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Papel das Enzimas nas Indústrias

Farmacêuticas e de Biotecnologia 9
Bhupender Singu e Uday Annapure

Resumo
No mundo moderno, as enzimas não são apenas catalisadores, mas também
“ferramentas” que modificam o processo de acordo com a necessidade. As enzimas têm
funções-chave nas reações onde outras alternativas falham em fornecer os resultados
desejados. As principais características das enzimas são sua especificidade, reutilização
e não formação de subprodutos indesejados que podem contaminar o produto e o meio ambiente.
Essas características tornaram as enzimas uma escolha popular no setor biofarmacêutico.
O aumento do uso de enzimas também é atribuído à alta eficiência e baixo custo
alcançado pela adaptação de técnicas modernas, como melhoramento de cepas,
mutações, engenharia genética, tecnologia de DNA recombinante, etc. Além disso, a
atividade enzimática pode ser controlada por métodos físicos ou químicos tornando-as
aplicável a uma ampla gama de processos. A aplicação de enzimas em diversos campos
é possível devido à contínua pesquisa em biotecnologia. O mercado global de enzimas
no setor industrial está avaliado em 4,91 bilhões de dólares em 2015 e deve chegar a
9,74 bilhões de dólares em 2022, conforme relatado pela Stratistics Market Research
Consulting Pvt. Ltd. Os setores farmacêutico e de biotecnologia contribuem com uma
grande parte da geração de receita globalmente. Este capítulo fornece uma visão geral
das aplicações enzimáticas no setor biofarmacêutico, juntamente com o cenário atual
do mercado e as tendências futuras esperadas.

Palavras-chave

Enzimas · Biotecnologia · Biocatalisadores · Biossensores · Enzimas terapêuticas

B. Singu · U. Annapure (*)

Departamento de Engenharia e Tecnologia de Alimentos, Instituto de Tecnologia Química, Matunga, Mumbai,
Índia

# Springer Nature Singapore Pte Ltd. 2018 M. 167

Kuddus (ed.), Enzymes in Food Technology, https://
doi.org/10.1007/978-981-13-1933-4_9
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168 B. Singu e U. Annapure

9.1 Introdução

As enzimas têm sido usadas para fins terapêuticos há muitas décadas. Começou desde a
década de 1960 como uma terapia de substituição para deficiências genéticas por de Duve
(Vellard 2003). Várias décadas de pesquisa sobre síntese e comercialização de produtos à base
de enzimas trouxeram-no ao status atual compreendido. Enzimas são proteínas especializadas
em catalisar reações bioquímicas dentro e/ou fora das células vivas. Eles ajudam a combinar
moléculas para produzir novos produtos ou dividi-los em partes menores. As enzimas nas
indústrias farmacêuticas e de biotecnologia são usadas como ferramentas na fabricação de
ingredientes farmacêuticos ativos ou diretamente para fins terapêuticos como medicamento. A
competição de mercado é decidida principalmente por dois fatores, a saber, preço e qualidade
do produto.
No início, as reações catalisadas por enzimas eram muito caras e demoradas. A pesquisa e os
desenvolvimentos no campo de melhoramento de cepas, mutações, engenharia genética,
tecnologia de DNA recombinante, etc. levaram ao desenvolvimento bem-sucedido de enzimas
mais ativas e estáveis. Isso também levou ao desenvolvimento de tecnologia de imobilização
de enzimas para diversas aplicações no setor industrial. Consequentemente, as enzimas podem
ser imobilizadas e reutilizadas até que sua atividade seja reduzida, enquanto os produtos
químicos são neutralizados na primeira reação. A imobilização enzimática também reduziu
drasticamente o custo do processo e, portanto, o custo dos produtos finais.

A qualidade de um produto depende dos reagentes utilizados, bem como do processo

envolvido durante a fabricação. Todos os produtos químicos utilizados nas indústrias não são
seguros para consumo. Observou-se que os pacientes sofrem com efeitos colaterais
principalmente quando os medicamentos contêm vestígios de substâncias químicas nocivas do
método usado para fabricação. Também os produtos químicos usados em uma reação
geralmente adicionam subprodutos à mistura de reação, reduzindo assim a qualidade do produto
e introduzindo a necessidade de mais purificação. Em comparação com as drogas puramente
sintetizadas quimicamente, as enzimas são comparativamente mais seguras de usar. Os
subprodutos das reações enzimáticas não são prejudiciais; a regioespecificidade dessas reações
reduz os custos de purificação. A necessidade de enzimas por unidade também é muito menor
devido à sua maior eficiência de reação e natureza reciclável. Além disso, as mesmas enzimas
podem catalisar múltiplas reações até que a atividade reduza abaixo de sua viabilidade comercial.
O comitê de enzimas (CE) da União Internacional de Bioquímica e Biologia Molecular
(IUBMB), formado em 1955, estabelece as diretrizes para classificação e nomenclatura de
enzimas com base nas reações que catalisam. O objetivo do IUBMB é apoiar o crescimento e
desenvolvimento da bioquímica e biologia molecular para a melhoria da humanidade.

9.2 Enzimas Terapêuticas

Enzimas terapêuticas são aquelas enzimas que podem ser usadas no tratamento médico de
várias doenças. Estas enzimas podem ser utilizadas isoladamente ou em combinação com
outras terapias para a cura/prevenção desejada. Usando a enzima como preventivo ou terapêutico
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 169

a medicina é uma forma moderna de tratamento que oferece vantagens adicionais de alta
precisão, forte afinidade e especificidade para a localização do alvo com efeitos colaterais
mínimos (Mane e Tale 2015).

9.2.1 Fontes de Enzimas Terapêuticas

Existem três fontes de enzimas, a saber, plantas, animais e microorganismos.

