INTRODUÇÃO

Anti-sépticos e desinfectantes são usados extensivamente em hospitais e outras configurações de

cuidados de saúde para uma variedade de aplicativos da atualidade em superfície dura. Em particular, são
uma parte essencial das práticas de controlede infecção e ajuda na prevenção de infecções nosocomiais
(277, 454). Muitas preocupações sobre o potencial de riscos decontaminação e infecção microbianas nos
mercados do consumidor em geral e alimentar também levaram ao aumento da utilização de anti-sépticos
e desinfetantes pelo público em geral. Uma ampla variedade de agentes químicos ativos (ou"biocidas")
encontra-se nestes produtos, muitos dos quais foram utilizados por centenas de anos para antisepsia,
desinfecção e conservação (39). Apesar disto, pouco se sabe sobre o modo de ação destes agentes ativos
que sobre antibióticos. Em geral, biocidas têm um espectro mais amplo de atividade que os antibióticos e,
enquanto os antibióticos tendem a ter metas específicas intracelular, biocidas podem ter vários destinos.
O uso generalizado dos produtos anti-sépticos e desinfetantes levou algumas especulações sobre o
desenvolvimento da resistência microbiana, em particular cross resistência aos antibióticos. Esta revisão
considera que é conhecido sobre o modo de ação e mecanismos de resistência microbiana dos anti-
sépticos e desinfetantes e tentativas, sempre que possível, para relacionar os conhecimentos atuais para o
ambiente clínico. Um resumo dos vários tipos debiocidas utilizados na assepsia e desinfecção, suas
estruturas químicas e seus usos clínicos são demonstrados na tabela 1. É importante observar que muitos
desses biocidas podem ser utilizados isoladamente ou em combinação em uma variedade de produtos que
variam consideravelmente na atividade contra microrganismos. Atividade antimicrobiana pode ser
influenciada por vários fatores, tais como efeitos de formulação, a presença de uma carga orgânica,
sinergia, temperatura, diluição e métodode ensaio.
ANTI-SÉPTICOS E DESINFECTANTES
Anti-sépticos e desinfectantes são usados extensivamente em hospitais e outras configurações de
cuidados de saúde para uma variedade de aplicativos da atualidade em superfície dura. Em particular, são
uma parte essencial das práticas de controlede infecção e ajuda na prevenção de infecções nosocomiais
(277, 454). Muitas preocupações sobre o potencial de riscos decontaminação e infecção microbianas nos
mercados do consumidor em geral e alimentar também levaram ao aumento da utilização de anti-sépticos
e desinfetantes pelo público em geral. Uma ampla variedade de agentes químicos ativos (ou"biocidas")
encontra-se nestes produtos, muitos dos quais foram utilizados por centenas de anos para antisepsia,
desinfecção e conservação (39). Apesar disto, pouco se sabe sobre o modo de ação destes agentes ativos
que sobre antibióticos. Em geral, biocidas têm um espectro mais amplo de atividade que os antibióticos e,
enquanto os antibióticos tendem a ter metas específicas intracelular, biocidas podem ter vários destinos.
O uso generalizado dos produtos anti-sépticos e desinfetantes levou algumas especulações sobre o
desenvolvimento da resistência microbiana, em particular cross resistência aos antibióticos. Esta revisão
considera que é conhecido sobre o modo de ação e mecanismos de resistência microbiana dos anti-
sépticos e desinfetantes e tentativas, sempre que possível, para relacionar os conhecimentos atuais para o
ambiente clínico.
MECANISMOS DE AÇÃO
Foram realizados progressos consideráveis de introdução de mecanismos de ação na compreensão dos
mecanismos da ação antibacterianas, anti-sépticos e desinfetantes (215, 428, 437). Por outro lado, estudos
sobre seus modos de ação contra fungos (426, 436), vírus (298, 307) e protozoários (163) têm sido
bastante esparsos.
As camadas de células microbianas ultraperiféricas assim podem ter um efeito significativo sobre a
susceptibilidade (ou insusceptibilidade) dos anti-sépticos e desinfetantes; é decepcionante como pouco se
sabe sobre a passagem destes agentes antimicrobianos em diferentes tipos de microrganismos.
Dinamização da atividade da maioria dos biocidas pode ser alcançada através da utilização de aditivos
diferentes, como mostrado nas partes mais tarde desta revisão. Nesta seção, são discutidos os mecanismos
de ação antimicrobiana de uma gama de agentes químicos que são usados como anti-sépticos,
desinfetantes ou ambos. São considerados diferentes tipos de microrganismos, semelhanças e diferenças
na natureza e os efeitos são enfáticos. Os mecanismos da ação são resumidos na tabela 2.
Metodologia geral
Várias técnicas estão disponíveis para o estudo dos mecanismos de ação de anti-sépticos e desinfetantes
sobre microrganismos, principalmente bactérias (448). Estes incluem análise de absorção (215, 428, 459),
lise e fugas de constituintes intracelulares (122), perturbação da célula Homeostase (266, 445), efeitos
sobre o modelo de membranas(170), inibição de enzimas, transporte de elétrons e Fosforilação oxidativa
(162, 272), interação com macromoléculas (448, 523), efeitos sobre processos biosintéticos
macromoleculares (133) e exame microscópico das células expostas ao biocida (35).
No entanto, as fases de vida diferentes (trophozoites e Cistos) fornecem um exemplo fascinante do
problema (148) de como variações de Citologia e fisiologia podem modificar respostas dos anti-sépticos
e desinfetantes. Khunkitti et al. (251- 255) exploraram este aspecto utilizando índices de viabilidade,
fugas, absorção e microscopiacomo ferramentas experimentais. Alguns destes procedimentos também
podem ser modificados para estudar efeitos sobre vírus e phages (por exemplo, absorção de células
inteiras e viral ou componentes phage, efeitos sobre microscopia, ácidos nucléicos e proteínas) (401).
