INÁ MARIN

RESUMOS DE
MICROBIOLOGIA
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E IMUNOLOGIA
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TIPOS DE SEMEIO
As técnicas de semeadura são o método
pelo qual se transfere inóculos
bacterianos de um meio de cultura ou
material a ser analisado (secreções,
alimentos) para um outro meio de
cultura. Para garantir que apenas o
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microorganismo desejado seja semeado,
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são utilizadas as técnicas assépticas:

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procedimentos que devem ser adotados

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visando a não contaminação de

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materiais, meios e culturas.

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TIPOS DE SEMEIO
1. Semeaduras em meios sólidos em tubos:

Estria simples:
semear com alça ou agulha bacteriológica, em zig-zag, partindo da base
para a extremidade do bizel (superfície inclinada do meio).
Objetivo: obtenção de intensa massa de microorganismos

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Estria Reta:
semear com agulha bacteriológica, fazendo uma linha reta, com cuidado
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de não ferir o Agar, partindo da base para a extremidade do bizel

(superfície inclinada do meio).
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Objetivo: obtenção de pequena massa de microorganismos.

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Picada Central:
semear com agulha bacteriológica, no centro do Agar. Dependendo da
finalidade, o inóculo deve penetrar até 2/3 do tubo ou até o fundo deste.
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em
algumas técnicas.

Picada em Profundidade:
semear com agulha bacteriológica, no centro do Agar. Dependendo da
finalidade, o inóculo deve penetrar até 2/3 do tubo ou até o fundo deste.
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em
algumas técnicas.
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TIPOS DE SEMEIO
2. Semeaduras em meios sólidos em placas de Petri:

Estria simples:
semear com agulha bacteriológica, fazendo
uma linha reta, com cuidado de não ferir o
Agar, partindo da base para a extremidade do
bizel (superfície inclinada do meio).
NObjetivo: obtenção de pequena massa de
microorganismos.
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Esgotamento em estrias ou estrias

múltiplas:
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transferir uma alçada da cultura para meio

sólido em placa e estriar com a alça
bacteriológica sobre o meio. A placa é
dividida em 4 quadrantes e a inoculação pode
ser feita de 2 tipos:
• 3 estrias: estriar em metade da placa, com
movimentos de zig-zag. Quando atingir a
metade, girar a placa 90° e estriar até a metade
(1/4 da placa), girar mais 90° e estriar o meio
restante.
• 4 estrias: estriar até 2/3 da metade da placa,
girar 90°, estriar 2/3 do próximo quadrante
(1/4 da placa), girar 90°, estriar mais 2/3 do
próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90° e
estriar o restante do meio.
Objetivo: obtenção de colônias isoladas.
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TIPOS DE MEIOS
DE CULTURA
Os microrganismos necessitam de uma
variedade de substâncias nutritivas
capazes de promover o seu crescimento.
Esses elementos são necessários para a
síntese e para as funções normais dos
componentes celulares.
ex: meios enriquecidos, seletivos,
diferencial, de transporte, de triagem, de
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contagem, de indentificação, de
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estocagem e manuntenção.
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O meio de cultura deve ser o mais

próximo das condições reais onde habita o
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microrganismo, para que este cresça

satisfatoriamente.

*A principal substância solidificante

utilizada nos meios é o ágar
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TIPOS DE MEIOS
DE CULTURA
Ágar MacConkey:
contém sais biliares e cristal violeta
para inibir o crescimento de
bactérias Gram-positivas,
permitindo, portanto, o crescimento
de bactérias Gramnegativas.
(Fermentar lactase = rosa
Não fermentar = amarelo)
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Ágar Sangue
é um meio de cultura diferencial e não
seletivo, rico em nutrientes, utilizado para
isolamento de micro-organismos não
fastidiosos, prova de satelitismo e
verificação de hemólise de Streptococcus
spp. e Staphylococcus spp.
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TIPOS DE MEIOS
DE CULTURA
Ágar Chocolate:
é um meio não seletivo
tradicionalmente utilizado para o
isolamento de microrganismos.
Este meio contém substâncias
nutritivas que favorecem o
crescimento da maioria dos
microrganismos de interesse
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diagnóstico.
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Cromogênico
Meio não seletivo e diferencial, destinado
ao plantio primário, com possibilidade de
identificação e quantificação de
microrganismos. usado muito em
urocultura
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HEMOLISE EM
ÁGAR SANGUE
Alfa-hemólise
Hemólise parcial com perda parcial de
hemoglobina pelas hemácias, formando
zona cinzenta ou esverdeada ao redor
da colônia em ágar

