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Preservação cosmética usando enzimas

INTRODUÇÃO
Em geral, a preservação utiliza produtos químicos para evitar a
deterioração do produto devido ao crescimento microbiano e muitos produtos
químicos são aprovados para esta aplicação. No entanto, nos últimos anos, o
público em geral começou a expressar preocupação com o uso excessivo de
produtos químicos nos produtos que utiliza, e isso está levando os
formuladores a considerarem o uso de matérias-primas mais naturais e
abordagens alternativas de preservação. As matérias-primas naturais muitas
vezes tornam as formulações mais sujeitas à deterioração microbiana,
tornando o trabalho do formulador mais difícil. Conforme discutido no Capítulo
11, métodos alternativos de preservação, incluindo redução do pH, diminuição
da atividade da água e aquecimento (esterilização e pasteurização), têm sido
lugar comum nas indústrias de alimentos, medicamentos e cosméticos por
muitos anos. Outra abordagem é minimizar o potencial de contaminação
microbiana por meio de embalagens que limitam o contato com a maior parte
da formulação.One protection strategy that has been used successfully by
cosmetic formulators committed to natural systems is the use of enzyme
systems containing lactoperoxidase and glucose oxidase with appropriate
substrates (Biovert1, Arch Personal Care Products, L.P.). This is a patented
enzyme system (1,2) that has been developed through the knowledge of natural
antimicrobial defense systems in mammals (see Sections ‘‘Oxidoreductases’’
and ‘‘Long-Term Efficacy of the Lactoperoxidase/Glucose Oxidase Protection
System’’). This chapter discusses the antimicrobial action of enzymes and the
use of enzymes in product preservation.
ENZIMAS NA NATUREZA
As enzimas são catalisadores biológicos que foram desenvolvidos para realizar
uma infinidade de funções, incluindo papéis protetores. As enzimas que
funcionam como parte do mecanismo de defesa do organismo são
normalmente enzimas líticas ou enzimas oxidorredutase. As enzimas líticas
têm atividade antimicrobiana porque atacam a parede celular dos
microrganismos invasores, resultando na lise celular; em contraste, as enzimas
oxidorredutase catalisam reações que produzem produtos citotóxicos e exibem
atividade antimicrobiana.
ENZIMAS LÍTICAS
Lisozimas
As lisozimas são N-acetilmuramidases, que lisam a parede celular de
certas espécies de bactérias hidrolisando as ligações b (1! 4) glucosídicas da
parede celular do peptidoglicano (3). As lisozimas são amplamente distribuídas
na natureza e podem ser encontradas em uma variedade de secreções de
mamíferos, ovos de aves, peixes, insetos e plantas. Eles são ativos
principalmente contra bactérias gram-positivas porque esses organismos não
têm uma membrana externa e, portanto, as enzimas têm acesso direto à
parede celular. Agentes quelantes como o ácido etilenodiaminotetracético
demonstraram aumentar a sensibilidade das bactérias gram-negativas à
lisozima, presumivelmente por alterar a permeabilidade da membrana celular
(4,5). É notável que, na natureza, as lisozimas freqüentemente ocorrem com
quelantes naturais, por exemplo, ovotransferrina nos ovos e lactoferrina no
leite.
A maior concentração de lisozima está nas lágrimas, mas a albumina de
ovo de galinha sempre foi a principal fonte dessa enzima para uso comercial.
Esta enzima demonstrou ser um conservante eficaz na indústria de alimentos
para uma ampla variedade de produtos alimentícios, incluindo peixes, carnes,
manteiga, queijo, frutas e vegetais, mas a utilização desta tecnologia ainda é
bastante limitada. [Para comentários sobre o uso de lisozima como
conservante de alimentos, consulte as Refs. 6 e 7]. A lisozima isolada do leite
bovino tem sido usada para suplementar a fórmula infantil, e esta adição tem
mostrado fazer a fórmula se assemelhar ao leite humano, pois promove o
crescimento de Bifidobacterium bifidum no intestino do bebê, como ocorre em
bebês amamentados ( 8,9).
Como a lisozima também faz parte do sistema de defesa salivar constitutivo
humano, foram feitas tentativas de usá-la em produtos de saúde bucal. Por
exemplo, em experimentos onde a lisozima foi incorporada à goma de mascar,
a enzima mostrou melhorar a higiene dental e diminuir a formação de placa
dentária (10).