Virais alvos são predominantemente vírus envelopados (se houver), derivado da célula de host
citoplasmáticas ou membrana nuclear; o capsídeo, que é responsável pelo forma de partículas de vírus e
de proteção dos ácidos nucléicos virais; e o genoma viral. Lançamento de um ácido nucléico viral intacto,
no ambiente após a destruição do capsídeo é potencial preocupação, pois alguns ácidos nucleicos são
infecciosos quando libertado a partirdo capsídeo (317), um aspecto que deve ser considerado na
desinfecção viral. Considerações importantes na inativação viral são tratadas por Klein e Deforest (259) e
Prínce et al. (384), enquanto é altamente recomendado um papel anterior pelo Grossgebauer (189).
Álcoois.
Embora vários álcoois se revelaram ser antimicrobianos eficazes, álcool etílico (etanol, álcool), álcool
isopropílico (isopropanol, 2-propanol) e n-propanol (em especial na Europa) são o mais amplamente
usados (337). Álcoois apresentam rápida atividade antimicrobiana com amplo espectro contra bactérias
vegetativas (incluindo a micobactéria), vírus e fungos, mas não são esporicidas. Eles são, no entanto,
conhecidos como inibidor de esporulação e germinação de esporos (545), mas este efeito é reversível
(513). Por falta de atividade esporicida, álcoois não são recomendados para esterilização, mas são
amplamente utilizadas para desinfecção de superfície dura e anti-sepsia.
Glutaraldeido.
Glutaraldeído é um importante dialdeido que encontrou uso como desinfetante em esterilização, em
particular para baixas temperaturas de desinfecção e esterilização de Endoscópios e equipamento
cirúrgico e como um fixador em microscopia de elétrons.
Formaldeido- agentes doadores.
Vários agentes de liberação de formaldeído foram utilizados no tratamento de Peritonite (226, 273). Eles
incluem noxythiolin (oxymethylenethiourea), tauroline (um condensado de duas moléculas de ácido
aminosulfonico taurine com três moléculas de formaldeído), hexamine (hexametilenotetramina,
metenamina), a melamina de resinas e formaldeído uréia e derivados de imidazolona como dantoina.
Todos estes agentes são microbicidas devido à libertação de formaldeído. No entanto, porque a atividade
antibacterianas de taurolin é maior que o de formaldeído livre, da atividade de taurolin não é inteiramente
o resultado da ação de formaldeído.
o-Phthalaldeido.
OPA é um novo tipo de desinfetante que alegou ter potente atividade bactericida e esporicida e foi
sugerido como uma substituição para glutaraldeído na desinfecção de endoscopios (7). OPA é um
composto com dois grupos de aldeído aromático. Até à data, o mecanismo antimicrobiano e ação tem
sido pouco estudada, mas provas preliminares (526) sugerem uma ação semelhante dos glutaraldeído.
Investigações são necessários para corroborar esta opinião.
Anilides
Os anilides já investigados primariamente para uso como anti-sépticos, mas raramente são usados na
clínica. Triclocarbão (CTP; 3,4,49-triclorocarbanilide) é o mais amplamente estudados nesta série e é
usado principalmente em consumidor de sabões e desodorizantes. CTP é particularmente ativa contra
bactérias gram mas significativamente menos ativo contra bactérias gram e fungos (30) e carece de
substantividade apreciável (persistência) para a pele (37). Os anilides agem por adsorção e destruindo o
caráter semi permeável da membrana citoplasmáticas, levando a mortecelular (194).
Biguanidas
Clorexidina.
Clorexidina é provavelmente a biocida mais amplamente usado em produtos anti-sépticos, em
particularnos produtos handwashing e oral, mas também como um desinfetante e conservante. Isto se
deve em particular a sua eficácia e amplo espectro, substantivitdade para a pele e irritação baixa. Nota,
irritabilidade foi descrita e em muitos casos, pode ser de um produto específico (167, 403). Apesar das
vantagens de clorexidina, sua atividade é dependente depH e é bastante reduzida na presença de matéria
orgânica (430). Uma quantidade considerável de investigação tem sido realizada sobre o mecanismo da
ação antimicrobiana deste importante bisbiguanide (389) (quadros 2 e 4), embora a maior parte da
atenção fosse dedicada à forma na qual ela age.
Clorexidina tem um efeito bifásico sobre lise protoplastos, com reduzida lise em concentrações mais altas
de hexametilenobiguanida. Além disso, em células de toda a parede da célula de levedura pode ter algum
efeito em limitar a absorção da hexametilenobiguanida.
Micobactéria geralmente é altamente resistente à clorexidina (419). Pouco se sabe sobre a absorção
de clorexidina (e outros anti-sépticos e desinfetantes) por micobactérias e sobre as alterações bioquímicas
que ocorrem nas células tratadas. Uma vez que o PRM para alguns micobactérias é da ordem de aqueles
de clorexidina-sensíveis, Gram cocci (48), efeitos inibitórios de clorexidina sobre a micobactéria não
podem ser diferentes para as bactérias sensíveis.

Alexidina.
Alexidina difere quimicamente clorexidina em que possuam grupos etilhexilo no final. Alexidina é
mais rapidamente bactericida e produz uma modificação significativamente mais rápida na
permeabilidade bactericida (79, 80). Estudos com vesículas fosfolipídeos pura e mistas-lipídeos
demonstram que, ao contrário de clorexidina, alexidina produz lipídeos fase separação e domínio de
formação (tabela 2). Ele foi proposto (80) que a natureza do grupo etilhexilo final em alexidina, em vez
da um clorofenol de clorexidina, possa influenciar a capacidade de uma hexametilenobiguanida para
produzir domínios de levedos na membrana citoplasmáticas.
Polimericas biguanidas.