9.2.1.1 Enzimas de Plantas

As enzimas extraídas de plantas são principalmente enzimas de degradação de
macromoléculas. As enzimas vegetais são usadas como medicamentos na forma de cápsulas
contendo uma mistura de enzimas que ajudam a apoiar a digestão e formuladas especificamente
para pacientes veganos ou vegetarianos. As enzimas são liofilizadas (liofilizadas) e embaladas
em uma cápsula ou outras formas de material de parede. Estes são armazenados em
condições secas e frescas. Essas enzimas auxiliam na degradação de gorduras, fibras,
lipídios, proteínas, carboidratos e outras macromoléculas que auxiliam na liberação de
vitaminas e nutrientes dos alimentos para serem absorvidos pelas paredes intestinais após a
ingestão. As enzimas vegetais também incluem lactase para apoiar pacientes intolerantes à
lactose que ajudam na digestão de produtos lácteos.
Por exemplo, NOW Health Group, Inc. desenvolveu um produto chamado “NOW Plant
Enzymes”. O produto contém enzimas dietéticas para tratar pacientes que sofrem de
problemas de indigestão. Enzimas como protease, protease ácido-estável, amilase, lipase,
celulase, lactase, papaína, bromelaína, etc. são isoladas, purificadas separadamente e
misturadas na proporção desejada e acondicionadas em uma cápsula.

Desvantagens das enzimas

vegetais As plantas cultivadas para extração comercial de enzimas, como abacaxi e
mamão, geralmente são expostas a contaminantes químicos agressivos de pesticidas,
conservantes e promotores de crescimento. Uma variedade de pesticidas nocivos são
usados em diferentes países para melhorar a produtividade. Nessas situações, os estudos
relacionados ao efeito de pesticidas, conservantes e promotores de crescimento em nível
celular e molecular são muito limitados. Além disso, os vestígios de tais substâncias
químicas nocivas no produto final também devem ser estudados, pois esta pode ser a
razão para alguns pacientes desenvolverem reações alérgicas a enzimas vegetais. Além
disso, as enzimas vegetais não são totalmente ativas à temperatura do corpo humano;
eles geralmente requerem temperaturas mais altas para se tornarem totalmente ativos.
Além desses fatores, a purificação de enzimas de fontes vegetais é difícil em comparação
com fontes bacterianas. Isto aumenta o custo da formulação contendo enzima.

9.2.1.2 Enzimas Animais

Enzimas , hormônios e proteínas derivadas de animais eram amplamente utilizadas antes do
desenvolvimento da tecnologia moderna. O hormônio mais comum de origem animal foi a
insulina utilizada para pacientes com diabetes tipo I. A enzima mais comum derivada de
origem animal foi do suco pancreático contendo enzimas digestivas. Bruto
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170 B. Singu e U. Annapure

extratos enzimáticos e tecidos animais, como o tecido pancreático de porcos, foram

coletados nos matadouros e purificados para quaisquer outros usos. A tecnologia de DNA
recombinante simplificou certas dificuldades. Os genes humanos responsáveis pela
codificação de enzimas ou hormônios são isolados com a ajuda de tesouras moleculares e
incorporados no sistema da célula hospedeira que geralmente são bactérias ou leveduras.
Apesar de possuir essa tecnologia, algumas empresas ainda colhem enzimas animais e as
comercializam na forma de auxiliares de digestão e outros produtos. No entanto, as
enzimas de origem microbiana ou vegetal têm várias vantagens adicionais quando
comparadas às enzimas animais. A seguir está uma lista de enzimas animais usadas nas
indústrias anteriormente; agora, a maioria das enzimas foi substituída por enzimas microbianas (Tabela 9.

Desvantagens das enzimas animais

Enzimas de origem animal não são preferidas por pacientes de determinada etnia. A
atividade e a disponibilidade de enzimas de origem animal são muito limitadas e, portanto,
não podem atender às necessidades dos pacientes. A qualidade das enzimas não é
consistente devido à diferença nas condições sanitárias da fonte, ou seja, dos animais.
Além disso, o alto nível de impurezas exige etapas de purificação, tornando o produto final caro.

9.2.1.3 Enzimas Microbianas

Esta é a era das enzimas microbianas. Cerca de 88% das enzimas utilizadas nas
indústrias são de origem microbiana. Espera-se que a participação no mercado de
enzimas microbianas aumente em até 98% nos próximos anos. Além das enzimas, os
micróbios são a primeira escolha para a síntese de hormônios recombinantes, proteínas,
antioxidantes, metabólitos secundários e outras macromoléculas. O aumento da
pesquisa sobre diferentes microrganismos em várias instituições em todo o mundo
indica a tendência futura das indústrias farmacêuticas e de biotecnologia.
Os micróbios são preferidos como fonte primária de enzimas devido ao baixo custo de
fabricação. Isso se deve à pronta disponibilidade de matéria-prima para fermentação e
menor tempo de fabricação. As enzimas microbianas são mais previsíveis, controláveis e
altamente específicas, e o processo é fácil de entender em comparação com enzimas de
outras fontes. Além disso, a manipulação genética em micróbios pode ser

Tabela 9.1 Lista de enzimas derivadas de animais

Animal Fonte
órgão de enzimas Aplicativo Função

Catalase Fígado Indústria alimentícia Reduz o peróxido de hidrogênio em alimentos

Serina Suco comida, couro Enzima serina protease utilizada na produção de proteínas
protease pancreatico hidrolisadas de origem vegetal e animal.
fontes

Lipase Suco Alimentos (indústrias Hidrólise, transesterificação, esterificação

pancreatico de gorduras e óleos)

Queijo Coalho Abomaso É uma enzima protease que coagula a caseína no leite

Tripsina Suco Biotecnologia Usado para converter pró-insulina em insulina

pancreatico
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 171

facilmente realizado para superprodução de enzimas. Na tecnologia de DNA recombinante,

as células hospedeiras microbianas são induzidas a produzir a mesma enzima que é produzida
no corpo humano. Esta tecnologia é explicada em detalhes na Sec. 9.4. Em comparação com
o sistema microbiano, as células vegetais e animais são mais complexas de manusear e
contêm materiais potencialmente nocivos, incluindo compostos fenólicos (de plantas),
inibidores de enzimas endógenos e proteases. As enzimas microbianas mais comumente
usadas são enzimas digestivas, como proteases para digerir proteínas presentes nos
alimentos, lipases para digerir gorduras, e amilases para digerir alguns carboidratos.
Essas enzimas digestivas também estão comercialmente disponíveis na forma de produtos
de enzimas pancreáticas recombinantes, como aristozima (diastase e pepsina líquida), Aristo
Pharmaceuticals Pvt. Ltd. Os diferentes tipos de enzimas microbianas usadas nas indústrias
estão listados na Tabela 9.2.

