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    Carlos Aragão
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    O documento define o que é uma sonda de DNA e explica a técnica de hibridização in situ. A técnica envolve pegar o DNA isolado e marcado (sonda), desnaturá-lo, permitir a renaturação e marcar o alvo. A introdução de corantes fluorescentes na hibridização in situ é chamada de FISH. A marcação direta da sonda usa nucleotídeos ligados a corantes fluorescentes, enquanto a indireta usa haptenos como biotina ou digoxigenina.

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    O documento define o que é uma sonda de DNA e explica a técnica de hibridização in situ. A técnica envolve pegar o DNA isolado e marcado (sonda), desnaturá-lo, permitir a renaturação e marcar o alvo. A introdução de corantes fluorescentes na hibridização in situ é chamada de FISH. A marcação direta da sonda usa nucleotídeos ligados a corantes fluorescentes, enquanto a indireta usa haptenos como biotina ou digoxigenina.

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    CÉLULAS E MOLÉCULAS

    1. Definir o que é uma sonda.


    R: É qualquer sequência de DNA que consiga isolar, amplificar e marcar.
    2. Explicar a técnica de hibridização in situ.
    R: Pegar o DNA que foi isolado, amplificou e marcou (sonda) → desnatura (abriu) →
    renatura → marca (corar).
    3. Dizer o significado de FISH.
    R: Introdução de corantes fluorescentes na hibridização in situ.
    4. Diferencie marcação direta e indireta da sonda.
    R: Marcação direta usa amplificação de nucleotídeos ligados ao corante fluorescente
    (dUTP) na posição 5 do anel de pirimidina. Marcação indireta usa amplificação de
    nucleotídeos ligados ao hapteno (bioteno ou digoxigenina).
    5. Dizer quais são os dois haptenos mais utilizados a marcação indireta da sonda e
    os respectivos anticorpos utilizados na detecção do sinal.
    R:

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