Apêndice 3 Rotas Biossintéticas

de Hormônios

A pesar de suas estruturas químicas diversas, a maioria dos fitormô-

nios conhecidos deriva de três tipos principais de precursores me-
tabólicos: aminoácidos, compostos derivados de isoprenoides e lipídeos
(Figura A3.1). Os aminoácidos triptofano e metionina servem como precur-
sores do AIA (ácido 3-indolacético) e do etileno, respectivamente. A rota do
isoprenoide dá origem a cinco classes de fitormônios: citocininas, brassinos-
teroides, giberelinas, ácido abscísico e estrigolactonas. Finalmente, o ácido
jasmônico é sintetizado a partir de um precursor lipídico.
Os principais intermediários e as localizações subcelulares da maioria das
rotas biossintéticas já foram elucidados, embora novos detalhes continuem
a surgir. De interesse especial para os pesquisadores é como as rotas bios-
sintéticas de hormônios individuais têm intermediários em comum e onde a
síntese de um hormônio é regulada por outro hormônio. Essa regulação e
suas interações têm efeitos profundos sobre o desenvolvimento vegetal.
Aqui, são fornecidos alguns detalhes adicionais sobre as rotas biossin-
téticas além do que foi tratado no livro, para aqueles estudantes que dese-
jem aprofundar seus conhecimentos sobre a bioquímica de fitormônios. Para
alguns hormônios, como a auxina e o etileno, as rotas biossintéticas e sua
regulação são discutidas em maior profundidade do que no livro, enquanto,
para outros, como a giberelina, o ABA e o brassinolídeo, são apresentados
diagramas de versões mais completas das rotas.

Aminoácidos Rota do isoprenoide Lipídeos

Triptofano Metionina IPP Ácido α-linolênico

AIA Etileno Citocininas Brassinos-

Ácido jasmônico
teroides

Giberelinas

Ácido abscísico

Estrigolactonas

Figura A3.1 Três categorias de hormônios com base em seus precursores bios-
sintéticos.
A3-2 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

I. Hormônios derivados de aminoácidos tofano pela triptofano aminotransferase (TAA1, TAR). O

AIP é, então, convertido em AIA por YUCCA flavinas mo-
Auxinas noxigenase (Dai et al., 2013).
O ácido 3-indolacético (AIA) é estruturalmente relaciona- Em Arabidopsis e outros membros de Brassicaceae que
do ao aminoácido triptofano, e as plantas convertem este produzem indolglicosinolatos como compostos de defesa
em AIA por diversas rotas. A rota biossintética do tripto- (ver Capítulo 23 do livro), indol-3-acetaldoxima (IAOx) é
fano em plantas é mostrada na Figura A3.2. Muito do que sintetizado a partir do triptofano por enzimas citocromo
sabemos sobre a biossíntese do AIA vem de estudos com P450 (ver Figura A3.3). O IAOx é, então, convertido a in-
mutantes de Arabidopsis. dolglicosinolatos. Quando a rota indolglicosinolato é ge-
A rota do ácido indol-3-pirúvico (AIP) (Figura A3.3) neticamente interrompida, como em mutantes superroot, o
é a rota biossintética principal do AIA em plantas (Ljung, IAOx é convertido em indol-3-acetonitrila (IAN) por um
2013). Em Arabidopsis, o AIP é formado a partir do trip- processo de baixa afinidade desconhecido. Em resposta a
estresses bióticos, mirosinases hidrolisam açúcares con-
jugados de indolglicosinolatos para liberar IAN, que pode
ROTA BIOSSINTÉTICA DO TRIPTOFANO ser, então, convertido a AIA por nitrilases (ver Figura
Corismato A3.3). Alguma evidência de atividade similar foi observa-
Antranilato da em espécies fora de Brassicaceae, mas acredita-se que
sintase essa atividade não represente mais uma rota biossintética
Antranilato importante de AIA.
Antranilato- Em algumas bactérias que produzem AIA durante
-PR transferase suas interações com as raízes de plantas, indol-3-acetami-
5-Fosforribosilantranilato da (IAM) é produzido como um intermediário. Em Arabi-
PR-antranilato dopsis, milho, arroz e tabaco, foi mostrado que níveis bai-
isomerase xos de IAM estão presentes (Sugawara et al., 2009; Novák
1-(o-Carboxifenilamino)-1-
et al., 2012) e que hidrolases vegetais de IAM convertem
-desoxirribulose 5-P o IAM aplicado exogenamente a AIA. Entretanto, não há
IGP-sintase evidência de que essa seja uma rota biossintética impor-
tante de AIA.
Inibição por retroalimentação

OH
Uma rota de síntese de AIA independente de tripto-
fano, começando com o indol, foi parcialmente caracte-
–
CH2OPO32 rizada em várias espécies de plantas usando precursores
marcados com isótopos estáveis. IAN e AIP são interme-
N OH
H diários possíveis. Entretanto, os processos enzimáticos
Indol-3-glicerol-fosfato (IGP) envolvidos são desconhecidos e a relevância dessa rota
proposta para os processos normais de crescimento não
foi estabelecida.
Como descrito no Capítulo 15 do livro, o AIA pode ser
temporariamente inativado por conjugação a aminoácidos
ou catabolizado via conjugação com açúcares e oxidação
Serina +
pela dioxigenase para auxina (DAO) e outras oxigenases.
N
H
Etileno
Indol
Experimentos in vivo demonstraram que tecidos vegetais
convertem 1-[14C]-metionina em [14C]-etileno, e que o
etileno é derivado dos carbonos 3 e 4 da metionina (Fi-
gura A3.4). O grupo CH3 –S da metionina é reciclado via
COOH
ROTAS DE
ciclo de Yang no citosol. Sem essa reciclagem, a quanti-
SÍNTESE DE AIA dade de enxofre reduzido presente limitaria a metionina
DEPENDENTES disponível e a síntese de etileno. A S-adenosilmetionina
N NH2
DE TRIPTOFANO
H (AdoMet), que é sintetizada a partir da metionina e do
Triptofano
trifosfato de adenosina (ATP), é um intermediário na rota
biossintética do etileno, e o precursor imediato do etile-
Figura A3.2 A rota biossintética do triptofano fornece os precur-
sores para a biossíntese de AIA. Na maioria das plantas, a síntese do no é o ácido 1-aminociclopropano-1-carboxílico (ACC)
triptofano ocorre no cloroplasto. O precursor do ponto de ramifica- (Figura A3.4).
ção para a biossíntese de AIA independente de triptofano é o indol. O papel do ACC tornou-se evidente em experimen-
Acredita-se que o ácido indolpirúvico seja um intermediário da rota. tos em que plantas foram tratadas com [14C]-metionina.
 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-3