9.3 Por que as enzimas são muito específicas?

As enzimas são produzidas para uma tarefa específica e produzidas apenas quando
requeridas por uma célula viva. Esta produção é uma reação bioquímica complexa que ocorre
com a mais alta precisão. Algumas enzimas são metabólitos secundários que precisam ser
acionados por fatores externos, como químicos, fisiológicos ou mecânicos. O processo de
produção da enzima (metabólito secundário) inicia-se com a disponibilidade do substrato e o
contato feito com o receptor celular externamente. Os sinais são então enviados para o DNA
que contém o código para a produção da enzima específica. Agora a célula inicia o processo
de transcrição, tradução e modificação pós-traducional.
Após a modificação pós-traducional, as enzimas ou proteínas entram no aparelho de Golgi a
partir do retículo endoplasmático, onde o aparelho de Golgi separa as macromoléculas
(enzimas, hormônios e proteínas) e as envia ao seu destino. Se alguma proteína defeituosa
for identificada, ela será marcada e enviada ao lisossomo para degradação, conhecida como
autofagia. O processo de produção de enzimas é projetado de tal forma que apenas as
enzimas ativas podem sair com sucesso do aparelho de Golgi e as enzimas defeituosas são
recicladas. Assim, a enzima específica é disponibilizada apenas para a reação.

9.4 Enzimas Recombinantes

A tecnologia de DNA recombinante é um ramo da ciência que lida com a modificação de

moléculas de DNA usando técnicas laboratoriais de recombinação genética.
A ideia de DNA recombinante foi proposta pela primeira vez por Peter Lobban, um estudante
de pós-graduação do Departamento de Bioquímica da Faculdade de Medicina da Universidade
de Stanford (Kayser e Müller 2005). DNAs de duas espécies diferentes são combinados para
formar uma molécula de DNA recombinante (também chamada de DNA quimérico) para
produzir um produto desejado da célula hospedeira que é de valor para a pesquisa científica
no campo da medicina, agricultura, meio ambiente e indústria. As enzimas são proteínas, e as
proteínas podem ser modificadas pela compreensão da codificação da sequência de DNA. Natural
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172 B. Singu e U. Annapure

Tabela 9.2 Lista de enzimas microbianas

Enzima Organismo Aplicativo

Enzimas bacterianas
ÿ-amilase Bacilo Hidrólise enzimática do amido
Asparaginase Escherichia A asparaginase previne a formação de acrilamida e alguns
coli aminas heterocíclicas em alimentos assados
Asparaginase ajuda a matar células cancerosas de L asparagina

Glicose Bacilo Usado na produção de xarope de milho rico em frutose (HFCS)

isomerase
Penicilina Bacilo Biossíntese de penicilina e cefalosporina
amidase
Protease Bacilo Usado em detergentes e indústrias de biotecnologia
Pululanase Klebsiella Xarope de maltose, produção de xarope de glicose e ciclodextrina
Produção
Enzimas fúngicas
ÿ-amilase Aspergillus Usado para produção de etanol onde a enzima quebra o amido
em açúcares fermentáveis
Aminoacilase Aspergillus Tratamento de distúrbios neurológicos
Catalase Aspergillus Para eliminar o peróxido de hidrogênio dos alimentos
Celulase Trichoderma Usado para a produção de etanol onde a enzima quebra os resíduos
celulose em açúcares fermentáveis
Dextranase Penicillium Usado para eliminar a dextrina do caldo de cana
Glicose Aspergillus Usado para identificar glicose livre no soro sanguíneo
oxidase
Lactase Aspergillus Usado na indústria de laticínios

Lipase Rhizopus Usado em indústrias de petróleo e alimentos

Rede de corrida Mucor miehei É uma enzima protease que coagula a caseína no leite para
produção de queijo
Pectinase Aspergillus Usado em indústrias de celulose e papel
Pectina liase Aspergillus Usado em indústrias de celulose e papel
Protease Aspergillus Indústrias de detergentes e biotecnologia
Enzimas de levedura
Invertase Saccharomyces Usado em indústrias de chocolate para quebrar sacarose
Lactase Kluyveromyces Usado na indústria de laticínios
Lipase Candida Usado em indústrias de petróleo e alimentos

Rafinase Saccharomyces Usado para remover a estaquiose e a rafinose da soja

leite

enzimas têm certas limitações em relação à estabilidade, atividade, eficiência, rendimento,

etc. No caso de enzimas recombinantes, o DNA que codifica uma enzima altamente eficiente
de qualquer fonte é combinado com o DNA da célula hospedeira que tem a capacidade de
produzi-lo com maior rendimento. A recombinação genética pode ser feita com a ajuda de
vetores que podem transportar a molécula de DNA estranha para a célula hospedeira e colocá-la em
entre a molécula de DNA do hospedeiro. A demanda por enzimas recombinantes é rapidamente
crescente no setor industrial. As indústrias começaram a adotar
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 173

Aplicação Comercial de Enzimas

em Indústrias Biofarmacêuticas

Enzimas usadas em Enzimas usadas em kits de análise Terapia Enzimas usadas em Enzimas usadas como
Processo Industrial para diagnóstico e de Reposição Pomadas Tópicas Medicamentos Sistêmicos
Modificação Reações bioquímicas Enzimática (TRE).

Fig. 9.1 Classificação das enzimas utilizadas nas indústrias biofarmacêuticas

enzimas sobre enzimas naturais por sua alta atividade, menor tempo de reação e facilidade
de controle de reação. Embora as enzimas recombinantes sejam caras, mas contínuas
pesquisa e concorrência de mercado reduzirão o custo no futuro.

