TNA 5741 – Efeito Biológico das radiações

Efeito das Radiações Ionizantes em

Macromoléculas- Ácidos Nucleicos

Daniel Perez Vieira – Lab. Radiobiologia- CB

Jun/2020
1 – Histórico
2 – Composição
3 – Ação das radiações ionizantes
4 – Reparo
1 - Histórico

1868 – Isolamento de complexos DNA-Proteínas

-Friedrich Miescher

-Formação de um precipitado após lavagem (Na2SO4) de bandagens

com pus (posteriormente com esperma de salmão)

Miescher havia descoberto

que a nucleína era rica em
fósforo

Dev Biol. 2005 Feb 15;278(2):274-88.

1 - Histórico

1944 – DNA como portador de informação genética

-Avery, MacLeod e McCarty

-Experimentos com transferência de virulência entre cepas de S.

pneumoniae
1 - Histórico

1950 – Proporção entre as bases

-Erwin Chargaff

A/T=C/G=1
1 - Histórico

1953 – Watson & Crick & Wilkins... e Franklin & Gosling

Raymond Gosling fez a

famosa “Foto 51” sob a
orientação de Rosalind
Franklin
1 - Histórico

1953 – Watson & Crick & Wilkins... e Franklin & Gosling

Watson e Crick mostraram a foto a Wilkins. Os três

ganharam o Nobel em 1962
Nature Education 1(1):100
2 - Composição

Pentoses
2 - Composição

Pentoses – Posição dos Carbonos 5

4 1

3 2
2 - Composição

Bases Pirimídicas

Timina
Citosina

Pirimidina

Uracila
2 - Composição

Bases Púricas

Adenina

Purina

Guanina
2 - Composição

Nucleotídeo
A G

Bases
Nitrogenadas

Fosfato

(Desoxi)ribose
T C
2 - Composição
5
Cadeia Polimérica

3 5

3
 T
A

C
G
2 - Composição

RNA

-Fita Simples
-Substituição de TIMINA por URACILA
-Carrega informação do DNA para o
ribossomo
-10-100 pb (miRNA’s, shRNA’s, etc) até
2x105 (mRNA)

TutorVista -- http://www.tutorvista.com/biology/types-of-dna-and-rna
2 - Composição

DNA

-Repositório de informação genética

-Fita Dupla
-Poucas centenas de pb até 108 bases
-Estrutura secundária (pontes H-H entre
as bases)
-Fosfatos expostos
-Bases (apolares) interior
- 6x106 bases - 3µm
-DNA de uma célula: 3mm

Nano Lett. 2012 Jul 11;12(7):3846-50.

3 – Ação das Radiações ionizantes

IONIZAÇÃO – EXCITAÇÃO–
Remoção completa de Elevação do elétron a
um ou mais elétrons nível/subnível mais
energético
Sistemas biológicos: H2O

H2O H2O. + e-

H2O. + H2O H3O+OH.

e-+ H2O e-aquoso

3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA

-Remoção de pontes de H
-Quebras em fitas simples
-Quebras em fitas duplas
-Cross-linking
-Remoção e/ou dano de bases nitrogenadas
-Desestabilização do “esqueleto” de pentoses

-Frequência e severidade das quebras é sensível à presença

ou ausência de oxigênio
3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA
- Energia da Radiação

2nm

100keV/µm 200keV/µm

100keV/µm é o valor ótimo de LET para causar quebras-duplas nas fitas

de DNA. Valores menores transferem menos energia; valores maiores
podem transferir energia a outras áreas menos relevantes da cadeia
3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA – “Quebra Dupla”

DNA é transpassado por uma

partícula α (600 eV/ quebra dupla)

Foco de ionizações ocorre pela

radiação ionizante (850 eV/quebra
dupla)

Duas quebras simples justapostas

ao acaso

1 quebra dupla ocorre para cada 70 quebras simples.

3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA
- Dependência da presença de O2

O2 SUFICIENTE

Cross-linking Peroxidação
3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA – Tipos de lesões

remoção de purina por ácido ou calor, remoção de bases alteradas por enzimas
Base Faltosa

radiação ionizante, agentes alquilantes

Base Alterada

mutações que afetam proofreading da atividade 3’5’ exonuclease de bases incorretamente

Base Incorreta incorporadas

agentes intercalantes que causam adição ou perda de nucleotídeos durante a recombinação ou

Alça devido a deleção ou
replicação
inserção de nucleotídeo

dímeros de ciclobutilas (normalmente timinas) resultantes de radiação UV

Dímeros de pirimidinas

ligação fosfodiéster por radiação ou agentes químicos (bleomicina)

Quebra de fitas

Fitas ligadas por

ligação covalente por agentes alquilantes bifuncionais (mitomicina)
ligações covalentes
Fragmentos 3’ de
quebra da estrutura da deoxiribose por radicais livres levando à quebra de fitas
desoxirribose
3 – Ação das Radiações ionizantes

DNA – Quebras duplas?

LMDS (Localized multiple damaged sites)

Mol Biosyst. 2008 Jan;4(1):30-5.

4 – Reparo

Excisão de nucleotídeos

Annu. Rev. Biochem. 2004. 73:39–85

4 – Reparo

Fitas

Annu. Rev. Biochem. 2004. 73:39–85

4 – Reparo

Fitas – Recombinação não-homóloga

Nat Struct Mol Biol. 2015 Nov;22(11):859-66.

4 – Reparo

Fitas – Recombinação homóloga

Nat Struct Mol Biol. 2015 Nov;22(11):859-66.

4 – Reparo

Doenças ligadas a falta de reparo de DNA

Doença Sensibilidade Suscetibilidade Sintomas

Ataxia
Radiação γ Linfoma Ataxia, dilatação de vasos na pele e olhos, aberrações cromossômicas
telangietásica
Síndrome de Agentes Carcinomas,
Fotosensibilidade, telangiectase facial, alterações cromossômicas
Bloom alquilantes leucemias, linfomas
Síndrome de Nanismo, atrofia da retina, fotosensibilidade, progeria, surdez,
Radiação UV
Cockayne trissomia 10
Anemia Agentes
Leucemias Pancitopenia hipoplástica, anomalias congênitas
Fanconi reticulantes
Radiação UV,
Xeroderma Carcinoma de pele e
mutagênicos Fotosensibilidade de olhos e pele, queratose
pigmentoso melanomas
químicos
Muito Obrigado

Daniel Perez Vieira, Ph.D.

Pesquisador - Laboratório de Radiobiologia
CEBIO - Centro de Biotecnologia
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