Figura A3.3 Rotas de bios- Rota biossintética primária de AIA Rota biossintética alternativa presente em
síntese de AIA dependentes de Arabidopsis e outras plantas produtoras
de indolglicosinolatos.
triptofano em Arabidopsis. As O
setas tracejadas indicam que N
nem o gene nem a atividade OH OH
da enzima foram identificados TRP IAOx
NH2
em Arabidopsis. TRP, triptofa- N N
H H
no; IAM, indol-3-acetamida;
SUR2
AIP, ácido indol-3-pirúvico;
TAA1, TAR SUR1
IAOx, indol-3-acetaldoxima;
IG, indol-3-metilglicosinolato; OH
IAM OSO3–
TRM, triptamina; IAN, indol-3- Rota
OH
-acetonitrila. (Segundo Nor- N de baixa
AIP
manly, 2010.) OH
afinidade
N AMI1 IG
H
N S-glicose
H
YUCCA

OH N

AIA O IAN
Nitrilase
N N
H H

Figura A3.4 Rota biossintética do etileno e o ciclo

de Yang. O aminoácido metionina é o precursor do
etileno. A etapa limitante da taxa na rota em geral é a
conversão de AdoMet em ACC, que é catalisada pela
Promove a síntese
enzima ACC-sintase. A última etapa na rota, a conver- de etileno:
são de ACC em etileno, requer oxigênio e é catalisada Amadurecimento de frutos
pela enzima ACC-oxidase. O grupo CH3 –S da metioni- Senescência de flores
na é reciclado via ciclo de Yang e, assim, conservado AIA
Lesões Promove a
para a síntese continuada. Além de ser convertido em COO–
Dano por frio síntese de
etileno, o ACC pode ser conjugado como N-malonil Estresse pela seca etileno:
HC NH3+
ACC. AAO, ácido amino-oxiacético; AVG, aminoetoxi Inundação Amadurecimento
vinilglicina. (Segundo McKeon et al., 1995.) CH2
Inibe a Inibe a
CH2 síntese de síntese
etileno: de etileno:
AdoMet- CH3 S+ AAO Co2+
NH3+ AVG
-sintetase Anaerobiose
CH2 Temp. >35°C
CH3 S CH2 CH2 CH COO– O
ATP PPi + Pi Adenina
Metionina (Met)
–
R CO COO
O O
H H
H
S-Adenosilme-
H2C NH3+
R C COO–
tionina ACC-sintase ACC-oxidase
CICLO DE YANG (AdoMet) C H2C CH2
+ –
NH3 H2C COO 1/2 O2 CO2
CH3 S CH2 Etileno
+
CH3 S CH2 CH2 CO COO– O Ácido 1-amino-ciclopropano- HCN
α-ceto-γ-metiltiobutírico Adenina 1-carboxílico (ACC) +
H2O
HCOO– O O Malonil-CoA
H H
2-HPO4–
5′-Metiltioadenosina

O2
CH3 S CH2 CH3 S CH2 Adenina CO CH2 COO–
OPO3H– OH
O O H2C NH+2
C

O O H2C COO–
O O
H H ATP H H
N-Malonil ACC
5′-Metiltior- ADP 5′-Metiltiorribose
ribose-1-P
A3-4 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios
Sob condições anaeróbicas, o etileno não foi produzido a
partir de [14C]-metionina, e [14C]-ACC acumulou-se no
tecido. Com a exposição ao oxigênio, no entanto, ocorreu
a produção de etileno. Na presença de oxigênio, o ACC
marcado foi rapidamente convertido em etileno por vários
tecidos vegetais, sugerindo que o ACC é o precursor ime-
diato do etileno em plantas superiores e que o oxigênio é
necessário para a conversão.
Em geral, quando ACC exógeno é fornecido a tecidos
vegetais, a produção de etileno aumenta substancialmen-
te. Essa observação indica que a síntese de ACC costuma
ser a etapa biossintética que limita a produção de etileno
em tecidos vegetais. Exceções incluem tecidos com altas
taxas de síntese de etileno, tais como nos frutos amadure-
cendo (ver a seguir).
A ACC-sintase (ACS), enzima que catalisa a conversão
de AdoMet em ACC (ver Figura A3.4), foi caracterizada em
muitos tipos de tecidos de várias plantas. A ACS é uma
enzima citosólica instável. Seus níveis são regulados por
fatores ambientais e internos, como lesões, estresse pela
seca, inundação e auxina. Uma vez que ACS está pre-
sente em quantidades muito baixas em tecidos vegetais
(0,0001% da proteína total em um tomate maduro) e é
muito instável, é difícil purificar essa enzima para análises
bioquímicas.
A ACS é um membro de uma subfamília de liases
carbono-enxofre codificadas por uma família multigênica
que é diferencialmente regulada por vários indutores da
biossíntese do etileno. No tomate, por exemplo, existem ao
menos dez genes para a ACS, dos quais diferentes subgru-
pos são induzidos por auxina, lesão e/ou amadurecimen-
to do fruto. O genoma de Arabidopsis contém nove genes
para ACS. Uma análise das proteínas purificadas codifica-
das por oito desses genes revelou uma diversidade de pro-
priedades cinéticas (p. ex., várias afinidades pelo substrato
AdoMet), sugerindo que essas isoformas podem ser oti-
mizadas para diferentes papéis em vários tecidos e tipos
de células (Yamagami et al., 2003). A estrutura cristalina
deduzida da ACS tanto da maçã como do tomate revela
uma proteína dimérica com sítios ativos compartilhados,
similar a aminotransferases (Capitani et al., 1999; Huai et
al., 2001).
A ACC-oxidase catalisa a última etapa da biossínte-
se do etileno: a conversão do ACC em etileno no citosol
(ver Figura A3.4). Em tecidos que exibem taxas elevadas
de produção de etileno, como os de frutos em amadu-
recimento, a atividade da ACC-oxidase pode ser a etapa
limitante da velocidade na biossíntese desse hormônio.
Assim como a ACS, a ACC-oxidase é codificada por uma
família de genes diferencialmente regulada. Por exemplo,
no amadurecimento de frutos do tomateiro e na senescên-
cia de flores de petúnia, os níveis de mRNA de um sub-
conjunto de genes da ACC-oxidase são bastante elevados.
Tanto isoformas solúveis como associadas a membranas
foram identificadas. A compartimentalização subcelular
diferenciada das isoformas de ACC-oxidase sugere que
as isoformas solúveis e associadas a membranas podem
ter substratos diferentes. Uma hipótese é de que as ACC-
-oxidases associadas a membranas, que são localizadas no
retículo endoplasmático (RE), podem também regular a
homeostase de auxina no RE, uma vez que a ACC-oxidase
pode oxidar auxina in vitro.
As sequências deduzidas de aminoácidos das ACC-
-oxidases revelaram que essas enzimas pertencem à su-
perfamília Fe2+/ascorbato-oxidase. Essa similaridade na
sequência sugeriu que a ACC-oxidase pode exigir Fe2+ e
ascorbato para sua atividade – uma exigência que foi con-
firmada pela análise bioquímica da proteína. A exigência
da ACC-oxidase por cofatores presumivelmente explica
por que a purificação dessa enzima frustrou os pesqui-
sadores durante tantos anos. Uma ACC-oxidase solúvel
foi cristalizada como um tetrâmero, mas ainda é desco-
nhecido se a isoforma solúvel funciona como um monô-
mero ou oligômero. Evidência experimental indica que a
ACC-oxidase associada à membrana funciona como um
monômero.
Os pesquisadores têm estudado o catabolismo do eti-
leno mediante fornecimento de 14C2H4 a tecidos vegetais e
rastreamento dos compostos radioativos produzidos. Di-
óxido de carbono, óxido de etileno, etilenoglicol e o con-
jugado de glicose e etilenoglicol foram identificados como
produtos da degradação metabólica. Entretanto, pelo fato
de certos compostos cíclicos de olefinas, como o 1,4-ciclo-
-hexadieno, terem exibido bloqueio da degradação do eti-
leno sem inibir ação desse hormônio, o catabolismo do
etileno não parece desempenhar um papel significante na
regulação do nível do hormônio (Raskin e Beyer, 1989).
Nem todo o ACC encontrado em um tecido é con-
vertido em etileno. O ACC pode ser também convertido
em uma forma conjugada, N-malonil ACC (ver Figura
A3.4), que não parece ser decomposto e se acumula no
tecido, principalmente nos vacúolos. Uma segunda forma
conjugada de ACC, 1-(γ-L-glutamilamino)-ciclopropano-
1-ácido carboxílico (GACC), de menor importância, tam-
bém foi identificada. A conjugação do ACC pode desem-
penhar um importante papel no controle da biossíntese
do etileno, de uma maneira análoga à conjugação de au-
xina e citocinina.
Várias espécies de bactérias do solo expressam uma
enzima denominada ACC-desaminase que hidrolisa o
ACC em amônia e α-cetobutirato (Glick, 2005). Essas bac-
térias podem promover o crescimento vegetal mediante
sequestro e clivagem do ACC produzido e excretado pelas
plantas, reduzindo, portanto, o nível de etileno ao qual as
plantas estão expostas. A ACC-desaminase também foi
expressa em plantas transgênicas para diminuir o nível de
etileno produzido.
Ácido salicílico
Como descrito no Capítulo 24, o ácido salicílico (AS) é
uma importante molécula sinalizadora de resposta ao es-
tresse que é cada vez mais caracterizada como um hormô-