Vantocil é uma mistura de heterodisperse de polyhexamethylene biguanides (PHMB) com um peso
molecular de aproximadamente 3.000. Biguanidas poliméricas encontraram uso como agentes de
desinfecção geral na indústria alimentar e, com muito êxito, para a desinfecção de piscinas. Vantocil é
ativo contra bactérias gram e Gram, embora p. aeruginosa e Proteus vulgaris são menos sensíveis.
Vantocil não é esporicida.

Diamidinas
Diamidinas são caracterizados quimicamente conforme descrito na tabela 1. Os sais de isotionato de dois
compostos, propamidine (4,4-diaminodiphenoxypropane) e dibromopropamidina (2,2-dibromo-4,4-
diamidinodiphenoxypropane), foram utilizados como agentes antibacterianos. Suas propriedades
antibacterianas e utilizações foram revistas por Hugo (213) e Hugo e Russell (226). Clinicamente,
diamidinas são usadas para o tratamento tópico de feridas. O mecanismo exato da ação da diamidines é
desconhecido, mas eles foram apresentados para inibir a absorção de oxigênio e induzir a fuga de
aminoácidos (tabela 2), como seria esperado se eles são considerados como agentes tensoativos
catiônicos. Danos à célula superfície do p. aeruginosa e Enterobacter cloacae tem sido descrito.
Agentes derivados de Halogênios
Compostos de cloro e baseada em iodo são os mais significativos halogênios microbicidas utilizados na
clínica e foram tradicionalmente utilizados para fins anti-sépticos e desinfetantes.
Agentes derivados de Cloro.
Excelente revisões que lidam com o químico, físico, e Propriedades microbiológicas de cloro-releasing
agentes (CRAs) estão disponíveis (42, 130). Os tipos mais importantes de CRAs são hipoclorito de
sódio, dióxido de cloro e os compostos de cloro-N como dicloroisocianurato de sódio (NaDCC), com
cloramina T sendo usado em certa medida. Soluções de hipoclorito de sódio são amplamente utilizadas
para desinfecção de superfície dura (bleach doméstico) e podem ser usadas para desinfecção de manchas
de sangue que contenham vírus da imunodeficiência humana ou HBV.
Iodina e iodoforos
Embora menos reativo de cloro, iodo é rapidamente bactericida, fungicida, tuberculocida, virucida e
esporicida (184). Soluções aquosa ou alcoólica (tintura) de iodo foram utilizadas por 150 anos como anti-
sépticos, eles estão associados a irritação e coloração excessiva. Além disso, soluções aquosas são
geralmente instáveis; em solução, pelo menos sete espécies de iodo estão presentes em um complexo
equilíbrio, com iodo molecular (I2), sendo responsáveis pela eficácia de antimictrobianos. Estes
problemas foram superados pelo desenvolvimento do iodoforos ("iodo transportadoras" ou "agentes de
iodo-liberação"); o mais amplamente usados são povidone-iodo epolixamero-iodo em anti-sépticos e
desinfetantes. Iodoforos são complexos de iodo e um agente solubilizante ou transportador, que atua
como um reservatório do iodo ativo "gratuito" (184). Embora seja mantida a atividade germicida,
iodoforos são considerados menos ativos contra certos fungos e esporos que as tinturas (454). Semelhante
ao cloro, aação antimicrobiana de iodo é rápida, mesmo em concentrações baixas, mas o modo exato de
ação é desconhecido. Iodo rapidamente penetra em microrganismos e ataca os principais grupos de
proteínas (em especial a freesulfuraminoácidos cisteína e metionina , nucleótidos e ácidos gordos (15,
184), que culmina na morte celular. Pouco é conhecido sobre a ação do iodo como antivirais, mas o vírus
não lipidos e parvoviruses são menos sensíveis doque os lípideos de vírus envelopado. Da mesma forma
para bactérias, é provável que as proteínas do vírus Envelopados superfície de ataques de iodo, mas eles
também podem desestabilizar ácidos gordos de membrana reagindo com cadeias de carbono insaturados.
Peroxigenios
Hidrogênio peróxido.
Peróxido de hidrogênio (H2O2) é uma biocida amplamente usada para desinfecção, esterilização e anti-
sepsia. É um líquido incolor, claro que é comercialmente disponível em uma variedade de concentrações
que variam de 3 a 90 %. H2O2 é considerada biodegradável, porque ele pode degradar rapidamente na
água em produtos inócuos e oxigênio. Embora soluções puras são geralmente estáveis, a maioria contêm
estabilizadores para impedir a decomposição. H2O2 demonstra largo espectro de eficácia contra vírus,
bactérias, leveduras e esporos de bactérias (38). Em geral, é considerado uma maior atividade contra
Gram de bactérias, no entanto, a presença de catalase ou outros peroxidases, estes organismos pode
aumentar tolerância na presença de concentrações inferiores. Concentrações mais elevadas de H2O2 (10
a 30 %) e tempos de contatos mais longos são necessários para a atividade esporicida (416), embora essa
atividade é significativamente maior na fase gasosa. H2O2 funciona como um comburente,
produzindo radicais livres de hidroxila (•OH) que atacam os componentes essenciais da célula, incluindo
lípidos, proteínas e DNA. Foi proposto que os grupos expostos sulfidrila e duplas são especialmente
direcionados (38).
Peracetico acido.
Ácido paracético (PAA) (CH3COOOH) é considerado uma biocida mais potente de peróxido
de hidrogênio, sendo esporicida, bactericida, virucida e fungicidas em baixas concentrações (, 0,3 %)
(38). PAA também se decompõe aos subprodutos seguros (ácido acético e oxigênio) mas tem as
vantagens de ser isento de decomposição por peroxidases, ao contrário de H2O2 e o restante ativa na
presença de cargas orgânicas (283, 308) adicionadas. Sua aplicação principal é como um esterilizante
líquido de baixa temperatura para dispositivos médicos, escopos flexíveis e hemodiálises, mas também é
usado como um ambiente esterilizante de superfície (100, 308). Semelhante ao H2O2,
PAA provavelmente desnatura proteínas e enzimas e aumenta a permeabilidade da parede celular,
interromper sulfidrila (-SH) e sulfur obrigações (S - S) (22, 38).
