UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA

CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR

LABORATÓRIO DE BQI 470

BIOQUÍMICA DE CARBOIDRATOS

Relatório da aula prática Nº 01

EXTRAÇÃO DE CARBOIDRATOS DE TECIDO VEGETAL

Estudantes: Mariane Stér da Silva Teixeira Matrícula: 95639

Camila Pereira Mendes Matrícula: 89343

Professora: Marisa Diaz

Turma prática:
P4
Aulas: Terças (16:00-18:00)

VIÇOSA -

MG 2021
 1. Introdução e Objetivos

Os carboidratos são poli-hidroxialdeídos ou poli-hidroxicetonas, no geral tem a

fórmula empírica ( CH2O)n, alguns também contém nitrogênio, fósforo ou enxofre. Existem
três classes principais de carboidratos: monossacarídeos, dissacarídeos e polissacarídeos. São
distinguidos de acordo com a quantidade de monossacarídeos em suas cadeias. E os
monossacarídeos são sólidos cristalinos e incolores solúveis em água e insolúveis em
solventes apolares.
O monossacarídeo mais abundante na natureza é a D-glicose, o oligossacarídeo mais
abundante são os dissacarídeos como a sacarose, e o polissacarídeo mais abundante são amido
e celulose.
O amido é um polissacarídeo formado por amilose e amilopectina, é encontrado em
sementes, raízes, tubérculos, bulbos e em alguma porcentagem nos caules e nas folhas dos
vegetais. Encontra-se em grandes quantidades na batata, pão, arroz, macarrão e cereais. Na
digestão o amido é decomposto, por reações de hidrólise, em carboidratos menores, como a
glicose, que é a fonte primária de energia para o corpo. Essa hidrólise é efetuada pelas
enzimas amilases existentes na saliva e no suco pancreático. A maior parte da nossa
necessidade de carboidratos é fornecida por amidos.
Pectinas são polímeros do ácido galacturônico, suas moléculas compõem a parede
celular de vegetais produtores de sementes. É um tipo de fibra alimentar muito importante
para a digestão, uma vez que facilita a síntese de proteínas e lipídios e regula a absorção de
carboidratos pelo organismo.
A prática proposta pela apostila de BQI 470 PHT, teve como objetivo a extração
carboidratos a partir de amostras vegetais. Foram feitas a extração de carboidratos totais com
H2O da maçã, a extração de amido de batatas, e extração de pectina da casca de laranja.
Além disso, foram também apresentadas as vidrarias mais comumente usadas no
laboratório assim como suas funções, como por exemplo as pipetas volumétricas (destinadas à
transferências de volumes); provetas (usados para medição de volume); béquer (usado para
conter volumes); erlenmeyer (usado para conter volumes para serem titulados); funil de vidro
e Buchner (usados para filtração ou transferência de volume); balão de fundo redondo, (usado
para preparar soluções de concentração definida); e funil de separação (usado para separar
soluções imiscíveis). Também foram disponibilizadas videoaulas sobre preparo de soluções,
uso correto de micropipetas, e cuidados na utilização de banho-maria e balança analítica.
2. Materiais e Métodos

2.1. Equipamentos e Reagentes

2.1.1. Para a extração de carboidratos com H2O

● Béquer
● Maçã
● Faca
● Água destilada
● Bico de Bunsen
● Funil de vidro
● Pipeta
● Tubos de ensaio
● Reagente de Molisch
● Ácido sulfúrico concentrado

2.1.2. Para a extração do amido

● Batata
● Liquidificador
● Faca
● Água destilada
● Funil de vidro
● Béquer

2.1.3. Para a extração de pectina

● Laranja
● Faca
● Balança analítica
● Erlenmeyer
● Ácido cítrico
● Proveta
● Condensador de refluxo
● Banho maria
● Centrífuga
● Álcool etílico
 3. Resultados e Discussão

3.1. Para a extração de carboidratos com H2O

Como são ricos em grupamentos hidroxila (-OH), os monossacarídeos podem ser

desidratados por presença de ácidos fortes concentrados como por exemplo o ácido sulfúrico.
Já nos polissacarídeos o ácido rompe as ligações glicosídicas, fornecendo e desidratando seus
monossacarídeos levando à produção de Furfural (para quando o monossacarídeo for uma
pentose) e hidroximetilfurfural (para hexoses). Ambas as substâncias resultantes são incolores
e por isso é feita a adição do reagente de Molisch (alfa-naftol) que permite o aparecimento de
um anel de coloração lilás quando o ácido é adicionado à amostra em resultados positivos
para a presença de carboidratos.
Para a análise da amostra preparada a partir da maçã, foram preparados também , dois
tubos de ensaio para controles positivo e negativo da reação. Assim como esperado, ao
adicionar o reagente de Molisch e o ácido sulfúrico aos controles, ocorreu a formação do anel
lilás para o controle positivo, e para o controle negativo não. Para a amostra, na primeira
reação não foi possível observar o anel por erro de pipetagem do ácido, e em uma segunda
tentativa, com a pipetagem correta e adição lenta do ácido foi possível observar a formação do
halo lilás indicando a presença de carboidrato na amostra.