nio (ver Capítulo 15 do livro). O AS é sintetizado a partir
da fenilalanina em uma rota que começa com a conversão
para ácido trans-cinâmico pela fenilalanina amônia liase,
seguido pela conversão a ácido salicílico via um benzoato
intermediário. O AS pode ser conjugado a glicose ou as-
partato e é ativo na forma volátil quando metilado para
formar metil salicilato.
II. Hormônios sintetizados via rotas de
isoprenoides
Compostos isoprenoides (também referidos como terpe-
noides) são sintetizados a partir de subunidades de iso-
preno via rotas do mevalonato e metileritritol fosfato nos
cloroplastos e citosol de plantas. Os precursores isoprenoi-
des são usados para sintetizar quatro importantes hormô-
nios de plantas.
Citocininas
Como descrito no Capítulo 15 do livro, a primeira etapa
comprometida com a síntese de citocinina é a transfe-
rência do grupo isopentenil (iP) do dimetilalil-difosfato
(DMAPP) para uma porção adenosina por uma isopente-
nil transferase (IPT) (Figura A3.5). Há nove genes IPT di-
ferentes em Arabidopsis, sete dos quais formam um grupo
único ou clado não encontrado em animais. Esse grupo de
IPTs funciona na biossíntese de citocinina. Os outros dois
genes IPT codificam enzimas usadas na modificação de
tRNA (tRNA-IPTs) que são similares àquelas encontradas
em animais que produzem tRNA de citocininas (Kakimo-
to, 2001; Takei et al., 2001). A possibilidade de que cito-
cininas livres derivadas de tRNA sejam funcionalmente
importantes em plantas foi explorada amplamente e tem
sido agora bastante desacreditada.
As proteínas codificadas pelos genes IPT de Arabidop-
sis foram expressas em E. coli e analisadas. Foi constatado
que, com exceção dos dois genes mais estreitamente re-
lacionados aos genes tRNA-IPT animais e bacterianos,
esses genes codificam proteínas capazes de sintetizar cito-
cininas livres. No entanto, diferentemente do Ipt de Agro-
bacterium (observe que os nomes para proteínas bacteria-
nas são grafados com maiúscula sem itálico), as enzimas
de Arabidopsis utilizam trifosfato de adenosina (ATP) e
difosfato de adenosina (ADP) preferencialmente ao AMP,
e usam DMAPP como fonte da cadeia lateral em vez de
HMBDP (ver Figura A3.5).
A rota metileritritol fosfato do cloroplasto é a fonte
primária do DMAPP usado na biossíntese de citocininas
pelas enzimas IPT vegetais. Essa rota ocorre em plas-
tídios, onde a maioria das enzimas IPT está localizada
nas plantas. Desse modo, o sítio primário da biossíntese
de citocininas nas plantas está nos plastídios. Contudo,
em Arabidopsis, ao menos uma proteína IPT, IPT3, pode
ser modificada pela adição de uma porção de farnesil
(Galichet et al., 2008). A farnesilação é a adição de um
grupo farnesil hidrofóbico (uma longa cadeia molecular
lipídica composta de subunidades de isopreno) à cisteína
Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-5
do C-terminal da proteína-alvo, que pode alterar sua loca-
lização subcelular, frequentemente destinando a proteína
a uma membrana. A farnesilação de IPT3 a direciona para
o núcleo, e não para os plastídios, onde a IPT3 não farne-
silada está localizada. Além disso, a proteína IPT4 é en-
contrada no citoplasma, e a proteína IPT7 é encontrada na
mitocôndria. Assim, os plastídios são os sítios primários
da biossíntese de citocininas, mas não são os únicos sítios.
Os padrões de expressão dos genes IPT indicam que
a citocinina é produzida em múltiplos locais da planta
(Miyawaki et al., 2004). A expressão de um subconjunto
de genes IPT é regulada para baixo (down-regulated) pela
citocinina, indicando que ela exerce um controle de re-
troalimentação negativo sobre sua própria biossíntese. A
expressão do gene IPT também é afetada por outras en-
tradas (inputs) reguladoras, incluindo auxina, nitrato e o
gene de identidade de meristemas SHOOT MERISTEM-
LESS (STM).
Os produtos imediatos da reação de IPT são iP-ribo-
tídeos. A cadeia lateral isoprênica de iP-ribotídeos é em
seguida trans-hidroxilada pelas P450-monoxigenases
CYP735A1 e CYP735A2, produzindo zeatina ribotídeos
(Takei et al., 2004). Os nucleotídeos de citocininas podem
ser convertidos em suas formas livres básicas mais ativas
por meio de desfosforilação e desribosilação. Essas inter-
conversões podem envolver enzimas comuns ao metabo-
lismo de purinas. Além dessas enzimas, as formas mono-
fosfatadas de citocinina ribotídeos podem ser convertidas
diretamente às formas básicas livres pela fosforriboidrola-
se LONELY GUY (LOG) (ver Figura A3.5), que foi identi-
ficada em um arroz mutante que exibia defeitos no meris-
tema do caule (Kurakawa et al., 2007). A expressão LOG é
localizada no ápice dos meristemas caulinares e a enzima
provavelmente faz o ajuste fino da distribuição de citoci-
ninas bioativas para regular a atividade meristemática. A
zeatina pode ser oxidada; ela também pode ser conjugada,
formando O-glicosídeos ou N-glicosídeos. Essas reações
são mostradas nas Figuras A3.6 e A3.7.
Brassinosteroides
O atual conhecimento da rota de biossíntese de brassi-
nosteroide (BR) é o resultado da combinação de análises
genéticas e bioquímicas (Fujioka e Yokota, 2003). Foram
utilizadas culturas de células de pervinca-de-madagascar
(Catharanthus roseus) para os estudos bioquímicos, devido
à sua elevada produção de BRs. Em experimentos em que
foram usados intermediários de BR marcados radioativa-
mente para suprir as plantas, seus derivados metabólicos
foram identificados por cromatografia gasosa-espectros-
copia de massa. A associação desses tipos de análises com
estudos genéticos de mutantes deficientes em BR de Arabi-
dopsis, tomateiro e outras espécies permitiu a identificação
das rotas biossintéticas completas.
Uma versão simplificada da rota biossintética de BR,
iniciando com o esterol progenitor campesterol, é mostra-
da na Figura A3.8. O campesterol é primeiro convertido
A3-6 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