Fenóis.
Agentes antimicrobianos fenólicos são utilizados para anti-sepsia, desinfecção ou propriedades
conservantes, dependendo do composto. Ele tem sido conhecido por muitos anos (215) que, embora eles
frequentemente tem sido referidos como "venenos protoplásmico gerais", têm propriedades de
membrana-ativo que também contribuem para a sua atividade global (120) (tabela 2). Fenol induz
progressiva fuga dos constituintes intracelular, incluindo o lançamento de K+, o primeiro índice de danos
de membrana (273) e de radioatividade 14 C-rotulado e. coli (242, 265). Pulvertaft e Lumb (386)
demonstram que a baixa concentração de fenóis (0.032 %, 320 mg/ml) e outros agentes (não
fenólico) morrem culturas rapidamente crescentes de e. coli, estafilococos e estreptococos e concluiu que
as enzimas autoliticas não estavam envolvidas.
Bis-fenóis os bis-fenóis são derivados halogenados hidroxi dos dois grupos fenólicos conectados por
várias pontes (191, 446). Em geral, eles apresentam eficácia e amplo-espectro mas têm pouca atividade
contra p. aeruginosa e moldes e são esporostaticos na direção de esporos bacterianos. Triclosan e
hexachlorophane são os biocidas mais amplamente usados neste grupo, especialmente em sabões anti-
sépticos e passagens por água de mão. Ambos compostos se revelaram ter efeitos cumulativos e
persistentes na pele (313).
Triclosan. triclosan (éter 2,4,49-trichloro-29-hidroxidifenilo; Irgasan DP 300) apresenta atividade
específica contra bactérias gram positivas (469, 521). Sua eficácia contra bactérias gram e leveduras pode
ser significativamente aprimorada pelos efeitos de formulação. Por exemplo, triclosan em combinação
com EDTA causou maior permeabilidade da membrana exterior (282). Relatórios também têm sugerido
que, além de suas propriedades antibacterianas, triclosan pode ter atividade anti-inflamatória (25, 522).
Hexachlorophene. Hexaclorofeno (hexachlorophane; 2,29-dihidroxi-3,5,6,39,59,69-
hexaclorodifenilmetano) é outro bis-fenol, cujo modo de ação tem sido extensivamente estudado. A ação
principal de hexaclorofeno, com base em estudos com Bacillus megatherium, inibe a membrana e parte
da cadeia de transporte de elétrons e os outros efeitos acima são secundários que ocorrem somente em
concentrações elevadas (92, 158, 241, 481). Ela induz fugas, provoca morte de protoplastos e inibe a
respiração. A concentração de limiar para a atividade bactericida da hexachlorphene é de 10 mg/ml (peso
seco), mas pico de fuga em concentrações superiores a 50 mg/ml e ocorrem alterações citológicas
acima de 30 mg/ml. Além disso, hexaclorofeno é bactericida a 0 ° C, apesar de causar pouco vazamento a
esta temperatura.
Halofenóis.
Cloroxilenol (4-cloro-3,5-dimetilfenol; p-Cloro-m-xilenol) é a chave halofenol usado em formulações
anti-séptica ou desinfetantes. Cloroxilenol é bactericida, mas p. aeruginosa e muitos moldes são altamente
resistentes.
Surpreendentemente, o seu mecanismo de ação tenha sido pouco estudado apesar de sua utilização
generalizada ao longo de muitos anos. Devido à sua natureza fenólica, é esperado ter um efeito nas
membranas microbianas.
Quaternários de Amônia.
Agentes tensoativos (tensoativos) tem duas regiões em suas estruturas moleculares, um hidrocarboneto,
grupos impermeáveis (hidrofóbico) e o outro um grupo captação de água (hidrofílicos ou polar).
Dependendo do encargo ou ausência de ionização do grupo hidrófila, tensoativos classificam-se em
catiônicos, aniônicos, não iônico e compostos anfolitos (anfotéricos). Destes, os agentes catiônicos, como
ilustrado por compostos de amônio quaternário (QACs), são as mais úteis anti-sépticos e desinfetantes
(160). Às vezes, eles são conhecidos como detergentes ativadores. QACs foram utilizados para uma
variedade de efeitos clínicos (por exemplo, desinfecção preoperativa, a aplicação de membranas mucosas
e desinfecção de superfícies não críticas). Além de ter propriedades antimicrobianas, QACs
também são excelentes para limpeza e desodorização de superfície dura
Vapor Fase Esterilizantes.
Muitos dispositivos médicos sensíveis ao calor e suprimentos cirúrgicos podem ser esterilizados de forma
eficaz por esterilizantes (em especial glutaraldeído, PAA e peróxido de hidrogênio) ou por sistemas de
esterilização fase vapor (Tabela 1). Os agentes ativos mais amplamente usados nesses sistemas "frios"
são: óxido de etileno, formaldeído e, mais recentemente desenvolvidos, peróxido de hidrogênio e PAA.
Óxido de etileno e formaldeído são ambos de largo epectro e agentes alcalinizantes. No entanto, sua
atividade é dependente da concentração de ativo, da temperatura, da duração da exposição e da umidade
relativa (87).
MECANISMOS de RESISTÊNCIA.
Tal como acima referido, diferentes tipos de microrganismos variam na sua resposta ao anti-sépticos e
desinfetantes. Isso é devido a estrutura celular diferente, composição e fisiologia. Tradicionalmente,
susceptibilidade anti-sépticos e desinfetantes foi classificada como base nessas diferenças; com trabalho
recente, esta classificação pode ser ainda mais alargada (Figura 1). Porque diferentes tipos de organismos
reagem de forma diferente, é conveniente considerar bactérias, fungos, vírus, protozoários e priões
separadamente.