9.5 Enzimas Usadas em Indústrias Biofarmacêuticas

As enzimas utilizadas nas indústrias biofarmacêuticas podem ser classificadas com base em
sua aplicação como mostrado na Fig. 9.1.

9.5.1 Enzimas Utilizadas na Modificação de Processos Industriais

9.5.1.1 Proinsulina para Insulina

A insulina é um hormônio humano usado para o tratamento de pacientes com diabetes tipo I. Isto é
agora produzidos a partir de fontes microbianas, ou seja, Escherichia coli e Saccharomyces
cerevisiae. Durante a síntese de insulina, a etapa de conversão da pró-insulina em
a insulina é catalisada por enzimas como tripsina e carboxipeptidase. Eles são usados para
removendo as cadeias laterais indesejadas clivando as ligações peptídicas.

9.5.1.2 Tripsina
A tripsina (EC 3.4.21.4) foi descoberta em 1876 por Wilhelm Kühne. Também é conhecido
como serina protease encontrada no intestino de muitos vertebrados, onde hidrolisa a
proteínas. A digestão auxiliada pela tripsina é um passo muito importante, pois proteínas muito grandes
não pode ser absorvido pelas paredes do intestino. A tripsina é produzida no
pâncreas na forma de proenzima tripsinogênio que é liberado no pequeno
intestino para ativar a tripsina. Agora a tripsina recombinante é produzida através de
Fermentação em batelada alimentada usando Escherichia coli recombinante na biotecnologia
plantas de produção. A tripsina cliva as ligações peptídicas na extremidade carboxila do amino
ácidos lisina ou arginina, exceto quando esses aminoácidos são seguidos por prolina. Isto é
amplamente utilizado na modificação de proteínas como a pró-insulina em insulina. Isto
processo biotecnológico é conhecido como proteólise da tripsina ou tripsinização.
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174 B. Singu e U. Annapure

9.5.1.3 Carboxipeptidase B (CPB)

A carboxipeptidase B (número EC 3.4.17.2) também é conhecida como protaminase,
carboxipeptidase B pancreática, peptidil-L-lisina e L-arginina hidrolase. Esta enzima tem a
capacidade de hidrolisar a cadeia peptídica na extremidade carboxi-terminal de uma proteína
ou cadeia peptídica. A carboxipeptidase B é utilizada na produção de insulina recombinante
humana e no processamento de anticorpos monoclonais (IgG1). A carboxipeptidase é
altamente ativa na faixa de pH de 5 a 12 e temperatura máxima de até 60 C para atuar em
aminoácidos como arginina e lisina.

9.5.1.4 Penicilina Semissintética A

enzima penicilina acilase se enquadra na família das hidrolases, que atuam em ligações de
nitrogênio de carbono que não são ligações peptídicas. Esta enzima é utilizada no processo
de produção de penicilina semi-sintética catalisando a reação da penicilina G e H2O como
substrato para produzir carboxilato e 6-aminopenicilanato. Depois de ganhar resistência à
penicilina por micróbios, a penicilina semi-sintética foi desenvolvida, o que ampliou sua
eficácia contra uma ampla gama de microrganismos infecciosos, como espécies
estreptocócicas e estafilocócicas, gram-negativos aeróbicos e muitos organismos anaeróbios
(Oshiro 1999). A penicilina semissintética apresenta características de flexibilidade como
modo de administração, combinação com outros fármacos e baixo custo de produção em
relação a outros antibióticos.

9.5.1.5 Pré-tratamento para Extração de Compostos Medicinais O pré-

tratamento enzimático para extração de compostos medicinais de tecidos vegetais tem
mostrado melhora na recuperação do aroma. A maioria dos medicamentos ayurvédicos são
preparados a partir de plantas e ervas que são sensíveis ao calor. Os métodos tradicionais,
como a secagem a baixa temperatura e a extração de compostos medicinais de ervas
frescas, são demorados. Nesses casos, aromas e óleos podem ser extraídos com eficiência
por meio de pré-tratamento enzimático. Enzimas como celulases, hemicelulases e pectinases
e uma combinação destas têm sido usadas para o pré-tratamento de vários materiais
vegetais (Grumezescu 2017). Essas enzimas danificam eficientemente a parede celular da
planta e as hidrolisam, o que aumenta a permeabilidade, resultando em maior rendimento
dos compostos bioativos desejados. A aplicação de enzimas no campo da extração de
aromas de materiais vegetais é uma área relativamente nova, que demanda extensa
pesquisa e desenvolvimento para se estabelecer como uma técnica promissora.

9.5.2 Enzimas Usadas em Kits de Análise para Diagnóstico e Reações

Bioquímicas

9.5.2.1 Kits de diagnóstico de diabetes O

diabetes é uma doença que está afetando centenas de milhões de pessoas em todo o
mundo. Para controlar o diabetes, os pacientes precisam manter uma dieta adequada e
monitorar o nível de glicose no sangue. A glicose oxidase é uma enzima amplamente
utilizada para a quantificação da glicose livre nos fluidos corporais. Esta enzima também é
conhecida como oxidorredutase que catalisa a oxidação da D-glicose para D-glucono-1,5-lactona e hidrogên
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 175

OH

O
HO
HO OH

HO

ÿ-D-glicose
OH

glicose O
+O2 HO + H2O2
oxidase HO
HO O

OH
oxigênio D-glucono peróxido de
1,5-lactona hidrogênio
HO
HO
HO
OH

ÿ-D-glicose

Fig. 9.2 Reação catalisada pela glicose oxidase

peróxido. Foi isolado e purificado pela primeira vez de Aspergillus niger por Detlev Muller em
1928. Também tem outras aplicações no campo da biotecnologia, incluindo biossensores em
nanotecnologia (Fig. 9.2).