IPT de Agrobacterium
NH2

N N

N N
OH
O
+ P P O
P O
HMBDP
NH2 IPT
HO OH

N N AMP
OH

N N

O
P P P O + P P O
HN
DMAPP
HO OH IPT N
N
ATP/ADP
N N

O
HN P O

N N
HO OH

N N ZMP

O
P P P O O OH
P O

HO OH
HO OH
iPRTP/iPRDP
LOG Ribosídeo 5′-P
CYP735A

OH OH OH OH

HN HN HN HN

N N N N N N N N

N N N N N N N N
H
O O O
P P P O P O HO

HO OH HO OH HO OH

ZTP/ZDP trans-Zeatina ribosídeo trans-Zeatina trans-Zeatina

5′-monofosfato ribosídeo

Ribotídeos Ribotídeos Base livre

Figura A3.5 Rota biossintética simplificada para a biossíntese de
citocinina. A primeira etapa comprometida na biossíntese de citoci-
nina é a adição da cadeia lateral isopentenil (iP) a partir de DMAPP
(dimetilalil difosfato) a uma porção adenosina. Os produtos dessa
reação (iPRDP ou iPRTP) são convertidos em zeatina pela citocro-
mo P450-monoxigenase (CPY735A). As citocininas di-hidrozeatina
(DHZ) são produzidas a partir de várias formas de trans-zeatina por
uma enzima desconhecida (não mostrado). As formas ribotídeo e
ribosídeo de trans-zeatina podem ser interconvertidas, e a trans-
-zeatina livre pode ser formada a partir de ribosídeo por enzimas do
metabolismo geral de purinas. Além disso, a enzima LONELY GUY
(LOG) pode converter em zeatina ribotídeo (mas apenas o monofos-
fato) diretamente para a forma livre básica. Observe que iP e DHZ
ribotídeos também podem ser convertidos em seus ribosídeos cor-
respondentes e em suas formas livres básicas de uma maneira similar
(não mostrado). Destaque: Rota de biossíntese da citocinina via Ipt
de Agrobacterium. As enzimas Ipt do vegetal e da bactéria diferem
no substrato adenosina utilizado e no doador da cadeia lateral; a en-
zima vegetal parece utilizar tanto o ADP quanto o ATP para ligar este
ao DMAPP, enquanto a enzima bacteriana usa o AMP para ligar ao
HMBDP (1-hidróxi-2-metil-2-[E]-butenil 4-difosfato). Observe que o
produto da reação da Ipt de Agrobacterium é uma zeatina ribotídeo.
 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-7

uma vantagem em diferentes condições fisiológicas, como

Citocinina
oxidase
FAD
FADH2
+ As esteroides 5α-redutases de mamíferos catalisam uma
H2O
iP Adenina
Figura A3.6 A citocinina oxidase degrada irreversivelmente al-
gumas citocininas.
em campestanol em várias etapas. O campestanol é, após,
convertido em castasterona por uma de duas rotas chama-
das de rotas de oxidação C-6 inicial e tardia, sendo então a
castasterona convertida em brassinolídeo. As rotas de oxi-
dação C-6 inicial e tardia coexistem e podem ser unidas
em diferentes pontos em Arabidopsis, ervilha e arroz, em-
bora o desvio de oxidação C-6 inicial não tenha sido detec-
tado em algumas espécies (Fujioka e Yokota, 2003). Uma
rota alternativa independente de campestanol também
foi descrita. A presença de várias rotas unidas aumenta a
complexidade da biossíntese de BR e pode proporcionar
tipos variados de estresse.
Os principais genes para biossíntese de BR foram
isolados e caracterizados. DET2 codifica uma proteína
com sequência de aminoácidos com elevada identidade
às esteroides 5α-redutases de mamíferos (Li et al., 1996).
conversão, dependente de NADPH, da testosterona em di-
3-Metil-2-butenal
-hidrotestosterona, uma etapa-chave no metabolismo de
esteroide que é essencial para o desenvolvimento embrio-
nário normal da genitália externa masculina e da próstata.
Todos os outros genes envolvidos na conversão de cam-
pestanol a BL conhecidos codificam citocromo P450-mo-
noxigenases (CYPs, cytochrome P450 monooxygenases).
A quantidade de BRs ativos também é regulada por
processos metabólicos, os quais inativam o brassinolídeo
(BL). Vários tipos de reações promovem a inativação de BL,
incluindo a epimerização, a oxidação, a hidroxilação, a sul-
fonação e a conjugação com glicose ou com lipídeos (Fu-
jioka e Yokota, 2003). O conhecimento limitado nessa área
baseia-se em experimentos com BRs marcados radiativa-
mente, em que as plantas são supridas com BRs marcados,
sendo identificados os produtos resultantes marcados e
analisados os metabólitos endógenos. Contudo, ainda não

