Escola Secundria do Monte de Caparica CPTAL-IV

A Atividade Enzimtica

Aluna : Luana Almeida Aires N 10 11G Avaliao:__________________ Lab 202 Data da realizao : 27/10/11 e 03/11/11 Influncia do pH na Atividade Enzimtica Influncia da temperatura na Atividade Enzimtica

Contedo
Objetivo ......................................................................................................................................... 3 Introduo terica......................................................................................................................... 3 Materiais/ Reagentes............................................................................................................... 4 Procedimento Experimental .................................................................................................... 5 Observaes/ Registo de Resultados ................................................................................... 5 Discusso..................................................................................................................................... 7 Concluso ..................................................................................................................................... 8 Bibliografia ................................................................................................................................. 8

Objetivo
O Objetivo desta atividade experimental estudar alguns fatores que influenciam a atividade enzimtica,nomeadamente o pH e a temperatura.

Introduo terica
As Enzimas As enzimas so biocatalizadores, ou seja, so molculas, na sua maioria protenas que tm a capacidade de acelerar uma reao, sem que nela sejam consumidas. A designao de biocatalizador advm do fato de serem compostos orgnicos presentes no organismo (bio-) e como j foi referido anteriormente, por aumentarem a velocidade das reaes(catalisador). Ao atuarem como catalisadores diminuem a energia necessria para desencadear uma reao. S deste modo possvel acelerar a velocidade da reao tornando assim permissvel a ocorrncia de um maior nmero de reaes num determinado espao de tempo. Fatores que condicionam a atividade enzimtica Existem diversos fatores que condicionam a atividade enzimtica entre os quais destacamos: Temperatura pH Concentrao do substrato Concentrao da enzima Temperatura A temperatura exerce influncia sobre a atividade enzimtica na medida em que condicionamos ligaes intramoleculares da enzima: Quando a enzima submetida a uma temperatura elevada as ligaes qumicas rompem- se conduzindo a uma alterao da conformao da enzima e, consequentemente, a uma alterao do cento ativo. A enzima sofre ento desnaturao , ao que corresponde uma perda de atividade biolgica permanente (processo irreversvel). As temperaturas baixas no constituem um processo irreversvel mas sim reversvel uma vez que apenas causam a inativao das enzimas. Aquando do aumento de temperatura e como as enzimas no so destrudas a atividade das mesmas restabelecida.

pH O pH interfere na atividade enzimtica uma vez que altera distribuio de cargas eltricas da enzima influenciando a conformao do centro ativo e, consequentemente, a sua interao com o substrato. As enzimas possuem um pH ptimo acima ou abaixo dos valores para os quais a atividade enzimtica diminui e acaba por cessar.

Concentrao do substrato
O aumento da concentrao do substrato aumenta a atividade enzimtica o que pressupe um aumento da velocidade da reao, desde que haja enzima disponvel h qual o substrato se ir ligar. Quando deixa de haver enzima disponvel ( saturao da enzima) a velocidade da reao no aumenta, mantm-se constante.

Concentrao da enzima
Com o aumento da concentrao da enzima d-se, consequentemente, o aumento da velocidade da reao desde que haja substrato disponvel.

Materiais/ Reagentes Materiais 7 tubos de ensaio suporte para tubos de ensaio Pipeta 2ml Etiquetas Faca de cozinha Papel indicador de pH Papel de limpeza Batata crua Cristalizador Vidro de relgio Placa de aquecimento Gobel Vareta de vidro pompete Reagentes HCl 0,1 mol/L (cido clordrico) NaOH 0,1 mol/L ( Hidrxido de sdio) H2O2 (perxido de hidrognio -gua oxigenada) gua morna

Procedimento Experimental

Parte I - Temperatura 1. Etiquetar os tubos de ensaio (1,2,3 e 4) 2. Adicionar aos tubos de ensaio 1,2,3 e 4 2ml de H 2O2 3. Adicionar ao tubo 2, dois cubos de batata crua 4. Adicionar ao tubo 3, dois cubos de batata cozida 5. Adicionar ao tubo 4 dois cubos de batata congelada 6. Aguardar cerca de 10 minutos. Observar e registrar os resultados Parte II - pH 1. Etiquetar os tubos de ensaio (5,6 e 7) 2. Adicionar aos tubos de ensaio 5,6 e 7 2 ml de H2O2 3. Adicionar ao tubo 5 dois cubos de batata crua 4. Adicionar ao tubo 6, 2 a 3 gotas de HCl + batata crua 5. Adicionar ao tubo 7, 2 a 3 gotas de NaOH + batata crua 6. Determinar o pH das solues dos tubos 6 e 7 utilizando o papel indicador de pH 7. Observar e registrar os resultados

Observaes/ Registo de Resultados

Tubos 1 2 3 4

Contedo H2O2 H2O2 + 2 cubos de batata crua H2O2 + 2 cubos de batata cozida H2O2 + 2 cubos de batata congelada H2O2 + 2 cubos de batata crua H2O2 + HCl + batata crua H2O2 + NaOH + batata crua

Observaes No se verifica alteraes (tubo de controle) Verifica-se reao muito intensa Verifica-se reao mas com pouca intensidade A reao demorou lenta,mas com o aumento da temperatura comea a haver mais reao e podemos ver uma espuma a formar-se Reao muito intensa ( tubo de controle) Reao pouca intensa; formou pouca espuma Verifica-se reao com uma maior intensidade

5 6 7

pH HCl = 1 NaOH =9 H2O2 = 6

Imagens dos resultados

Observaes: Por falta de dados,foram colocadas algumas imagens de uma experincia com a mesma finalidade que esta, mas utilizando fgado. Os resultados obtidos e observados foram os mesmos que obtivemos utilizando a batata. Os operadores que obtiveram estes resultados foram os alunos da turma 12B da Escola Secundria de Bocage, no mbito da disciplina de Biologia.