9.5.2.2 Kit ELISA O

ensaio imunoenzimático (ELISA), também conhecido como ensaio imunoenzimático (EIA), é
uma técnica usada para determinar a presença de um antígeno ou anticorpo na amostra. Os
anticorpos são proteínas em forma de Y produzidas pelo corpo (células plasmáticas) em
resposta a substâncias externas nocivas chamadas antígenos. Enzimas como peroxidase de
rábano (HRP) e fosfatase alcalina (AP) são geralmente usadas nesses testes.

A tecnologia de ELISA tem sido amplamente utilizada para a preparação de ferramentas

de diagnóstico no setor da medicina e como controle de qualidade em indústrias alimentícias.
Várias técnicas de ELISA são usadas dependendo da natureza da amostra. As técnicas mais
comumente usadas em ELISA são explicadas no diagrama (Fig. 9.3).

9.5.2.3 Kit PCR A

reação em cadeia da polimerase (PCR) também é conhecida como termociclador ou
amplificador de DNA usado na produção de múltiplas cópias de uma determinada região de
DNA usando fita existente conhecida como DNA modelo. Essa região de DNA pode ser um
gene de interesse ou um marcador genético usado por investigadores forenses para combinar
o DNA da cena do crime com os suspeitos. O DNA amplificado pode ser usado para
sequenciamento, identificação através da visualização da eletroforese em gel ou incorporação
de genes em um plasmídeo (vetor) para expressão gênica na célula hospedeira. A PCR
também tem aplicação em áreas como medicina, pesquisa em biologia molecular, diagnóstico médico, ciências
A enzima DNA polimerase é adicionada à reação que utiliza os nucleotídeos livres e
sintetiza uma nova fita de DNA usando a fita existente como molde. A DNA polimerase também
é chamada de Taq polimerase isolada da bactéria resistente ao calor Thermus aquaticus.
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176 B. Singu e U. Annapure

Fig. 9.3 Diferentes métodos de teste ELISA

Tabela 9.3 Exemplo de endonuclease de restrição tipo II

Enzima de restrição Fonte Sequência de reconhecimento

BamH I Bacillus amyloliquefaciens H 50 G --- GATCC 30
30 CCTAG --- G 50
HindIII Haemophilus influenzae 50 A --- AGCTT 30
30 TTCGA --- A 50

9.5.2.4 Endonuclease de Restrição

As endonucleases de restrição também são conhecidas como enzimas de restrição ou enzimas moleculares.
tesouras que clivam o DNA de fita dupla na sequência nucleotídica de reconhecimento específica ou
próximo a ela, conhecida como sítios de restrição. As enzimas de restrição são classificadas em
tipos I, II, III e IV com base em sua sequência de reconhecimento, composição de subunidades,
posição de clivagem e requisitos de cofatores (Sistla e Rao 2004). Todas as restrições
enzimas têm a capacidade de fazer duas incisões em cada espinha dorsal de fosfato do
DNA de dupla hélice e cola com a ajuda da DNA ligase (Tabela 9.3). Modelo
A endonuclease de restrição II é mais comumente usada para biologia molecular
aplicações, pois reconhecem sequências estereotipadas e produzem um
padrão de clivagem. As enzimas de restrição são nomeadas a partir da cepa celular em que são
isolado de. Os exemplos de enzimas usadas em diagnóstico e biologia molecular
kits estão listados na Tabela 9.4.

9.5.3 Terapia de Reposição Enzimática (TRE) ou Suplementos

para Pacientes Deficientes para Enzima Específica

A terapia de reposição enzimática (TRE) é um tratamento médico que substitui um

enzima que é deficiente ou ausente no corpo humano. Geralmente, o modo de droga
a entrega é por injeções intravenosas (IV) que contém enzimas e cápsulas orais para
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 177

Tabela 9.4 Lista de enzimas usadas em kits de diagnóstico

Enzima Reação Usar

Asparaginase L-asparagina H2O ! L aspartato + Leucemia (Verma et al. 2007)

NH3
Colagenase Hidrólise de colágeno L- Úlceras da pele (Sani e Navanietha Krishnaraj nd)
Glutaminase glutamina H2O ! L Leucemia (Sani e Navanietha Krishnaraj nd)
glutamina + NH3
Rodanase 2 2
S2O3 + CN! SO3 Intoxicação por cianeto (Cipollone et al. 2008) (Sani
+ SCN e Navanietha Krishnaraj nd)
Hidrólise de RNA de ribonuclease Antiviral (Moelling et al. 2014)
ÿ-lactamase penicilina! penicilato Usado para alergia à penicilina
Plasminogênio Estreptoquinase! plasmina Coágulos sanguíneos (“Composição, método e kit para
preparando plasmina” 2009)
Tripsina Inflamação por hidrólise de proteínas (Stolarow et al. 2015)
Uricase Urato + O2 ! Gota alantoína (Mulyasuryani e Srihardiastutie 2011)
Uroquinase Plasminogênio! plasmina Coágulos sanguíneos (Blinc et al. 1991)

pacientes que sofrem de distúrbios do sistema digestivo. A terapia de reposição enzimática é

disponível para algumas doenças de armazenamento lisossomal, como Hurler-Scheie (MPS EU),
Síndrome de Hunter (MPS) II), síndrome de Maroteaux-Lamy (MPS VI), doença de Gaucher,
Doença de Fabry, Doença de Pompe (Ries 2017) e fibrose cística. A TRE não cura a
doença ao reparar defeitos genéticos, mas fornece a enzima altamente ativa ou conjunto
de enzimas que o paciente é deficiente em produzir (Ries 2017). Combinado severo
A imunodeficiência (SCID) também é tratada pela TRE que é causada pela adenosina
deficiência de desaminase (Booth et al. 2007).
Tratamentos alternativos para pacientes com tal doença com enzimas ou proteínas
deficiências são a terapia genética, transplante de células-tronco derivadas da medula óssea e
terapia de redução de substrato (Ries 2017).