Bactérias - Resistência aos Anti-sépticos e Desinfetantes.
Nos últimos anos, consideráveis progressos na compreensão mais plenamente as respostas dos diferentes
tipos de bactérias (micobactérias, bactérias não esporuladas e esporos bacterianos) para agentes
antibacterianos. Como resultado, resistência pode ser tanto uma propriedade natural de um organismo
(intrínseca) ou adquiridos por mutação ou aquisição de plasmídeos (DNA auto-replicação,
extracromosomal) ou transportes (cromossômica ou plasmídeos integrando, transmissíveis de cassetes de
DNA).
Resistência intrínseca é demonstrada por bactérias gram negativa, esporos bacterianos micobactérias e,
sob certas condições, estafilococos (quadro 5). Resistência de plasmídeos adquiridos, é mais amplamente
associada com compostos de mercúrio e outros sais metálicos. Nos últimos anos, foi observada
resistência adquirida para determinados outros tipos de biocidas, nomeadamente estafilococos.
Intrínseca Bacterial - Mecanismos Resistência.
Para uma molécula anti-séptica ou desinfetante chegar a seu site de destino, as camadas externas de uma
célula devem ser ultrapassadas. A natureza e a composição dessas camadas dependem do tipo de
organismo e podem atuar como uma barreira de permeabilidade, na qual pode haver uma absorção
reduzida. Como alternativa, mas menos comumente, constituivelmente sintetizadas, enzimas podem
trazer sobre a degradação de um composto.
Ordem decrescente de resistência anti-sépticos e desinfetantes. O asterisco indica que as conclusões não
são ainda universalmente acordadas. É, portanto, uma propriedade natural e cromosomalmente controlada
de uma célula bacteriana que lhe permite contornar a ação de um anti-séptico ou desinfetante. Bactérias
gramnegativas tendem a ser mais resistente dos organismos Gram, tais como estafilococos (quadro 6).
Intrinsica resistencia de esporos bacterianos.
Esporos bacterianos dos gêneros Bacillus e Clostridium tem sido amplamente estudados e são
invariavelmente os mais resistentes de todos os tipos de bactérias anti-sépticos e desinfetantes.
Embora geralmente não são Bacillus patogênicos, seus esporos são amplamente utilizados como
indicadores de esterilização eficiente. Clostridium são agentes patogênicos significativos; por exemplo,
C. difficile é a causa mais comum de diarréia hospitalar (478). Muitos produtos biocidas são bactericidas
ou bacteriostáticos em baixas concentrações de bactérias não esporuladas, incluindo as células
vegetativas da espécie Bacillus e Clostridium, mas concentrações elevadas pode ser necessárias para
obter um efeito esporicida (por exemplo, para glutaraldeído e CRAs).

Pelo contrário, ainda elevadas concentrações de álcool, fenólicos, QACs e clorexidina carecem de um
efeito de esporicida, embora isto pode ser conseguido quando estes compostos são usados a temperaturas
elevadas (475). Um típico esporo tem uma estrutura complexa (29, 151). Em suma, as células
germinativas (protoplastos ou núcleo) e paredes de células germinativas são rodeados do córtex, fora que
são os Casacos de esporos de interior e exterior. Uma fina exosporium pode estar presente os esporos de
algumas espécies, mas pode envolver apenas um Brasão de esporos. RNA, DNA e DPA, bem como a
maioria do cálcio, potássio, manganês e fósforo, está presente no protoplastos esporos. Também estão
presentes grandes quantidades de proteínas básicas baixa massa molecular (pequenas esporos solúveis
em ácido proteínas [SASPs]), que são rapidamente degradadas durante a germinação. O córtex consiste
em grande parte peptidoglicano, incluindo um lactâmico de muramico específicos de esporos. Os Casacos
de esporos constituem uma parte importante dos esporos. Estas estruturas consistem principalmente de
proteínas, com uma fração álcalis solúvel composta por Polipeptídeos ácidos, sendo encontrados no
Brasão do interior e uma fração alcalina resistente associada com a presença de obrigações Dissulfeto
rico sendo encontrado no Brasão do exterior. Estes aspectos, especialmente as funções do coat(s) e do
córtex, são todos relevantes para o mecanismo(s) da resistência apresentada pelos esporos bacterianos
anti-sépticos e desinfetantes. Várias técnicas estão disponíveis para estudar mecanismos de resistência
de esporos (428). Eles incluem removendo o Brasão de esporos e córtex, usando uma técnica de "step-
down" para alcançar um esporulação altamente síncrona (de modo que as alterações celulares podem ser
monitoradas com precisão), empregando esporos mutantes que não esporuladas para além dos estágios
geneticamente determinados em esporulação, adicionando um anti-séptico ou um desinfetante no início
da esporulação e determinar o quão longe o processo podem prosseguir e analisar o papel dos SASPs.
Tais procedimentos ajudaram a fornecer uma quantidade considerável de informações úteis. Esporulação
propriamente dita é um processo no qual uma célula vegetativa desenvolve em esporos e envolve sete
estágios (designados 0 a VII). Durante esse processo, a célula vegetativa (fase 0) sofre uma série
de modificações morfológicas que culminan na libertação de uma maturidade esporos (fase VII). Fases
(desenvolvimento de córtex) IV a VII são os mais importantes no desenvolvimento de resistência aos
biocidas. Resistência à anti-sépticos e desinfetantes se desenvolve durante esporulação e pode ser um
evento inicial, intermediário ou tardio (muito) (103, 375, 378, 429, 474). Marcadores úteis para
acompanhamento do desenvolvimento de resistência são tolueno (resistência aos quais é um evento
precoce), calor (intermediário) e lisozima (tardia) (236, 237). Estudos com um subtilis B. de
tipo selvagem da estirpe, 168 e seus mutantes Spo- ajudaram a determinar as fases em que se desenvolve
resistência (262, 375, 474). Estes estudos (Fig. 2), a ordem do desenvolvimento da resistência era tolueno
(marcador), formaldeído, sulfato laurílico de sódio, fenol e nitrato fenilmercúrico; m-cresol, clorocresol,
gluconato de clorexidina, cloreto de cetilpiridinium e cloreto de mercúrio; e calor úmido (marcador),
dicloroisocianurato de sódio, hipoclorito de sódio, lisozima (marcador) e glutaraldeído. Assim, é
demonstrada a associação da superveniência da resistência a um
determinado anti-séptico ou desinfetante com um estagio(s) especial no desenvolvimento de esporos.