(A) Figura A3.7 As citocininas podem

CH2OH Glicose ser conjugadas a várias moléculas nas
HN Xilose posições mostradas. (A) Os conjugados
CH3
mostrados em vermelho são irreversíveis
N1 6 N Glicose e resultam em uma citocinina inativa. Os
5 7
–SCH3 8 conjugados mostrados em azul causam a
2 3 4 9
Metiltiol N inativação da citocinina correspondente,
N Ribose 5′-fosfato
H mas são reversíveis. Os conjugados mos-
Ribose
Alanina trados em verde são citocininas ativas,
Glicose Glicose embora menos do que as bases livres
correspondentes. As porções de ribose
são reversíveis, porém a modificação me-
(B) tiltiol parece ser irreversível. (B) Exemplo
CH2O CH2OH de conjugação de trans-zeatina à glicose
HN CH3 O na cadeia lateral, formando um conjuga-
do O-ligado (em cima), e no anel de ade-
N N HO OH nina, formando um conjugado N-ligado
(embaixo).
CH2OH N OH
N
HN CH2OH H
CH3
HO O Zeatina-O-glicosídeo
N N
+
HO OH CH2OH
N N
H HN CH3
OH

trans-Zeatina β-D-Glicose N N

N N
CH2OH
O

HO OH

OH

trans-Zeatina-N9-glicosídeo
A3-8 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

Rota de oxidação C-6 tardia Rota de oxidação C-6 inicial

DET2

HO HO HO
H H
O
Campesterol Campestanol 6-Oxocampestanol

DWF4 DWF4

OH OH

BRox1
DETZ BRox2

Rota DWF4
independente HO
ROT3 HO H
de campesterol H O
6-Deoxocastasterona Castasterona

CPD CPD

OH
OH

OH
OH BRox1
BRox2

HO
HO H
O
H
6-Deoxoteasterona Teasterona

BRox1
BRox2 ROT3
OH

OH

HO

HO
H
O
Castasterona

BR ativo

BRox2

OH OH OH

OH
OH OH OH
OH
HO O HO HO
BAS1
OH UGT
HO O O Reação O
OH OH HO HO
O H catabólica H
O O
BL-23-O-glicosídeo Brassinolídeo 26-Hidroxibrassinolídeo
BR inativo BR mais ativo BR inativo

Figura A3.8 Rotas simplificadas para a biossíntese e o ca-
tabolismo de BL . O precursor da biossíntese de BL é o campes-
terol. A sequência de eventos biossintéticos é representada por
pontas de setas pretas. Setas contínuas indicam reações simples;
setas tracejadas representam reações múltiplas. Como mostrado,
a castasterona, o precursor imediato de BL, pode ser sintetizada
a partir de duas rotas paralelas: as rotas de oxidação C-6 inicial
e tardia. Na rota de oxidação C-6 inicial, a oxidação no carbono
C-6 do anel B ocorre antes da adição de hidroxilas vizinhas ao
C-22 e C-23 da cadeia lateral (refere-se à estrutura BL na Figura
15.24 do livro). Na rota de oxidação C-6 tardia, o C-6 é oxidado
após a introdução de hidroxilas na cadeia lateral e no C-2 do anel
A. Ambas as rotas, inicial e tardia, podem ser conectadas em
vários pontos, criando uma rede biossintética, em vez de uma
rota linear. As enzimas de Arabidopsis que catalisam as diferen-
tes etapas estão indicadas.

está esclarecida a importância desses compostos para a
rota de BR dos vegetais. Dois tipos de enzimas catabólicas
de BR foram descritas em plantas, em conjunto com suas
reações catalisadas (ver Figura A3.8). Uma é a proteína
CYP BAS1, que tem uma atividade esteroide 26-hidroxila-
se e conduz ao acúmulo de um 26-hidróxi-BL inativo (Neff
et al., 1999). O segundo tipo de enzima pertence à família
de UDP-glicosiltransferases (UGTs) que também regula a
glicosilação de múltiplos fitormônios (Husar et al., 2011;
Poppenberger et al., 2005). A superexpressão dos genes
catabólicos anteriormente mencionados em plantas causa
um fenótipo deficiente em BR.
Giberelinas (GA*)
Giberelinas (GAs) são compostos terpenoides produzidos
em muitas partes de uma planta, frequentemente em célu-
las que estão passando por divisão e/ou alongamento. Por
exemplo, estudos usando uma versão repórter de um gene
que codifica uma enzima na rota de GA mostrou que ela é
expressa em sementes imaturas, ápices caulinares, ápices
de raízes e anteras de plantas de Arabidopsis (Silverstone et
al., 1997), fornecendo evidência de que as GAs são sinteti-
zadas nesses locais.
As GAs, assim como todos os compostos terpenoides,
são produzidas a partir de unidades isoprenoides de cin-
co carbonos. Elas são diterpenoides formados a partir de
quatro unidades isoprenoides. A rota biossintética da GA
pode ser dividida em três estágios, cada um ocorrendo em
um compartimento celular diferente: plastídios, RE ou ci-
tosol (Figura A3.9).
No estágio 1, que ocorre nos plastídios, quatro uni-
dades de isoprenoides são resumidas, formando uma mo-
lécula linear de 20 carbonos, o geranilgeranil difosfato
(GGPP). Além de ser um precursor de GAs, o GGPP é um
intermediário na síntese de compostos importantes para
a fotossíntese, de modo que substâncias químicas ou mu-
tações que bloqueiam o estágio 1 matam as plantas. Para
a síntese de GAs, GGPP é convertido em um composto
tetracíclico, o ent-caureno, em duas etapas, catalisadas
pela ent-copalil difosfato sintase (CPS) e pela ent-caureno-
-sintase (KS).
No estágio 2, que ocorre na membrana dos plastídios
e no RE, o ent-caureno, em uma sequência de reações, é
convertido na primeira GA formada, a GA12. Nessa parte
da rota, a ent-caureno oxidase (KO) e a ácido ent-caurenoi-
co oxidase (KAO) são duas enzimas importantes. A rota
para GA12 é essencialmente a mesma em todas as espécies
vegetais estudadas até agora.
No estágio 3, que ocorre no citosol, por meio de uma
série de reações oxidativas, a GA12 é convertida primei-
ro em outras GAs-C 20 e, após, em GAs-C19, incluindo
a(s) GA(s) bioativa(s). Há duas rotas principais no estágio
3. Elas têm as mesmas séries de reações oxidativas, mas
*N. de T. O acrônimo GA deriva da locução inglesa gibberellic acid, o
ácido giberélico, que é idêntico à GA 3.
Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-9
todos os intermediários em uma rota têm um grupo hi-
droxila (–OH) no C-13 (e assim ela é chamada de rota de
hidroxilação-13), enquanto os intermediários na outra rota
não têm (e assim ela é referida como rota de não hidroxila-
ção-13). As séries de reações oxidativas ocorrem no anel A
e são as mesmas em ambas as rotas do estágio 3.
Na discussão a seguir, as reações que levam à GA bio-
ativa (GA4 na rota de não hidroxilação-13 e GA1 na rota
de hidroxilação-13) são referidas como “biossíntese”. O
metabolismo adicional da GA bioativa é identificado como
“desativação”.
Na rota de giberelina, algumas enzimas são
altamente reguladas
Três enzimas no estágio 3 da rota são discutidas em deta-
lhe porque catalisam etapas fortemente reguladas: a GA
20-oxidase (GA20ox) e a GA 3-oxidase (GA3ox), que cata-
lisam as etapas anteriores à GA bioativa, e a GA 2-oxidase
(GA2ox), envolvida na desativação de GA. Todas essas três
enzimas são classificadas como dioxigenases.
GA 20-oxidase. Essa enzima multifuncional catalisa a
oxidação em três etapas do átomo de carbono 20 na GA12,
produzindo a GA9 na rota de não hidroxilação-13, e na GA53,
produzindo a GA 20 na rota de hidroxilação-13. A oxidação
sequencial de C-20 prossegue de CH3 em GA12 para CH2OH,
e então para CHO, antes que o C-20 seja eliminado, produ-
zindo uma C19-GA (ou GA9 ou GA 20). Na maioria das plan-
tas, a GA 20-oxidase é codificada por uma pequena família
gênica, de modo que há várias isoformas, todas catalisan-
do a mesma sequência de reações. As isoformas individuais
são expressas em diferentes partes da planta e/ou podem ser
reguladas diferencialmente por sinais externos, tais como o
comprimento do dia. Uma vez que há redundância gênica,
uma mutação em qualquer um dos genes GA20ox resulta em
plantas apenas parcialmente anãs (semianãs).
GA 3-oxidase. Essa enzima catalisa a 3β-hidroxilação
da GA9, gerando GA4, ou da GA 20, produzindo GA1. Essa
reação é necessária para a bioatividade, à medida que o
grupo 3β-OH facilita a ligação da molécula de GA no sí-
tio do receptor de GA. Em muitas plantas, a GA 3-oxidase
é codificada por uma pequena família de genes. O cará-
ter anão identificado por Gregor Mendel que distinguiu
plantas de ervilha altas e anãs é causado por uma mutação
em um gene (LE) que codifica uma GA 3-oxidase expres-
sa em caules. Uma segunda GA 3-oxidase, expressa em
tecido reprodutivo, é necessária para a vagem e o desen-
volvimento das sementes normais. Atualmente, a maioria
das plantas de ervilha cultivadas é de mutantes le; elas têm
caules curtos, mas vagens e tamanho da semente normais,
permitindo a colheita conveniente e a alta produtividade.
GA 2-oxidase. A adição de um grupo 2-OH na orien-
tação β impede a ligação de GA no sítio do receptor de GA,
de modo que a 2β-hidroxilação desativa a GA. Na ervilha,
um genótipo identificado por ser mais alto que as plantas
do tipo selvagem contém uma mutação em um gene deno-
minado SLENDER (SLN), que codifica uma GA 2-oxidase.
A3-10 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