9.5.3.1 Intolerância à Lactose

A lactose é um dímero de açúcar feito de galactose e glicose que é encontrado no leite
e outros produtos lácteos. A intolerância à lactose é a condição em que algumas pessoas
incapazes ou têm capacidade diminuída de digerir a lactose. Lactose não digerida, quando
movendo-se através do intestino grosso, pode causar sintomas desconfortáveis, como
inchaço, gases crônicos, dor abdominal, náusea, e diarréia (Instituto Nacional de
Diabetes e Doenças Digestivas e Renais 2014). Os sintomas variam dependendo
sobre a concentração de lactose não digerida no intestino delgado. Dez por cento
dos caucasianos e 80% dos não caucasianos sofrem de intolerância à lactose. Algum
medicamentos à base de enzimas disponíveis no mercado são mencionados abaixo.

• Prolactazyme Plus é um nome comercial para o produto que contém a combinação de

as enzimas como bromelina, lactase, lipase e papaína com Lactobacillus
salivarius e Lactobacillus acidophilus.
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178 B. Singu e U. Annapure

• Prolactazyme Forte é outro produto que contém a combinação de enzimas como bromelaína,
lactase, lipase, papaína e amilase com Lactobacillus bulgaricus e Lactobacillus acidophilus.

9.5.3.2 Fibrose Cística A

fibrose cística (FC) é um distúrbio genético que afeta principalmente os pulmões, bem como
o pâncreas, fígado, rins e intestino (O'Sullivan e Freedman 2009). É uma doença crônica que
reduz severamente o tempo de vida do paciente. A fibrose cística é caracterizada pela
formação de muco espesso e pegajoso que pode danificar diferentes órgãos do corpo. Esse
muco anormal pode obstruir as vias aéreas, levando a problemas respiratórios graves e
infecções microbianas nos pulmões. Na maioria dos pacientes com fibrose cística, o muco
bloqueia os ductos do pâncreas, portanto, reduz a produção de insulina e bloqueia as
enzimas digestivas que chegam ao intestino delgado para a digestão dos alimentos.

A obstrução do ducto pancreático resulta na deficiência de:

• Protease que torna o paciente incapaz de quebrar as proteínas da dieta em

aminoácidos.
• A amilase é uma enzima que catalisa a hidrólise de moléculas de carboidratos e é incapaz
de quebrar as macromoléculas em monômeros para serem absorvidos. • Lipase que
catalisa a quebra de lipídios impede a absorção de gordura e
proteínas no trato intestinal.

Devido à falta dessas enzimas, o corpo não recebe os nutrientes necessários para
crescimento e reprodução de células saudáveis e, portanto, afeta muitos órgãos.
A suplementação externa das enzimas deficientes pode ajudar os pacientes.

9.5.3.3 Pancrelipase A
pancrelipase é um fármaco classificado como digestivo. A preparação contém alta
concentração de enzimas digestivas, protease, amilase e lipase necessárias para a
digestão de proteínas, amido e gorduras, respectivamente. Basicamente, substitui as
enzimas que o corpo não consegue produzir, que são vitais para a quebra e absorção
de nutrientes. Previne a desnutrição e outras complicações devido à falta de absorção
de nutrientes necessários para o crescimento e reparo celular. Os cientistas estão
separando a lipase, protease e amilase e purificando-as independentemente para evitar
a ligação cruzada de proteínas. Desta forma, eles podem desempenhar individualmente suas funções.

9.5.3.4 DNase Há
mais de 30 anos, acreditava-se que a DNase I pancreática bovina poderia reduzir o aumento
da viscosidade causado por altas secreções purulentas de DNA extracelular que é liberado
pelos leucócitos (Shak et al. 1990). Normalmente, a enzima DNase é encontrada na saliva e
na secreção pancreática, mas os pacientes que sofrem de fibrose cística são incapazes de
produzi-la. Nesses casos, suplementos externos de enzimas são
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 179

recomendado. Pulmozyme (DNase) é uma enzima geralmente inalada por um nebulizador,

que ajuda a reduzir a espessura do muco e a quebrar o muco pegajoso nos pulmões, tornando
mais fácil tossir e respirar. Devido aos avanços da medicina e das indústrias farmacêuticas, o
desenvolvimento de enzimas digestivas permite que a maioria das crianças com fibrose cística
seja relativamente saudável até atingir a idade adulta. Isso é resultado do desenvolvimento
alcançado na reposição enzimática suplementar na forma de duas marcas farmacêuticas,
pancrelipase e Pulmozyme DNase.

9.5.3.5 Doença de Pompe A

doença de Pompe, também chamada de distúrbios de armazenamento lisossomal (LSDs) ou doença de
armazenamento de glicogênio tipo II, é um defeito enzimático hereditário que geralmente ocorre na infância.
A deficiência da enzima ÿ-glicosidase ácida leva ao acúmulo de glicogênio no lisossomo,
devido ao qual as células musculares e nervosas são danificadas. Essa enzima normalmente
catalisa reações que convertem glicogênio em monossacarídeos. A deposição de glicogênio
na ausência de ÿ-glicosidase ácida causa sérios danos a vários tecidos do corpo, como fígado,
músculos esqueléticos, cardíacos e particularmente o sistema nervoso. A doença foi
identificada pela primeira vez pelo patologista holandês JC
Pompa em 1932 (Zschocke et al. 2016). Lumizyme e Myozyme (alglucosidase alfa) são os
produtos comercializados da enzima ÿ-glucosidase ácida. Todos esses medicamentos são
administrados na forma de modo intravenoso. A lista de doenças que podem ser tratadas pela
terapia de reposição enzimática (TRE) está descrita na Tabela 9.5.

9.5.4 Enzimas Usadas em Pomadas Tópicas

As pomadas são a substância oleosa lisa esfregada nas superfícies do corpo, como a pele ou
a membrana mucosa, para fins medicinais ou cosméticos. As pomadas contêm drogas que
podem agir na pele ou ser absorvidas pela pele para ação sistêmica. As enzimas possuem
propriedades desbridantes, antioxidantes e antimicrobianas devido às quais foram incorporadas
nas pomadas e cremes. Estudos clínicos mostraram que a combinação de enzimas com a
medicina convencional demonstra efeitos sinérgicos.