Com base em outras conclusões, no processo de germinação é também implicado no relançamento dos
esporos expostos a outras desinfetantes.
Resistência Intrínseca de Micobactéria.
Micobactérias são bem conhecidas de possuir uma resistência ao anti-sépticos e desinfetantes que é
aproximadamente intermediária entre aqueles de outras bactérias não esporuladas e esporos de bactérias
(Fig. 1) (177, 345, 419). Não há provas de que a degradação enzimática de moléculas prejudiciais se
realiza. O mecanismo mais provável para a alta resistência das micobactérias está associado com suas
paredes de célula complexas que oferecem uma barreira eficaz à entrada desses agentes.
Resistência Intrínseca de outras bactérias gram-positivas.
A parede celular dos estafilococos é composta essencialmente por peptidoglicano e acido teichoic.
Nenhum destes parece atuar como uma barreira à entrada de anti-sépticos e desinfetantes eficaz. Desde
que as substâncias peso molecular alto facilmente podem atravessar a parede da célula de estafilococos e
vegetativa spp Bacillus., isso pode explicar a sensibilidade desses organismos para muitos agentes
antibacterianos, incluindo QACs e clorexidina (411, 417, 422, 428, 451). No entanto, a plasticidade da
célula bacteriana envelopada é um fenômeno conhecido (381). Taxa de crescimento e de qualquer
nutriente peso limitante afetará o estado fisiológico das células. Em tais circunstâncias, a espessura e o
grau de crosslinking de peptidoglicano são susceptíveis de ser modificados e, por conseguinte,
a sensibilidade celular anti-sépticos e desinfetantes será alterada.
Resistência Intrínseca de bactéria gram-negativa.
Bactérias gram negativas são geralmente mais resistentes aos anti-sépticos e desinfetantes que não
esporulados, não micobactérias, bactérias gram positivas (Figura 2) (428, 440, 441). Exemplos de MIC
contra organismos Gram positivos e negativos são fornecidos na tabela 6. Com base nesses dados, existe
uma diferença marcada na sensibilidade do s. aureus e e. coli QACs (benzalcónio, benzetónio e
cetrimide), hexaclorofeno, diamidines, e triclosano, mas pouca diferença na susceptibilidade de
clorohexidina. P. aeruginosa é consideravelmente mais resistente à maioria desses agentes, incluindo
clorohexidina, e (não mostrado) spp Proteus. Possuem uma resistência superior à média de
agentes catiônicos, como clorohexidina e QACs (311, 440). Fisiológica (phenotypic) adaptação como
mecanismo intrínseco
A associação dos microrganismos com superfícies sólidas leva a geração de um biofilme, definido como
um consórcio de organismos organizados dentro de uma exopolimero extenso exopolisacarideo (93, 94).
Biofilme podem consistir de monocultures, de várias espécies diferentes ou de phenotypes mistos de uma
determinada espécie (57, 73, 381). Algumas publicações excelentes que lidam com a natureza, a
formação e o conteúdo de biofilme estão disponíveis (125, 178, 276, 538). Biofilme são importantes por
várias razões, nomeadamente biocorrosão, reduzido a qualidade da água e focos de contaminação dos
produtos de higiene (10, 12-14). Colonização também ocorre em biomateriais implantados e dispositivos
médicos, resultando em taxas de aumento de infecção e possível recorrência da infecção (125).

Bactérias em diferentes partes de um biofilme experimentam diferentes ambientes de nutrientes e suas

propriedades fisiológicas são afetadas (57). Dentro as profundidades de um biofilme, por exemplo,
limitação dos nutrientes é susceptível de reduzir as taxas de crescimento, o que podem afetar a
susceptibilidade aos agentes antimicrobianos (98, 142, 171, 172). Assim, os phenotypes de organismos
sésseis dentro biofilme diferem consideravelmente as células planctônicas encontradas no laboratório de
culturas (73). Crescimento lento bactérias são particularmente insusceptíveis, um ponto reiterou
recentemente noutro contexto (126). Várias razões podem contabilizar a sensibilidade reduzida
de bactérias dentro de um biofilme (Tabela 8).
(I) pode haver redução ao acesso de um desinfetante (ou antibiótico) para as células dentro do
biofilme;
(II) química de interação entre o desinfetante e o próprio biofilme,
(III) a modulação da micro desenvolvimento,
(IV) a produção de enzimas degradativas (e produtos químicos neutralizadores),
(V) ou troca genética entre as células em um biofilme. No entanto, removido um biofilme e
reculturado nos meios de cultura de bactérias são geralmente não mais resistentes que as
células planctônicas "ordinárias" dessa espécie (57). Várias instâncias são conhecidas da
contaminação das soluções anti-séptica ou desinfetantes por bactérias. Por exemplo, Marrie e
Costerton (310) descreveram a sobrevivência prolongada de S. marcescens em soluções de
clorexidina de 2 %, que foi atribuída a incorporação desses organismos em uma matriz
espessa que aderiu às paredes de um recipiente de armazenamento. Conclusões análogas
foram alcançadas por Hugo et al. (225) sobre a sobrevivência de cepacia B. de clorexidina e
por Anderson et al. (10, 14 12-) sobre a contaminação de anti-sépticos Iodofor com
Pseudomonas.