Quitinases
A atividade antifúngica da quitinase foi descoberta pela primeira vez em
plantas. Quitina é um componente principal de muitas paredes celulares de
fungos, mas também é um componente estrutural da cutícula de artrópodes,
nematóides, moluscos e do intestino forros de insetos. As plantas que
produzem quitinases as usam como defesa mecanismo contra pragas
invasoras e patógenos fúngicos (11,12). Microbiana as quitinases são
produzidas pela maioria dos fungos e por bactérias como Streptomyces spp. e
Bacillus spp. As enzimas fúngicas são produzidas para ajudar na parede
celular morfogênese, enquanto as quitinases bacterianas são secretadas para
auxiliar na quebra e assimilação das paredes celulares do fungo.
Uma série de plantas agrícolas foram transformadas com plantas genes que
codificam quitinase como um meio de alterar sua resistência a fungos
patógenos. No entanto, em geral, os pesquisadores descobriram que precisam
codifica mais de um gene para obter boa resistência (13). Deve-se notar que
como as estruturas de carboidratos do peptidoglicano e da quitina são
estruturalmente semelhantes, muitas quitinases também possuem atividade
bacteriolítica (14)
OXIDOREDUTASES
Existem várias enzimas oxidorredutase que estão envolvidas nos sistemas de
defesa não específicos em animais.
Mieloperoxidase
Uma das oxidorredutases mais estudadas é a mieloperoxidase. Reage com
peróxido de hidrogênio para formar o composto I, que é um poderoso oxidante
que oxida todos os haletos exceto o fluoreto, bem como o pseudohaleto
tiocianato, aos seus ácidos hipohalous correspondentes. É encontrado em
neutrófilos e monócitos. Nos neutrófilos, a mieloperoxidase é armazenada no
grânulos azurófilos e é liberado durante a fagocitose (15). Quando os
neutrófilos fagocitam as bactérias, elas consomem oxigênio rapidamente, que é
reduzido a superóxido por nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato oxidase.
O a mieloperoxidase usa o superóxido e o peróxido de hidrogênio gerados por
o oxidativo de neutrófilos explodiu para produzir ácido hipocloroso e outros
oxidantes reativos (16). Este sistema demonstrou ser fortemente bactericida
(17) e é pensado para desempenhar um papel central na morte bacteriana
dentro do neutrófilos fagossomas. A cloração de proteínas bacterianas dentro
fagossomas foram demonstrados (18), confirmando assim a proposta original
de Klebanoff (19) de que os neutrófilos usam a mieloperoxidase / hidrogênio
sistema de peróxido / cloreto para gerar ácido hipocloroso para agentes
antimicrobianos defesa (para uma revisão da mieloperoxidase, ver Ref. 20).
Existem enzimas microbianas com atividades semelhantes à mieloperoxidase.
Caldariomyces fumago produz uma haloperoxidase contendo heme que mostra
atividade antimicrobiana contra uma variedade de microorganismos diferentes
(21), e a haloperoxidase dependente de vanádio de Curvularia inequalis
demonstrou produzir ácido hipocloroso (22). De um ponto comercial de vista,
as enzimas microbianas são de mais interesse do que as derivadas de animais
porque têm potencial para serem produzidos em escala industrial, tornando
eles são candidatos potenciais como antimicrobianos para aplicações
industriais.

Peroxidase de eosinófilos
A peroxidase de eosinófilos é encontrada em grandes quantidades nos
eosinófilos. Gostar neutrófilos, eosinófilos são parte do glóbulo branco de
mamíferos, ou leucócito, sistema de defesa, mas enquanto os neutrófilos
fagocitam bactérias e matam eles dentro do fagossoma, os eosinófilos
medeiam a destruição extracelular de grandes patógenos metazoários, como
parasitas helmínticos (23). Eosinófilo a peroxidase, embora relacionada à
mieloperoxidase, é estruturalmente e funcionalmente distinta e, ao contrário da
mieloperoxidase, oxida fracamente o cloreto, se em todos (24-27). Com o
iodeto, o sistema apresenta toxicidade pronunciada para bactérias (24) e
parasitas (28,29), mas apenas acima das concentrações fisiológicas de iodeto.
Foi proposto que, na natureza, o tiocianato é o virtual exclusivo substrato para
a oxidação da peroxidase de eosinófilos, e que os produtos da reação grupos
sulfidrila alvo nos parasitas (30). Esses compostos reativos mais fracos, mas
direcionados, podem ser mais adequados para a morte extracelular seletiva de
patógenos em contraste com os produtos de reação potentes, mas não
específicos da mye loperoxidase, que também podem ter como alvo as
proteínas do hospedeiro e levar a danos nos tecidos.