9.5.4.1 As feridas de
colagenase podem ser curadas mais rapidamente apenas quando células e tecidos danificados são
removidos para que o corpo possa regenerar novos tecidos saudáveis. O colágeno é uma proteína que
une e mantém células e tecidos juntos, como músculos, pele, ossos e tendões. Colagem nasal é uma
endopeptidase com atividade de desbridamento que digere colágeno nativo em células e tecidos
danificados dentro das camadas da pele e ajuda a recuperar queimaduras graves, úlceras na pele, etc.
A pomada tópica de colagenase foi comercializada pela primeira vez em 1959 isolada de Clostridium
histolyticum. A pomada Collagenase SANTYL é uma terapia enzimática ativa comercialmente disponível
e aprovada pela Health Canada que tem a capacidade de remover tecido necrótico de feridas em nível
microscópico.
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180 B. Singu e U. Annapure

Tabela 9.5 Lista de enzimas usadas na terapia de reposição enzimática

Doença Enzima Função enzimática

Doença de Fabry Agalsidase Fabrazyme (agalsidase beta) reduz a quantidade

beta de uma substância chamada globotriaosilceramida
(GL-3)
Doença de Fabry Agalsidase Replagal (agalsidase alfa) degrada o
alfa substrato glicoesfingolipídeo (Gb3)
Doença da mão esquerda Imiglucerase Cerezyme (imiglucerase) quebra o glicocerebrosídeo
lisossomal
Taliglucerase Elelyso (taliglucerase alfa) funciona catalisando
alfa a hidrólise de glucocerebrosídeo não funcional em
glicose, derivada de plantas (cenoura)

Doença de Gaucher tipo I alfa-velaglucerase VPRIV (velaglucerase alfa) degrada o glicocerebrosídeo

lisossomal hidrolítico
Alglucerase Alglucerase ajuda na quebra de
glucocerebroside
Deficiência de lipase ácida Sebelipase Kanuma (sebelipase alfa) decompõe as gorduras
lisossomal (doença de alfa (lipídios), como triglicerídeos e colesterol
Wolman/CESD) ésteres

Doença de Hurler-Scheie e Iduronidase A enzima Aldurazyme (iduronidase) atua por

doença de Scheie MPS I degeneração de glicosaminoglicanos, como sulfato de
dermatan e sulfato de heparan
Síndrome de Hunter Idursulfase Elaprase (idursulfase) e Hunterase (idursulfase
MPS II beta) que ajudam a quebrar os glicosaminoglicanos
(GAGs)
Síndrome de Morquio A MPS Elosulfase alfa BioMarin's Vimizim (elosulfase alfa) substituir a enzima N-
CUBA acetilgalactosamina-6-sulfatase ausente GALNS

Síndrome de Maroteaux-Lamy Galsulfase Naglazyme (galsulfase) aumenta o catabolismo

dos glicosaminoglicanos (GAGs)

9.5.4.2 Papaína/Ureia Pomada A

papaína é uma enzima extraída do mamão que apresenta propriedades anti-inflamatórias.
A papaína também mostrou efeito benéfico contra infecções, inchaços e edemas. No
período antigo, os índios e nativos americanos tinham uma forma tradicional de cura
aplicando uma fatia de mamão e sementes moídas na pele infectada. Após pesquisa e
desenvolvimento bem-sucedidos, hoje podemos usar pomadas contendo papaína e outras
enzimas (Simonsohn 2000). Pomadas à base de enzimas provaram ser muito valiosas. As
enzimas limpam o leito da ferida, auxiliam na cicatrização, previnem cicatrizes e aliviam a
dor. A pomada de papaína/ureia é um agente de desbridamento e ajuda na remoção de
tecidos danificados ou infectados em lesões agudas ou crônicas, como úlceras de pressão,
úlceras diabéticas, úlceras varicosas, feridas infectadas traumáticas, etc.
Allanzyme, Accuzyme, Allanfil e Ethezyme são os nomes comerciais da pomada de
papaína/ureia comercialmente disponíveis.
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 181

9.5.5 Medicamentos Sistêmicos à Base de Enzimas

Alternativa à terapia de reposição enzimática (TRE), existem alguns medicamentos sistêmicos

baseados em enzimas que estão disponíveis e curam a doença, enquanto a TRE apenas
sustenta a vida normal, mas não cura a doença. Hoje, os medicamentos à base de enzimas
estão comercialmente disponíveis para apenas um punhado de doenças, mas vários
medicamentos estão em andamento e prontos para serem comercializados.

9.5.5.1 Leucemia A
leucemia é um câncer que começa geralmente na medula óssea e entra no sangue. Isso
acontece devido à superprodução de glóbulos brancos anormais que fazem parte do sistema
imunológico e são responsáveis pela luta contra os antígenos (“Leukaemia CARE”, sd). A
asparaginase é uma enzima que é usada para o tratamento de leucemia mieloide aguda (LMA),
leucemia linfoblástica aguda (LLA) e linfoma não Hodgkin, restringindo o crescimento e a divisão
celular das células cancerígenas. A asparagina é um aminoácido que não é produzido em
células cancerosas e sem o qual não pode sobreviver (Kate Traynor nd). A função da
asparaginase é quebrar a asparagina em ácido aspártico e amônia. Assim, quando a asparagina
livre não está disponível no sistema, as células cancerosas morrem de fome. O uso médico da
asparaginase foi aprovado nos EUA em 1978 (Salzer et al. 2014). Estudos clínicos provaram
que o tratamento com asparaginase em crianças mostrou melhora na leucemia linfoblástica
aguda infantil (Pieters et al. 2011). A FDA e a EUSA Pharma anunciaram a aprovação da
asparaginase ou Erwinaze (nome comercial), como parte de um tratamento para leucemia
linfoblástica aguda (LLA) em pacientes que tiveram reação de hipersensibilidade à asparaginase
derivada de Escherichia coli (Kate Traynor n. d.). Elspar é o nome comercial da asparaginase.