Bactéria adquirindo Mecanismos de Resistência.
Como ocorre com antibióticos e outros medicamentos quimioterapeuticos, resistência adquirida anti-
sépticos e desinfetantes podem surgir por mutação ou a aquisição de material genético sob a forma de
plasmídeos ou transposons. É importante observar que "resistência" da como um termo muitas vezes
pode ser usado livremente e em muitos casos deve ser interpretada com alguma prudência. Isso é
particularmente verdadeiro com análise MIC. Ao contrário de antibióticos, "resistência" ou um aumento
do MIC de um biocida, não necessariamente correlacionar com falha terapêutica. Um aumento de um
antibiótico MIC pode pode ter conseqüências significativas, muitas vezes, indicando que o organismo de
destino não é afetado pela sua ação antimicrobiana.
Plasmídeos e bactérias resistentes a anti-sépticos e desinfetantes.
Chopra (82, 83) examinou o papel de plasmídeos na codificação de resistência (ou maior tolerância) a
anti-sépticos e desinfetantes; este tópico foi considerado mais por Russell. Concluiu-se que para além de
alguns exemplos específicos tais como prata, outros metais e organo mercuriais, plasmídeos não eram
normalmente responsáveis pelos elevados níveis de resistência anti-séptica ou desinfetante associado a
certas espécies ou estirpes. Desde então, no entanto, houve numerosos relatórios vinculando a presença
de plasmídeos em bactérias com maior tolerância clorexidina, QACs e triclosano, bem como para
diamidinas, acridinas e brometo de etídio, o tema foi reconsiderado. Resistência de codificado plasmídeos
anti-sépticos e desinfetantes tinha cada vez mais amplamente investigada com mercuriais (orgânicos e
inorgânicos), compostos de prata e outros cátions e ânions.
(i) Plasmideo-mediated anti-séptico e desinfetante resistência em gram-negativa bactéria.
Relatórios ocasionais analisaram o possível papel de plasmídeos, a resistência das bactérias gram
a anti-sépticos e desinfetantes. Sutton e Jacoby (498) observou que plasmídeos RP1 não alterou
significativamente a resistência do p. aeruginosa a QACs, clorexidina, iodo ou fenóis clorados,
embora maior resistência à hexaclorofeno foi observada. Este composto tem um efeito muito
maior no Gram+ do que bactérias gram-, para que ela seja difícil avaliar a importância desta
constatação.
(ii) Plasmid-mediated anti-séptico e desinfetante resistência em staphylococcus.
Methicillin-S. aureus (MRSA) resistências são das principais causas de Sepse em hospitais em todo o
mundo, embora nem todas as estirpes aumentaram virulência. Muitos podem ser referidos como
"epidemia" MRSA causa da facilidade com a qual eles podem se espalhar (91, 295, 317). Pacientes
particularmente alto risco são aqueles que estão debilitados ou immunocompromised ou que tenham
feridas abertas. Ele tem sido conhecido há vários anos que alguns anti-sépticos e desinfetantes são, no
âmbito do MIC, um pouco menos inibem as S. aureus estirpes que contêm um plasmídeos
que transportem genes codificação resistência ao gentamicina antibiótico a aminoglycoside (tabela 10).
Esses agentes biocidas incluem clorexidina, diamidinas e QACs, juntamente com brometo de etídio e
acridines.
(iii) Plasmid-mediated anti-séptico e desinfetante resistência em outras bactérias gram-positiva.
Coriynebacteria resistentes aos antibióticos podem estar implicado em infecções humanas, especialmente
no immunocompromised. ´Grupo JK´ coryneforms (Corynebacterium jeikeium) Verificou-se para ser
mais tolerante do que outros coryneforms o brometo de etídio desinfetantes ativadores e hexaclorofeno,
mas estudos com derivados plasmídeos contendo e plasmídeo-cured não produzidos nenhuma prova de
resistência de plasmidassociated (285). Enterococcus faecium estirpes mostrando alto nível de resistência
à vancomicina, gentamicina, ou ambos não são mais resistentes à clorexidina ou outros agentes não
antibióticos (9, 11, 20, 319). Além disso, apesar do amplo uso dentário de clorexidina, estirpes de
Streptococcus mutans permanecem confidenciais para ele (235). Até à data, portanto, há pouca ou
nenhuma evidência do plasmídeo-associados a resistência das bactérias gram nonstaphylococcal anti-
sépticos e desinfetantes.
(iv) Mutacional resistencia para antisepticos e desinfetantes.
Mutação cromossômica aos antibióticos foi reconhecida por décadas. Pelo contrário, foram efetuados
poucos estudos para determinar se a mutação confere resistência a anti-sépticos e desinfetantes. Ele foi,
no entanto, demonstrada há 40 anos (77, 78) que marcescens S., normalmente inibida por QACs, de 100
mg/ml, poderá adaptar a crescer em 100.000 mg de um QAC por mililitro. As células resistentes e
sensíveis tinham diferentes características de superfície (mobilidade eletroforética), mas resistência
poderia ser perdida quando as células foram cultivadas em mídia QAC-livre. Um problema associado a
QACs e clorexidina é a turvação produzida em meios de cultura líquido acima de uma certa concentração
(interação com ágar também ocorre), que sem dúvida poderia interferir com a determinação
do crescimento. Esta observação é reforçada pelas conclusões apresentadas por Nicoletti et al.
Mecanismos de resistência fúngica anti-sépticos e desinfetantes.
Em comparação com bactérias, muito pouco é conhecido sobre as maneiras em que fungos pode
contornar a ação de anti-sépticos e desinfetantes (104, 111, 296). Existem dois mecanismos gerais de
resistência (Tabela 12): (I) intrínseca resistência, uma propriedade natural ou o desenvolvimento de um
organismo (201); (ii) e adquiridos de resistência. Uma forma de resistência intrínseca, a parede da célula
apresenta uma barreira para reduzir ou excluir a entrada de um agente antimicrobiano. As provas a data
são um pouco irregular, mas os link de informações disponíveis de célula glucano de parede, espessura da
parede e relativamente porosidade para a susceptibilidade de Saccharomyces cerevisiae de clorexidina.
