Curso: Disciplina:

Período: Professor(a): Letícia da C. Braga

NOME:
Estudo dirigido
01. A tecnologia DNA recombinante tem permitido avanços no tratamento de doenças
genéticas recessivas, consideradas incuráveis. Cite dois desses avanços obtidos a partir
da última década do século XX.
02. Em que consiste a terapia gênica?
03. Quais métodos usados para introdução de genes em células de mamíferos para
terapia gênica? Descreva cada um deles, apontando vantagens e limitações de cada um?
04. As formas de transferência deste vetor contendo o gene alvo para terapia gênica
pode ser feita in vivo ou ex vivo. O que diferencia estas abordagens?
05. Quais os vetores utilizados na terapia gênica? Qual a vantagem e desvantagem de
caca um?
06. Quais os principais problemas inerentes à terapia gênica?
07. Para quais doenças não-herdadas se tem tentado a terapia gênica?
08. Em que consiste o processo de interferência por meio do RNA?
09. Explique como funciona a maquinaria de interferência por meio de RNA na célula,
descrevendo as principais proteínas envolvidas no mecanismo.
10. Diferencie siRNA de shRNA e explique como esses diferentes tipos de RNA de
interferência promovem o silenciamento.
11. A descoberta do processo de regulação gênica através de RNA interferência
revolucionou a forma como se estuda o papel de genes específicos na biologia, bem
como o tratamento de doenças. Explique esta afirmativa.
12. A degeneração macular relacionada à idade (DMRI) é uma doença degenerativa da
área central da retina frequentemente associada à perda visual central, em pessoas acima
de 55 anos de ambos os sexos, sendo a mais importante causa de cegueira irreversível
em adultos nos países desenvolvidos e a terceira causa de cegueira no mundo. Fatores
de risco genéticos têm sido associados com a doença, incluindo elevada expressão
gênica e polimorfismo para o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF). Terapias
oftalmológicas têm explorado duplexes de RNA (siRNA) como nova promessa para o
tratamento dessa doença e drogas terapêuticas que usam esses oligonucleotídeos, já
estão sendo comercializadas (Vitravene®pela Novartis e Macugen® pela Pfizer). Estud.
av. vol.24 no.70 São Paulo 2010.
Para outras doenças humanas, o mecanismo de silenciamento gênico empregando RNA
interferência ainda é muito recente, mas vem sendo considerado a nova grande
promessa da inovação em fármacos. Analise o trecho abordado e discuta que tipo de
doença genética pode ser tratada pelo mecanismo de silenciamento gênico empregando
RNA interferência. Justifique sua resposta.
13. Quais os componentes do Sistema CRISPR-Cas9?
14. O que é o RNA-guia e qual sua função no Sistema CRISPR-Cas9?
15. Por que a alteração na sequência de DNA provocada pelo CRISPR-Cas9 pode
inativar um gene?
16. Qual o papel da ativação do sistema de reparo por recombinação homóloga e não
homológa quando o Sistema CRISPR-Cas9 é introduzido em células de mamíferos?
17. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias.
Explique o papel biológico desses sistemas.
18. Em que consiste a edição de genomas em células de mamíferos e qual sua
importância?
19. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas
CGGGGATACTAAG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9
bacteriana?
20. Cite 5 aplicações da engenharia genética mediada pelo Sistema CRISPR-Cas9.