Ilustrao 2 tubo 2 H2O2 + batata crua

Ilustrao 1 tubo 3 H2O2 + batata esmagada

1 tubo de ensaio- tubo de controle

2 tubo de ensaio - Fgado esmagado (para verificar se a catalase tem atividade extra celular) + H2O2
3 tubo de ensaio- Fgado cozido + H2O2 4 tubo de ensaio - fgado congelado+ H2O2

Ilustrao 3 tubo 7 H2O2 + NaOH + Fgado(meio basico) / tubo 6 H2O2+ HCl+ figado (meio acido)

Discusso

Na primeira parte da atividade experimental que realizamos para testar a ao da temperatura no meio na atividade enzimtica usamos trs tubos de ensaio , numerados 1,2 e 3. Utilizamos o tubo 1 como tubo de controle e como j era de esperar no houve qualquer reao porque no havia enzimas, o que era impossvel ocorrer qualquer reao. No tubo 2 adicionamos H2O2 ( gua oxigenada) com batata crua e podemos verificar facilmente a reao. A reao mostrou a atuao das enzimas presentes na batata crua. O meio onde esta reao ocorreu neutro, o que se pode concluir que em meios com pH neutro tm melhor condies para a atuao da enzima catalase , bem como a temperatura ambiente que a batata se encontra. No tubo 3(H2O2 +batata cozida) tambm se verificou reao, mas com uma intensidade menor, devido ao cozimento das batatas, o que inibe a ao das enzimas presentes, por terem ficado desnaturadas devido ao calor, sendo assim as enzimas ficam inativas. No tubo 4(H2O2 + batata congelada) a reao lenta. o motivo pelo qual a reao demorou a desenvolver foi o fato da batata estar congelada o que vai inibir a ao das enzimas, a medida que a temperatura vai aumentando podemos ver a reao a formar-se, atravs da espuma que vai aparecendo. Podemos concluir que as enzimas ficam inativas a baixas temperaturas mas pode voltar a estar ativas quando esta aumenta. um processo reversvel. No tubo 5 (H2O2 + batata crua) foi o tubo de controle na atividade experimental do pH, aconteceu uma reao muito intensa, esta reao deve-se ao fato de ter ocorrido em um meio neutro onde a enzima atua melhor. No tubo 6 ( HCl + batata crua e H2O2) houve pouca reao. Podemos assim verificar que o meio cido no apresenta boas condies para a atuao das enzimas. No tubo 7 (H2O2 + NaOH + batata crua) houve uma reao bastante intensa, porque adicionamos o NaOH, a reao assim ocorreu em um meio bsico, onde a enzima atua melhor.

Concluso

Nesta atividade laboratorial, podemos concluir que dois fatores influnciam a atividade enzimtica : a temperatura e o pH. Na atividade em que testamos a influncia da temperatura sobre a atividade enzimtica pude concluir que as temperaturas elevadas e as temperaturas baixas influenciam a atividade das enzimas como a catalase. Quando as enzimas esto sujeitas a temperaturas muito baixas estas ficam inativas, podendo assim serem ativas novamente com o aumento da temperatura. Quando as enzimas foram sujeitas a altas temperaturas podemos concluir que estas no podiam ser ativas novamente pois sofreram uma desnaturalizao por causa do calor. O pH tambm influncia a atuao das enzimas sobre o substrato. Um pH muito baixo, que o caso do HCl, e um pH muito alto que o caso do NaOH que utilizamos, inibem a atuao da enzima, pois para que pudesse haver uma maior atuao das enzimas era necessrio terem um pH ptimo , que seria mais prximo do pH neutro. Por isso houve uma reao mais intensa quando adicionamos NaOH batata crua do que quando adicionamos HCl, pois o NaOH aproximava-se mais do pH ptimo.

Bibliografia

http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/enzimas.htm http://www.google.pt/#sclient=psy-ab&hl=ptPT&source=hp&q=atividade+enzimatica+fundamento+teorico&pbx=1&oq=atividade+enzimatic a+fundamento+teorico&aq=f&aqi=&aql=&gs_sm=e&gs_upl=1415l13514l0l14341l40l36l0l1l1l2l 1226l13318l3.9.4.6.4.5.3.1l36l0&bav=on.2,or.r_gc.r_pw.,cf.osb&fp=8f59be313e19da1e&biw= 1366&bih=548 http://docs.google.com/viewer?a=v&q=cache:5NUQ3fqgO0oJ:www.exames.org/index.php% 3Foption%3Dcom_docman%26task%3Ddoc_download%26gid%3D204%26Itemid%3D45+at ividade+enzimatica+ph+e+temperatura&hl=ptPT&gl=pt&pid=bl&srcid=ADGEEShhJ1UkzWWKOiPuLXLLJe8czpp8nnRXJ7QTIQkd6DvGU CpjDgEeRxpmb8gcJv0UwaezJrO834x7CniFbcvAjgQ_tDcidVCm__Q0m1ejepxSNqjTnQWjqAQ8RTO53XJrfgkd25&sig=AHIEtbRtYwRNK7PMKPI4_DB_FwNt_VwQrg http://esbocage12b.blogspot.com/2011/03/actividade-laboratorial-factores-que.html