Estágio 1
H3C C H3C
D OPP OPP

A B KS A B CPS ESTÁGIO 1
(cloroplasto)

ent-Caureno ent-Copalil-difosfato GGPP

KO

do cloroplasto e RE)
ESTÁGIO 2 (envoltório
OH

H3C H3C H3C H3C

KAO GA13ox
Estágio 2 B

CHO COOH COOH

COOH COOH COOH COOH
Ácido ent-caurenoico GA12-aldeído GA12 GA53

GA20ox GA20ox
H OH

HOCH2 HOCH2
Rota da não hidroxilação-13

Rota da hidroxilação-13
12 COOH COOH
1 20 11 COOH COOH
9 13 GA15-OL GA44-OL
2 10 17
H 8 14
CH3 GA20ox GA20ox
3 5 16
6
4 H OH
7 15
H
18 19 CHO CHO
ent-giberelano

COOH COOH
COOH COOH
GA24 GA19
C20-GAs
GA20ox GA20ox
C19-GAs H OH

OH-13
Rota

(citosol)
ESTÁGIO 3
OH-13

Rota

O O
não

CO CO

Enzimas da rota da giberelina COOH COOH

GA9 GA20
Enzima Abreviação Localização GA3ox GA3ox
H OH
ent-copalil- CPS Cloroplasto
difosfato O O
sintase
ent-caureno KS Cloroplasto CO CO
sintase HO COOH HO COOH
ent-caureno KO Envoltório do
GA4 GA1
oxidase cloroplasto
e RE GA2ox GA2ox
ácido ent- KAO RE H OH
-caurenoico-
-oxidase O O
HO HO
GA 13-oxidase GA13ox ?
GA 20-oxidase GA20ox Citosol CO CO
GA 3-oxidase GA3ox Citosol HO COOH HO COOH
GA 2-oxidase GA2ox Citosol GA34 GA8

Figura A3.9 Os três estágios da biossíntese de GA. No está- C-20 e na formação de GAs-C19. Uma reação de 3β-hidroxilação
gio 1, geranilgeranil difosfato (GGPP) é convertido em ent-caure- produz, então, GA 4 e GA1 como GAs bioativas em cada rota. Na
no. No estágio 2, ent-caureno é convertido em GA12. Em muitas maioria das plantas predomina a rota de hidroxilação-13, em-
plantas, GA12 é convertida em GA 53 por hidroxilação no carbono bora, em Arabidopsis e em algumas outras espécies, a rota não
C-13. No estágio 3 no citosol, GA12 ou GA 53 é convertida, via OH-13 seja a rota principal. LA, lactona aberta. Ver a tabela para
rotas paralelas, em outras GAs. Essa conversão prossegue com os nomes completos e as localizações subcelulares das enzimas.
uma série de oxidações no C-20, resultando na perda final do

