Prova 1 2021 2

Bas. Mol. Farmacol. Tox.

Farmacol. Bás. Aplic.
Aluno(a):
DRE:

Questão 1 (2,5): A tabela abaixo foi obtida e adaptada do trabalho científico, Eur J Pharm
Sci. 2014 Aug 1;59:94-103. Neste trabalho, os autores avaliam os efeitos da probenecida
(probenecid, 1500 mg por paciente) sobre a concentração plasmática da benzilpenicilina.
Considerando os parâmetros avaliados:
1) AUC0-8 – Área sob a curva da concentração plasmática da benzilpenicilina de 0 a
8 horas após a administração da benzilpenicilina (nM x h)
2) A taxa de depuração renal da benzilpenicilina em relação à concentração
plasmática – Clrenal,p

Obs: Os asteriscos indicam diferenças estatisticamente significativas do grupo tratado

com probenecida (Phase 4), em relação ao grupo controle (Phase 1).
Nas figuras abaixo, os autores avaliam B) a captação por transporte ativo da
benzilpenicilina (PCG) em células transfectadas com o gene que codifica o transportador
de ácidos orgânicos OAT3, uma proteína transportadora expressa no epitélio das células
tubulares renais. Em D) os autores avaliam o percentual de captação de benzilpenicilina,
em células expressando OAT3, na presença de diferentes concentrações de probenecida
(probenecid), em relação à captação controle na ausência de probenecida (100%).
Na sua opinião, existe alguma interação farmacológica da probenecida, com relação à
benzilpenicilina. Explique sua resposta, com base em sua interpretação dos resultados,
proponha um mecanismo envolvido.
Questão 2 (2,5): As figuras abaixo foram obtidas do trabalho PNAS (1987) 84: 5487-91.
Na figura em questão, o potencial interno de membrana foi avaliado em neurônios do
plexo submucoso, na presença de DPDPE, um agonista de receptores opioides Delta.
Considerando que o potencial interno da membrana neuronal em repouso foi de cerca de
-53 mV, como você definiria o efeito da ativação dos receptores opioides Delta no
potencial interno da membrana neuronal? Sabendo que a molécula GTPγS é um análogo
estável de GTP que não sofre hidrólise do grupo fosfato terminal, explique o resultado da
figura B. Atenção ao fato de que na figura B, o eletrodo que atravessa a membrana contém
GTPγS!!! Um colaborador seu te informou que já observou que os receptores opioides
Delta quando ativados, aumentam a condutividade de canais catiônicos. Sabendo disso,
especule que corrente iônica estaria envolvida nos resultados experimentais obtidos?
Questão 3 (2,5): A figura abaixo representa o percentual da resposta da isoprenalina,
sobre a atividade de receptores beta-adrenérgicos, na ausência (linha mais à esquerda) ou
presença de diferentes concentrações de propranolol (curvas à direita). Explique os efeitos
do propranolol sobre a resposta induzida pela isoprenalina, sabendo que o propranolol e
isoprenalina compartilham o mesmo sítio de ligação nas células em questão. Como você
definiria a atuação da isoprenalina sobre os receptores beta-adrenérgicos.

Questão 4 (2,5): As figuras abaixo foram obtidas do artigo Br J Pharmacol. 1998

Jun;124(4):619-22. doi: 10.1038/sj.bjp.0701915. Na figura A), os autores expressaram o
receptor CB1 em células CHO e avaliaram a ligação específica do ligante CP55,940
radioativo marcado com 3H, em membranas das células transfectadas, na ausência ou
presença de WIN55,212-2, Cannabinol ou SR14716A. Em B), os autores incubam as
mesmas células expressando CB1 com os referidos fármacos e avaliam a incorporação de
GTPγS radioativamente marcado com 35
S, nas membranas das células transfectadas na
presença de concentrações crescentes dos diferentes fármacos. Discuta os resultados
apresentados. Como você definiria os diferentes fármacos em termos da eficácia sobre o
receptor CB1? Qual a via de transdução de sinais mediada pelo receptor CB1?
 B)
A)

3
Ligação de [H ]CP55,940
% de incorporação de GTPγS, mudança
em relação ao nível basal

Concentração do ligante

Concentração do ligante
(log da concentração molar)
Questão 1 (2,5): De acordo com a tabela, a área sob a curva da concentração
plasmática da benzilpenicilina ao longo do tempo aumenta na presença de
probenecida, indicando que a probenecida reduz a depuração global da
benzilpenicilina (1,0). A probenecida reduz a taxa de depuração renal, sugerindo
que o mecanismo subjacente ao efeito da probenecida envolve a inibição da excreção
renal da benzilpenicilina (1,0). Considerando que a benzilpenicilina é captada por
um mecanismo dependente do transportador de ácidos orgânicos OAT3, figura B) e
que a probenecida inibe a captação da benzilpenicilina, figura D), podemos sugerir
um mecanismo proposto para a ação da probenecida que envolve a inibição do
transporte ativo renal mediado por OAT3 que contribui para a excreção renal da
benzilpenicilina (0,5).
Questão 2 (2,5): A ativação dos receptores opioides delta promove a
hiperpolarização da membrana neuronal, uma vez que o tratamento com um
análogo estável do GTP prolonga a hiperpolarização neuronal, isto indica que o
receptor opioide delta atua por meio da ativação de um receptor acoplado a proteína
G, pois o análogo estável por não ser hidrolisado permanece ligado à proteína G no
estado ativo, sustentando a sinalização mediada pelo receptor delta. (1,25). O
receptor opioide delta promove a ativação de correntes de saída de potássio, o que
promove a hiperpolarização neuronal por meio da perda de potássio e aumento do
potencial interno negativo da membrana interna (1,25).
Questão 3 (2,5): O propranolol exerce um antagonismo competitivo reversível, pois
aumentos na concentração de isoprenalina são capazes de reestabelecer a resposta
de seus receptores, sem afetar a resposta máxima, isso é demonstrado pela ausência
de redução da inclinação das curvas na presença do propranolol e deslocamento à
direita da curva de resposta em função da concentração da isoprenalina na presença
de concentrações crescentes do propranolol (2,5).
Questão 4 (2,5): Todos os fármacos demonstram ligação aos receptores CB1, a
ligação de todos estes fármacos se dá em um sítio de ligação similar de modo
competitivo (provavelmente o sítio ortostérico), uma vez que todos os compostos
reduzem a ligação do CP55,940, um agonista primário dos receptores CB1 (0,5). De
acordo com a figura B, CP55,940, WIN55,212-2 são agonistas plenos dos receptores
CB1 (0,5), o canabinol é um antagonista competitivo neutro (0,5) e o SR141716A
(0,5) é um agonista inverso. Isso pode ser deduzido pelo fato dos fármacos com ação
agonista promoverem incorporação do GTPgamaS, um análogo de GTP, ao passo
que o agonista inverso SR141716A reduz a ativação constitutiva, e portanto,
incorporação de GTPgamaS pelos receptores CB1. O receptor CB1 é um receptor
acoplado a proteínas G e deste modo, quando ativado, promove a troca de GDP na
subunidade alfa por GTPgamaS (0,5).