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Beta-hemólise
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Hemólise completa das hemácias,

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formando uma zona transparente ao redor

da colônia em ágar sangue.

Gama-hemólise
Ausência de hemólise. Não causam
modificação no meio de ágar sangue.
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COLORAÇÃO
DE GRAM
Esta coloração é muito utilizada na bacteriologia permitindo a distinção entre
bactérias Gram positivas (púrpura) e Gram negativas (rosa), sendo aplicada a
maioria dos coco e bacilos.
A diferença entre os dois tipos de células relaciona-se com a estrutura da
parede celular das bactérias. Como a parede celular das bactérias Gram
positivas é formada por uma camada espessa de peptideoglicano, enquanto
que a parede celular das Gram negativas é formada por uma camada fina de
peptideoglicano mais a externa lipopolissacarídica. Ao ser corada e depois de
aplicado um solvente (álcool) a Gram positiva permanece corada pelo corante
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cristal violeta, enquanto a Gram negativa é descorada e corada posteriormente
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com fucsina, permitindo a diferenciação. O álcool dissolve o LPS da Gram
negativa e o corante sai. Já a Gram positiva por não apresentar esse LPS, mas
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uma camada espessa de peptideoglicano será desidratada e reterá o corante

violeta de genciana. Embora a maioria das bactérias possa ser corada por tal
método, algumas não o fazem satisfatoriamente exigindo técnicas especiais de
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coloração, a exemplo das micobactérias, nocardias, espiroquetas, micoplasma,

riquétsias e clamídias.
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GRAM POSITIVAS

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GRAM NEGATIVAS

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COLORAÇÃO
DE ZIEHL-NEELSEN
Essa técnica de coloração é utilizada em bactérias que são má coradas pela
coloração de Gram, como por exemplo as bactérias do gênero Mycobacterium e
Nocardia. A característica álcool-ácido-resistente é conferida a essas bactérias
devido ao alto teor de lipídeos estruturais na parede celular(Ácidos micólicos),
que causa uma grande hidrofobicidade, que dificulta a ação de corantes aquosos.
Um exemplo de ácido graxo altamente presente na parede celular dessas
bactérias é o ácido micólico. Na técnica de Ziehl-Neelsen, após o processo de
coloração da amostra, a fucsina de Ziehl irá corar todos os elementos celulares
de vermelho, porém após a descoloração com o álcool, somente os bacilos
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álcool-ácidos-resistente irão continuar preservando a cor vermelha, os demais
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elementos celulares na amostra serão descorados. Então, para podermos
visualizar os outros elementos celulares (descorados) na amostra, deve-se
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utilizar azul de metileno, que dará um contraste, deixando os elementos

celulares em azul e os bacilos álcool-ácidos-resistentes continuarão em
vermelho.
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COLORAÇÃO
DE ZIEHL-NIELSEN

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MORFOLOGIA
BACTERIANA

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REFERÊNCIAS
https://www.biomedicinapadrao.com.br/2012/09/tecnicas-
de-semeadura.html
https://www.lojaroster.com.br/blog/meio-de-cultura-tipos-
aplicacoes/
https://www.biomedicinapadrao.com.br/2011/04/estreptoc
ocos-classificacao.html
http://www.histotech.com.br/site/index.php
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