As plântulas do mutante sln contêm mais GA1 do que as
plantas do tipo selvagem, pois a desativação do hormônio
é bloqueada.
A giberelina regula seu próprio metabolismo
Parte da resposta de uma planta à GA bioativa é diminuir
a biossíntese de GA e estimular a desativação, evitando,
assim, o alongamento excessivo do caule. A redução da
biossíntese é alcançada pela regulação para baixo (inibição
da expressão) de alguns genes de GA20ox e GA3ox. Esse
efeito da GA sobre sua própria biossíntese é denominado
regulação por retroalimentação negativa (negative feed-
back regulation). O aumento da desativação de GA também
é importante para a manutenção da sua homeostase. Esse
aumento é alcançado pela regulação para cima (up-regu-
lation) da expressão de alguns dos genes GA2ox que codi-
ficam a enzima que desativa GA. A capacidade da GA de
promover a expressão de genes envolvidos em sua própria
desativação é denominada regulação por alimentação
para a frente positiva (positive feed-forward regulation).
GA1 e GA4 possuem bioatividade intrínseca para
promover o crescimento do caule
Estudos originais com mutantes para a biossíntese de GA
(também referidos com mutantes deficientes em GA),
realizados na década de 1980, atingiram dois objetivos
importantes. Além de prover evidência para que as rotas
de metabolismo de GA fossem definitivamente estabele-
cidas, esses estudos determinaram que GA1 é a principal
GA bioativa no crescimento do caule em ervilha e milho, e
que seus precursores não apresentam atividade biológica
intrínseca.
LE e le são dois alelos do gene que codifica uma GA
3-oxidase em ervilha. Se GA 20 é aplicada ao mutante le, ele
não é bioativo (a planta permanece anã), enquanto GA1 é
bioativo e resgata o fenótipo mutante (a planta cresce na
altura normal). GA8 também é inativa. A partir dessa in-
formação e do conhecimento da rota metabólica de GA em
ervilha (GA 20 → GA1 → GA8), podemos inferir que GA 20
é inativa, a menos que seja convertida em GA1 na planta,
e que GA1 apresenta bioatividade intrínseca (Ingram et al.,
1984).
Um estudo com outros mutantes de ervilha confirmou
que a altura das plantas está diretamente relacionada à
quantidade de GA1 endógena. O mutante na de ervilha, no
qual o estágio 2 é bloqueado, é quase completamente des-
tituído de GA1. Em consequência, ele alcança uma estatura
de apenas cerca de 1 cm na maturidade. Por outro lado, as
plântulas do mutante sln contêm níveis elevados de GA1,
por causa da desativação ineficiente de GA; de fato, essas
plantas mutantes são mais altas que o tipo selvagem.
Em Arabidopsis e em vários membros das cucurbitá-
ceas (p. ex., abóbora-moranga e pepino), a GA1 aplicada
apresenta menor atividade biológica que GA4. Portanto,
em Arabidopsis e provavelmente também nessas cucur-
bitáceas, GA4 é a principal GA biologicamente ativa, e o
Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-11
comprimento do caule está correlacionado aos níveis de
GA4. A altura da planta pode ser manipulada pela supe-
rexpressão ou pelo bloqueio da expressão de certos genes
na rota biossintética de GA, para alcançar o tamanho óti-
mo da planta. Essa abordagem foi pioneira utilizando Ara-
bidopsis e agora também é viável em plantas cultivadas.
Ácido abscísico
A biossíntese do ácido abscísico (ABA) começa nos cloro-
plastos e em outros plastídios. A rota completa está repre-
sentada na Figura A3.10. Vários mutantes deficientes em
ABA foram identificados com lesões em etapas específicas
da rota. Esses mutantes exibem fenótipos anormais que
podem ser corrigidos pela aplicação de ABA exógeno. Por
exemplo, flacca ( flc) e sitiens (sit) são mutantes “murchos”
de tomateiro em que a tendência de as folhas murcha-
rem (devido a uma incapacidade de fechar seus estôma-
tos) pode ser evitada pela aplicação de ABA exógeno. Os
mutantes aba de Arabidopsis também exibem um fenótipo
“murcho”. Estes e outros mutantes têm sido úteis na elu-
cidação dos detalhes da rota e na clonagem de genes que
codificam as enzimas biossintéticas de ABA (Wasilewska
et al., 2008).
A rota inicia com o isopentenil difosfato (IPP) – a
unidade biológica de isopreno que é também um precur-
sor de citocininas, giberelinas e brassinosteroides – e leva
à síntese da xantofila C40 (i.e., carotenoide oxigenado)
violaxantina (ver Figura A3.10). A síntese de violaxanti-
na é catalisada pela zeaxantina-epoxidase (ZEP), a enzi-
ma codificada pelo locus ABA1 de Arabidopsis. Essa des-
coberta forneceu evidência conclusiva de que a síntese de
ABA ocorre via rota carotenoide ou “indireta”, e não por
modificação de um isoprenoide C15, como na “rota dire-
ta” de alguns fungos fitopatogênicos. Mutantes de milho
(Zea mays) (denominados viviparous, vp), que são bloque-
ados em outras etapas na rota do carotenoide, também
têm níveis reduzidos de ABA e exibem viviparidade – a
germinação precoce das sementes no fruto enquanto este
ainda está fixado à planta. A viviparidade é uma caracte-
rística de muitas sementes deficientes em ABA.
A violaxantina é convertida a outro composto C40,
trans-neoxantina, sob condições de estresse, por uma
reação dependente do produto do locus ABA4 de Arabidop-
sis. A isomerização por uma enzima ou um conjunto de
enzimas até agora não identificado é seguida pela cliva-
gem de 9-cis-violaxantina e 9-cis-neoxantina pela 9-cis-
-epoxicarotenoide dioxigenase (NCED), formando o
composto C15 xantoxina, um inibidor de crescimento que
tem propriedades fisiológicas similares às do ABA. Essa é
a primeira etapa atribuída à biossíntese de ABA, e trata-se
de uma etapa reguladora limitante da taxa.
Uma das principais causas da inativação de ABA li-
vre é a oxidação a ácido faseico (PA, phaseic acid) e ácido
4’-di-hidrofaseico (DPA , dihydrophaseic acid) (ver Figura
A3.10B). O ABA aumenta a expressão de enzimas oxida-
tivas em alguns tecidos, resultando na regulação por re-
A3-12 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

Citocininas
OPP
Isopentenil difosfato (IPP)

A ligação do componente
OPP farnesil a proteínas
Brassinosteroides
específicas os une à
membrana.
Farnesil difosfato (C15)

Giberelinas OPP
Geranilgeranil difosfato (C20)

Fitoeno (C40)
vp2, vp5, vp7,
OH
vp9: mutantes de milho

Zeaxantina (C40)
HO
ZEP aba1: mutante de Arabidopsis
OH

O
all trans-Violaxantina (C40) OH
HO HO
aba4: Arabidopsis

O
trans-Neoxantina
HO
cis-isomerase?
Sítio de
clivagem

9‘-cis-Neoxantina (C40)
O
O2 HO
Vp14: OH
NCED mutante de milho

Exportação para o citosol Plastídio

HO

Figura A3.10 Biossíntese e metabolismo do ABA. Em plantas
superiores, o ABA é sintetizado via rotas dos terpenoides (Capítulo
13 do livro), assim como as citocininas, os brassinosteroides e as
giberelinas (ver Capítulo 15 do livro). Alguns mutantes deficientes
em ABA, úteis na elucidação da rota, são mostrados nas etapas em
que são bloqueados. As rotas para o catabolismo do ABA incluem a
conjugação para formar ABA-β-D-glicosil éster ou a oxidação para
formar ácido faseico e, a seguir, ácido di-hidrofaseico. NCED, 9-cis-
-epoxicarotenoide-dioxigenase; ZEP, zeaxantina epoxidase. A rota
ocorre em dois compartimentos, (A) plastídio, (B) citosol.