Protoplastos deste organismo elaborado pela glucuronidase na presença de bmercaptoetanol são lysed por
concentrações de clorexidina bem abaixo desses eficazes contra células (inteiras) "normais". Além disso,
a idade de cultura influencia a resposta do S. cerevisiae clorexidina; as paredes de células são muito
menos sensíveis a fase estacionária que na fase de crescimento logarítmico (208), ocupando muito
menos gluconato de clorexidina [C 14] (206). Gale (165) demonstrado um aumento da resistência de
Candida albicans para o polyenic B amfotericina antibiótico fenotípica como os organismos introduzida a
fase estacionária de crescimento, que foi atribuída às alterações de parede celular envolvendo tighter
reticuladores (74). Além disso, qualquer fator de aumento da atividade glucanase maior sensibilidade
amfotericina.
Mecanismos de Resistência Viral para Anti-sépticos e Desinfetantes.
Primeiros estudos sobre os efeitos dos desinfetantes sobre vírus foram revistos pelo Grossgebauer (189).
Alvos potenciais virais é o envelope viral, que contém lípidos e é uma membrana de unidade típica; o
capsídeo, que é principalmente de proteínas na natureza; e o genoma. Uma hipótese importante foi
apresentada em 1963 (258) e modificado em 1983 (259), no qual ele foi proposto que viral
susceptibilidade a desinfetantes poderia basear-se em se vírus eram "lipophilic" na natureza, porque eles
possuíam um envelope de lípidos (por exemplo, herpes simplex vírus [259]) ou "hidrofílicos" porque eles
não (por exemplo, o vírus [514]). Lípidos-envelopada vírus foram sensíveis desinfetantes lipophilic-tipo,
tais como 2-phenylphenol, tensoativos catiônicos (QACs), clorohexidina e isopropanol, bem como ao éter
e clorofórmio. Klein e deforest (259) classificam os vírus em três grupos (Tabela 16), A (contendo
de lípidos), B (não lipídeo picornaviruses) e C (outros vírus de não lipídeo maiores do que aqueles no
grupo B) e desinfetantes em dois grupos, largo-spectrum aqueles que inativados todos os vírus e
lipophilic aqueles que conseguiu desativar picornoviruses e parvoviruses.
Mecanismos de Resistência de Protozoários para Anti-sépticos e Desinfetantes.
Protozoários intestinais, tais como o Cryptosporidium parvum e Entamoeba histolytica, giardia
intestinalis, são todos potencialmente patogênicos para os seres humanos e têm um Cisto resistente,
transmissível (ou oocyst de Cryptosporidium).
Os desinfetantes disponíveis atualmente, ozônio é o mais eficaz cisticida de protozoários, seguido de
dióxido de cloro, iodo e cloro livre, os quais são mais eficazes do que os cloraminas . As formas de Cistos
são invariavelmente os mais resistentes à desinfetantes químicos . As razões para isso são desconhecidas,
mas que seria razoável supor que cistos, semelhantes aos esporos, ocupam menos moléculas desinfetantes
de solução que formas vegetativas.
Mecanismos de Resistência de Priões para Desinfetantes.
As encefalopatias espongiformes degenerativas (TDEs) formam um grupo de doenças neurológicas fatais
aos seres humanos e outros animais. TDEs são causados por priões, agentes protéicos anormais que
parecem não conter nenhum agente específico de ácidos nucleicos (385). Uma forma resistente à protease
anormal (PrPres) de uma proteína normal host está implicada no processo patológico. Priões são
considerados altamente resistentes a agentes físicos e químicos , embora o fato de preparações brutas
frequentemente serem estudadas, poderiam avaliar a verdadeira eficácia desses agentes . De acordo com
Taylor (503), não há atualmente nenhum procedimento de descontaminação conhecido que irá garantir a
completa ausência de infecciosidade nos tecidos infectados TDE processados por procedimentos
histopatológicos. Priões sobrevivem a tratamento ácido, mas um efeito sinérgico com autoclave além
de tratamento de hidróxido de sódio é observado. Formaldeído, óxido de etileno e glutaraldeído (pH
ácido) sem buffer têm pouco efeito sobre a infecciosidade, embora guanidina tiocianato, alguns fenóis,
hidróxido de sódio e cloro-liberador agentes (especialmente hipocloritos) são mais eficaze. Com a
informação atualmente disponível, é difícil explicar a resistência extremamente elevada de priões, salvar
a comentar que a proteína resistente à protease é anormalmente estável aos processos degradativos.

CONCLUSÕES.
É claro que microrganismos podem adaptar-se a uma variedade de condições ambientais físicas e
químicas, e, por conseguinte, não é surpreendente que a resistência ao uso extensivamente de anti-
sépticos e desinfetantes foi relatada. Os mecanismos que têm sido estudados, as mais importantes são
claramente intrínsecas, em especial a capacidade esporulante, adaptação de pseudomonas e os efeitos de
proteção de biofilme. Nestes casos, "resistência" pode ser usada incorretamente e "tolerância," definida
como efeitos de desenvolvimento ou de proteção que permitam que os microrganismos sobrevivam na
presença de um agente ativo, pode ser mais correta. Muitos desses relatórios de resistência têm
frequentemente questões paralelas, incluindo limpeza inadequada, utilização de produto incorreto
ou práticas de controle ineficaz de infecção, que não podem ser subestimadas. Alguns mecanismos
adquiridos (em especial com a resistência de metais pesados) também se revelaram ser clinicamente
significativas, mas na maioria dos casos, os resultados têm sido especulativos.