismo mais comumente
relacionado às infecções do trato
genital é o gonococo (Neisseria
gonorrhoeae)
A gonorreia é uma IST (infecção
sexualmente transmissível) e o
diagnóstico é basicamente clínico.
Outros que podem acometer:
Streptococcus spp., Enterococcus
spp., Staphylococcus spp., E. coli.,
Chlamydia trachomatis., C. albicans.,
Trichomonas vaginalis
Coleta de material
 Secreção ou corrimento
uretral induzido por
massagem da uretra.
 Antes da primeira micção ou
4h após a última.
 Gonococo é sensível à
dessecação e não suporta
refrigeração – Coloca a
amostra no meio de
transporte Stuart.
Diagnóstico laboratorial
 Esfregaço
 Exame direto a fresco e
gram
  Leitura: leucócitos  Bacilos gram negativos – G.
polimorfonucleares e vaginalis
diplococos gram  Em infecções sintomáticas
negativos, reniformes e  Secreção + KOH (10%) =
intracelulares ODOR DE PEIXE
 Interpretação – gonorreia.  Lamina com poucos
 Cultura Lactobacillus
1. Ágar sangue (jarra) – Não  A cultura no ágar sangue se
cresce observa colônias pequenas e
2. MacConkey – não cresce hemolíticas
3. Thayer – Martin ou  Fenômeno CLUE CELL:
chocolate enriquecido (jarra) observa – se bacilos gram
– cresce. negativos aderidos a células
4. Teste da oxidase positivo. epiteliais de descamação
Diagnóstico diferencial entre as
Neisseria
Fermentação de açúcares Critério de Nugent para o
 N. gonorrhoeae – glicose diagnóstico da vaginose
positivo, lactose e bacteriana baseado no
maltose negativo esfregaço vaginal corado pelo
 N. meningitidis – glicose e método de Gram.
maltose positivos e  Zero = sem morfotipos
lactose negativo (Suspeita no campo de imersão
de meningite) (1000X)
 N. lactamica – glicose,  1 += menos que um
maltose e lactose morfotipo por campo de
positivos. imersão (1000X)
Bacilos gram negativos –  2+= um a quatro
Gardnerella vaginalis. Algumas morfotipos por campo de
mulheres tem essa bactéria na imersão (1000X)
microbiota normal  3+= de cinco a trinta
 Critérios de AMSEL para morfotipos por campo de
vaginose bacteriana imersão (1000X)
  4+= mais que 30
morfotipos por campo de
imersão (1000X)

Pontuação segundo a quantidade de microrganismo

Tipo morfológico Nada 1 + 2+ 3+ 4+
dos microrganismos
Bacilos longos gram 4 3 2 1 0
positivos
Cocobacilos gram 0 1 2 3 4
negativos
Bacilos curvos gram 0 1 1 2 2
negativos

0 – 3 pontos: normal
4 – 6 pontos: intermediário
7 – 10 pontos: vaginose bacteriana.