troalimentação negativa dos níveis de ABA. Isso constitui
a parte principal da regulação dos níveis de ABA, de modo
que mutantes sem essas oxidases acumulam muito mais
ABA do que linhagens que superexpressam quaisquer das
enzimas biossintéticas.
Catabolismo de GAs
O produto da degradação de ABA, o ácido faseico, em ge-
ral é inativo ou exibe uma atividade bastante reduzida em
bioensaios. Entretanto, o ácido faseico pode induzir o fe-
chamento estomático em algumas espécies, e é tão ativo
quanto o ABA na inibição da produção de α-amilase in-
duzida pelo ácido giberélico nas camadas de aleurona de
cevada. Esses efeitos sugerem que o ácido faseico pode ser
capaz de se ligar a alguns receptores de ABA. Ao contrário
do ácido faseico, o outro produto da degradação de ABA,
DPA, não tem atividade detectável em qualquer dos bioen-
saios testados.
 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios A3-13

O ABA livre também pode ser inativado pela conju-
gação covalente a outra molécula, como um monossacarí-
deo. Um exemplo comum de ABA conjugado é o ABA-β-D-
glicosil éster (ABA-GE). A conjugação não apenas torna o
ABA inativo como um hormônio, mas também altera sua
polaridade e distribuição celular. Enquanto o ABA livre
está localizado no citosol, o ABA-GE acumula-se nos va-
cúolos e no apoplasto e pode servir como uma forma de
armazenamento do hormônio.
O estresse por desidratação resulta na relocalização
do ABA-GE dos vacúolos para o RE, onde ele pode ser cli-
vado por β-glicosidases. A desidratação também ativa ra-
pidamente as β-glicosidases, aparentemente pela indução
da polimerização dessas enzimas em complexos maiores.
Coerente com a importância do ABA-GE como uma fon-
te de ABA, mutantes carentes de β-glicosidase têm níveis
mais baixos de ABA, além de deficiência na regulação es-
tomática, germinação e respostas ao estresse.
Todas as reações subsequentes ocorrem nos peroxis-
somos. Primeiro, o anel de ciclopentenona de OPDA é
reduzido a ácido 12-oxofitoenoico (OPC-8) pela OPDA-
-redutase. A seguir, três ciclos de β-oxidação, envolvendo
oxidação, hidratação, oxidação e tiólise, foram propostos
para encurtar a cadeia lateral carboxílica do OPC-8 e pro-
duzir o AJ de 12 carbonos (Acosta et al., 2009).
Mais recentemente, foi mostrado que o conjugado
isoleucina (Ile) do ácido jasmônico (AJ-Ile) é uma forma
ativa primária do AJ. A conversão do AJ a AJ-Ile ocorre no
citosol via membro da família GH3 ácido jasmônico ami-
do transferase 1 (JAR1). Em Arabidopsis, acredita-se que a
forma conjugada do AJ seja a mais ativa (Staswick et al.,
2004). O ácido carboxílico do AJ pode ser também metila-
do por uma metiltransferase citosólica, formando a molé-
cula volátil sinalizadora de defesa metil jasmonato (MeJA,
methyl jasmonate; ver Figura A3.12).

Estrigolactonas (A) trans-β-caroteno

Assim como o ácido abscísico, as estrigolactonas, os D27

hormônios que aumentam o crescimento da raiz e ini-
bem a ramificação da parte aérea, são sintetizadas por 9, cis-β-caroteno

meio de um produto da decomposição de carotenoides CCD7

(ver Capítulo 15 do livro, Figura 15.25). No plastídio, o (MAX3, RMS5, D17)
trans-β-caroteno durante três etapas é convertido em 9, cis-β-apo-10’-caroteno
carlactona (Figura A3.11A). A carlactona é, então, ex-
CCD8
portada para o citosol, onde é convertida pela MAX1 (MAX3, RMS1, D10) Plastídio
citocromo P450 em estrigolactona ativa. Várias estrigo-
Citosol
lactonas ativas foram descobertas (Figura A3.11B). Um
Carlactona
análogo sintético comumente utilizado, G24, também
P450
é mostrado. Embora diversos genes que regulam a rota (MAX1)
tenham sido identificados, os detalhes das reações ain-
da precisam ser elucidados. Estrigolactona

III. Lipídeos (B)

Ácido jasmônico (AJ) 9 10
1 2 O O
O
O
1
Vários derivados de ácidos graxos biologicamente ativos 7 8 C 3
são formados durante a oxidação desses ácidos em plan- 6
A B 3a 6′
O
tas e animais. Em animais, a cascata do ácido araquidônico 5 4 O
2′ O
5′ OH
O
O
O
gera numerosos mediadores metabólicos importantes co- D
3′ 4′
nhecidos como eicosanoides, incluindo prostaglandinas
7′
e leucotrienos. As plantas superiores têm uma cascata do (+)-5-Deoxiestrigol (+)-Orbancol
linolenato similar (também chamada de “rota do octade-
canoide”), que leva à biossíntese do jasmonato (AJ) (ver O O
O O
Capítulo 23 do livro). A primeira etapa na biossíntese do
jasmonato é a peroxidação do ácido α-linolênico (18:3) pela
13-lipoxigenase, formando o ácido (13S)-hidroperoxiocta- O O O O
O O
decatrienoico (13-HPOT, [13S]-hydroperoxyoctadecatrie- OH

noic acid) (Figura A3.12). O 13-HPOT é transformado em

ácido cis-(+)-12-oxofitodienoico (OPDA, oxophytodienoic (+)-Estrigol GR24
acid) pela ação da aleno óxido-sintase − produzindo ácido (análogo sintético)
(13S)-12,13-epoxioctadecatrienoico (12,13-EOT, epoxy-oc-
Figura A3.11 (A) A estrigolactona é sintetizada por meio de um
tadecatrienoic acid) − e da aleno óxido-ciclase. Essas etapas produto da decomposição de carotenoides. (B) Algumas estruturas
da biossíntese de AJ ocorrem em plastídios. de estrigolactonas.
A3-14 Apêndice 3 • Rotas Biossintéticas de Hormônios

PLASTÍDIO Figura A3.12 O ácido jasmônico é

sintetizado em duas organelas diferentes,
plastídios e peroxissomos, via rota do oc-
COOH
tadecanoide.

Ácido α-linolênico

13-Lipoxigenase

COOH

OOH
13-HPOT

Aleno óxido sintase

COOH

O
12, 13-EOT

Aleno óxido ciclase

O

COOH

cis-(+)-OPDA

PEROXISSOMO
O

COOH

cis-(+)-OPDA

OPDA-redutase
O

COOH

OPC-8:0

β-oxidação
O

COOH
Metiltransferase
MeJa
OPC-6:0 (sinal de defesa volátil)

Dois ciclos de β-oxidação

O Ja–Ile
Jar1 (hormônio ativo)

COOH

Ácido (+)-7-iso-jasmônico

Referências
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