3.2. Para a extração do amido

Segundo a literatura, a batata é um tubérculo que contém elevado teor de vitamina C,

proteínas e carboidratos, apresentando em média 16% de amido.
Os grânulos do amido são compostos pela presença de amilose e amilopectina, e
quando em solução, a moléculas de amilose se associam e formam precipitados. Para a
extração, a batata foi batida com água e filtrada para que ocorresse a precipitação do amido
em solução. O amido precipitado pode ser centrifugado e lavado até pH 6,0-7,0, os
sobrenadantes descartados, e então o amido (seco) obtido pela secagem em estufa.

3.3. Para a extração de pectina

A pectina é um polissacarídeo estrutural que tem como função proporcionar firmeza,

adesão entre as células e pela mecânica da parede celular de vegetais. Na laranja o mesocarpo
(albedo) consiste na parte branca sendo que essa a região é a com a maior parte da pectina
contida no bagaço. A extração de pectina a partir do bagaço de laranja foi realizada levando a
casca da laranja e ácido cítrico ao refluxo e levando o extrato filtrado e resfriado para a
centrifugação onde o pellet foi descartado e ao sobrenadante foi adicionado etanol gelado.
Nesse momento observou-se a formação de duas fases, sendo que a pectina se encontra
presente na fase mais transparente. Essa pectina poderia em seguida ser precipitada,
centrifugada e secada em estufa.

4. Conclusão

Os carboidratos estão presentes em nosso dia a dia, e o reconhecimento da presença de

carboidratos numa amostra pode ser feito facilmente pelo teste de Molisch, onde através do
uso de um ácido forte e do reagente de de Molisch é possível descobrir se existe ou não a
presença de carboidratos na amostra analisada. A análise prática mostrou como essa reação
ocorre e o resultado obtido foi positivo para a presença de carboidratos na maçã.
Utilizando tubérculos como por exemplo a batata, é possível realizar a extração do
amido de forma simples e com poucos materiais. A extração do amido realizada
experimentalmente foi bem sucedida. Na prática experimental foi possível também, através do
uso da laranja, a realizar a extração da pectina que encontra-se na parte branca da casca
(albedo).

5. Exercício (da apostila): Dizer se existem outras técnicas de extração de

carboidratos de amostras vegetais.
R.: Para extração de um componente da amostra, muitas vezes é necessária uma
preparação prévia da mesma. Os carboidratos de amostras vegetais podem ser obtidos por
difusão em água (destilada) quente, por maceração, por adição de etanol ou ácido, entre
outros.
Existem diversos métodos que podem ser utilizados para realizar a extração de
oligossacarídeos por exemplo, e ainda diversas técnicas estão sendo desenvolvidas e
implementadas, como: a extração assistida por ultrassom, extração assistida por micro-ondas e
a hidrólise enzimática. Na extração de compostos orgânicos, o tratamento hidrotérmico a alta
pressão produz uma eficiente separação de carboidratos, hemiceluloses e celuloses existentes
nas lignoceluloses das plantas. Pesquisas envolvendo ultrassom geram grandes impactos nas
indústrias de alimentos, como por exemplo ofertar novas tecnologias para extração e
modificação de amidos.
 6. Referências bibliográficas

CAMPOS, R. S. EXTRAÇÃO AQUOSA DE PECTINA A PARTIR DO BAGAÇO DA

LARANJA. Disponível em:
<https://cepein.femanet.com.br/BDigital/arqTccs/0911290990.pdf>. Acesso em 28 de
novembro de 2021.

FERREIRA, A. L. COMPARAÇÃO DE MÉTODOS FÍSICOS DE EXTRAÇÃO DE

CARBOIDRATOS DO FARELO DE ARROZ. Disponível em:
<http://repositorio.roca.utfpr.edu.br/jspui/bitstream/1/14350/1/Comparacaoextracaofareloarro
z.pdf >. Acesso em 29 de novembro de 2021.

LEHNINGER, T. M., NELSON, D. L. & COX, M. M. Princípios de Bioquímica. 6ª Edição,

2014. Ed. Artmed.

VERICIMO, A. S. OBTENÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DO AMIDO DE

BATATA-DOCE (Ipomoea batatas.L.) MODIFICADO POR FOSFATAÇÃO.
Disponível em: <https://cepein.femanet.com.br/BDigital/arqTccs/0711290442.pdf>.
Acesso em 28 de novembro de 2021.