COMPARAÇÃO DE TRÊS DIFERENTES MÉTODOS: 3M MDS, VIDAS E ISO 6579 PARA

DETECÇÃO DE SALMONELLA sp.

Danielle Cristine da Silva1,2; Hans Fröder2

1
Acadêmica do Curso de Biologia; 2Laboratório Tüv Süd Brasil

INTRODUÇÃO
A produção industrial de animais e de alimentos de origem animal Observou-se que o sinal de detecção, para a maioria das amostras de
e o intercâmbio comercial intenso de animais e produtos leite, atingiu o limiar de detecção nos primeiros 15 a 20 minutos
derivados para o consumo humano têm favorecido a introdução e (Figura1).
a disseminação de Salmonella e de outros patógenos na cadeia
alimentar (WHO, online). Salmonella tem sido o principal agente
de doenças de origem alimentar em várias partes do mundo
(WHO, online) incluindo o Brasil. Dados do Ministério do Brasil
revelam que entre os anos de 2000 a 2013, o Brasil teve 8.857
surtos alimentares, sendo que Salmonella foi o principal agente
envolvido em 1522 (17,18%) dos casos (Food Safety Brazil,
online). Com o objetivo de se obter resultados rápidos e
confiáveis que permitam o monitoramento da segurança
microbiológica de alimentos, seja pela indústria ou pelos órgãos
de fiscalização, diversos métodos têm sido desenvolvidos para a Figura 1. Run report obtido com as amostras de leite, com nível de inóculo de 8 UFC/25 g de
detecção de Salmonella. Um método alternativo recentemente Salmonella.

lançado no mercado para a detecção de patógenos é o 3M Para as 10 amostras de carne artificialmente contaminadas com
Molecular Detection System (MDS). população de Salmonella (1 UFC/25 g), observou-se que o 3M MDS
OBJETIVO não detectou 40% das amostras (Tabela 2), já para Vidas e ISO 6579
Este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de foi de 30%, respectivamente. Observou-se também que o sinal de
detecção do método 3M Molecular Detection System empregando detecção, para a maioria das amostras de carne, atingiu o limiar de
matrizes alimentares e comparar o método 3M MDS com os detecção nos primeiros 15 a 20 minutos (Figura 2).
métodos Vidas (AOAC 996.08) e ISO 6579 para detecção de Tabela 2. Resultados obtidos da matriz carne, com nível de inóculo de 1 UFC/25 g de Salmonella,
empregando a metodologia 3M MDS.
Salmonella empregando matrizes alimentícias.
Identificação da Amostra Resultado
MATERIAL E MÉTODOS Carne 1 Negativo
Carne 2 Positivo
Neste estudo foram utilizadas 10 amostras de leite em pó e 10
Carne 3 Positivo
amostras de carne (isentas de Salmonella) que foram
Carne 4 Positivo
artificialmente contaminados por Salmonella Abaetetuba ATCC Carne 5 Positivo
35640. As amostras foram analisadas em dois níveis de Carne 6 Negativo
contaminação, sendo 8 UFC/25 g na matriz leite em pó e 1 Carne 7 Positivo
UFC/25 g na matriz carne. Foram pesados 25 g de cada amostra Carne 8 Positivo
em 225 mL de água peptonada tamponada (APT), incubadas a Carne 9 Negativo
37ºC±1ºC por 18±2 h e seguiu-se o protocolo de análise de Carne 10 Negativo
acordo com cada método. Pela ISO 6579 as amostras envolvem Controle da matriz Negativo
S. Abaetetuba Positivo
etapas de enriquecimento não seletivo, seguidas de
enriquecimento seletivo e do isolamento em meios sólidos e
provas bioquímicas para confirmação. A metodologia VIDAS
utiliza o princípio ELFA, que combina o método ELISA com uma
leitura final em fluorescência. O método 3M MDS emprega a
amplificação isotérmica do DNA associada à detecção por
bioluminescência. Os resultados positivos dos métodos
alternativos foram confirmados pelo método ISO 6579.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
As matrizes leite e carne não apresentaram interferência na
metodologia 3M MDS. Isso revela que a enzima polimerase não
sofreu inibição na etapa da amplificação, nem extensão
Figura 2. . Run report obtido com as amostras de carne, com nível de inóculo de 1 UFC/25 g de
inespecífica. Todas as 10 amostras da matriz leite inoculados com Salmonella
8 UFC/25 g de S. Abaetetuba e mantidas por 18-24 h a 37°C
foram detectadas pelo método 3M MDS (Tabela 1), bem como CONCLUSÃO
VIDAS e ISO. Baseado nos resultados obtidos, pode-se concluir que:
Tabela 1. Resultados obtidos da matriz leite, com nível de inóculo de 8 UFC/25 g de Salmonella,
empregando a metodologia 3M MDS. -O método alternativo 3M MDS é capaz de detectar populações com
Identificação da Amostra Resultado níveis de até 1 UFC/25 g;
Leite 1 Positivo -O método alternativo 3M MDS obteve resultados similares quando
Leite 2 Positivo
comparado ao Vidas e ISO 6579, com ligeira diminuição na sua
Leite 3 Positivo
Leite 4 Positivo
sensibilidade.
Leite 5 Positivo
Leite 6 Positivo
REFERÊNCIAS
Leite 7 Positivo ISO 6579 – Horizontal method for detection of Salmonella (2002)
Leite 8 Positivo Food Safety – Disponível em: <http://foodsafetybrazil.com/>
Leite 9 Positivo WHO – World Health Organization. Salmonella. Disponível em:
Leite 10 Positivo <http://www.who.int/topics/salmonella/en/>
Controle da matriz Negativo
S. Abaetetuba Positivo