9.5.5.2 Câncer ou Tumores O

câncer é causado quando células anormais se dividem de forma descontrolada. As células
extras recém-produzidas formam uma massa chamada tumor. Alguns cânceres podem se
espalhar para tecidos de outras partes do corpo. Aproximadamente 50% das pessoas no Reino
Unido desenvolvem câncer ao longo da vida. É relatado que existem mais de 100 tipos diferentes
de câncer e a maioria dos cânceres são nomeados a partir do local em que se originam.
Ribonuclease (RNase) cai na classe de nuclease que catalisa a degradação do RNA em
componentes menores. O efeito antitumoral das ribonucleases foi estudado com enzimas
ribonucleolíticas animais no passado (Matousek 2001). Esta enzima liga-se à membrana celular
com carga negativa e entra na célula por endocitose e penetra no citosol onde degrada o RNA
(Ardelt et al. 2009). As ribonucleases recombinantes antitumorais são proteínas básicas
pequenas (10-28 kDa). RNases microbianas, especialmente RNase Sa de Streptomyces
aureofaciens e binase de Bacillus intermedius mostraram resultados bem-sucedidos para
atividade antitumoral (Ardelt et al. 2009) (Tabela 9.6).
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182 B. Singu e U. Annapure

Tabela 9.6 Lista de medicamentos sistêmicos baseados em enzimas

Enzima Fonte Usos

Protease ácida Aspergillus niger e Aspergillus Distúrbios do estômago

oryzae
Arginase Bacillus subtilis e E. coli Antitumoral

Bacilisina sintetase Bacillus subtilis Antibiótico

Bacitracina sintetase Bacillus licheniformis Antibiótico

Glucose oxidase Aspergillus, Penicillium e Biossensores, antimicrobianos
Saccharomyces sp.
Glicosidase Aspergillus niger Antitumoral

Gramicidina sintetase Staphylococcus aureus Antibiótico

(ativador de carboxila
sintetases)
Nattokinase Bacillus subtilis Doença cardiovascular

Peptídeo não ribossomal Aspergillus fumigatus Atividade antitumoral por

sintetase microtúbulo de inibição
conjunto
Penicilina acilase Penicillium sp. Produção de penicilina/antibiótico
de amplo espectro
Produção
Peptidase Beauveria bassiana e Bacillus Doença celíaca, coágulo
polymyxa formação, inflamação,
e reparar
Fenilalanina racemase Staphylococcus aureus Antibiótico
Protease Pseudomonas aeruginosa Antibiótico
Rodanase Sulfobacillus sibiricus Envenenamento por cianeto
Ribonuclease Saccharomyces sp. Antiviral

RNase P ribozima Bacillus subtilis Antiviral

Estreptoquinase Streptococcus sp. Anticoagulante

Tirosinase Streptomyces glaucescens e Antitumoral, tratamento de
Erwinia herbicola Mal de Parkinson
Uricase Aspergillus flavus Gota
Uroquinase Bacillus subtilis Coágulos de sangue

ÿ-lactamase Serratia marcescenes, Citrobacter Utilizado no tratamento de

freundii e Klebsiella alergia a antibiótico
pneumoniae

9.6 Efeitos colaterais de drogas à base de enzimas

Os efeitos colaterais são geralmente sintomas secundários indesejáveis causados durante e/ou
após o período de medicação. Os efeitos colaterais podem variar para cada indivíduo, dependendo
sobre o estado de doença da pessoa, etnia, sexo, idade, peso e estado geral de saúde. Os efeitos
colaterais dos medicamentos à base de enzimas são muito raros, mas poucos efeitos secundários
foram relatados no passado, por isso é estritamente recomendado que se deve sempre
consulte um especialista em saúde ou médico para aconselhamento médico.
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9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 183

Os efeitos colaterais são classificados em sintomas secundários menores e maiores que

dependem do paciente individual e de sua medicação. Sintomas menores podem levar a
inconveniências por um curto período de tempo até que o curso da droga seja concluído.
Alguns pacientes podem apresentar reações alérgicas com risco de vida durante o curso da medicação.
Nesses casos, os pacientes devem interromper o curso imediatamente e procurar ajuda
médica de emergência. Os sintomas como inconveniência ao falar e respirar; sangramento
nasal; azia; aperto no peito; inflamação da língua, boca, lábios, face ou garganta; e coceira e
erupções cutâneas em todo o corpo.

9.6.1 Efeitos colaterais da enzima digestiva

Os efeitos colaterais comuns sofridos pelos pacientes são dor de cabeça, náusea, ou vômito.
Alguns pacientes também podem sentir dor de estômago o que leva à diarreia. A dosagem
prolongada também pode levar a tosse, dor de garganta, tontura, e nariz entupido. Algumas
enzimas digestivas são extraídas da carne de porco; portanto, pacientes alérgicos à carne
suína devem evitar o uso de tais produtos.

9.7 Mercado Global de Enzimas

A demanda por medicamentos à base de enzimas está aumentando globalmente. Esta é a
razão pela qual as indústrias farmacêuticas começaram a investir na instalação de grandes
biorreatores para fermentação. Diretrizes rígidas e altos investimentos ainda são uma barreira
para muitas indústrias de pequeno e médio porte. O governo em alguns países está apoiando
as unidades de fabricação biofarmacêutica fornecendo subsídios para superar o ônus do
custo de fabricação. De acordo com a Stratistics Market Research Consulting Unip. Ltd., o
mercado global de enzimas industriais está avaliado em US$ 4,91 bilhões em 2015 e deve
atingir US$ 9,74 bilhões até 2022. Os setores farmacêutico e de biotecnologia detêm uma
participação importante na receita. Os fatores responsáveis pelo crescimento do mercado
incluem desenvolvimentos recentes em P&D em tecnologia de enzimas, demanda do
consumidor, avanço no tratamento médico, etc. ). Os negócios nos países desenvolvidos
estão estagnados, enquanto os países em desenvolvimento da Ásia-Pacífico, Oriente Médio
e regiões africanas estão emergindo como mercados em rápido crescimento para enzimas
terapêuticas. O negócio nos países subdesenvolvidos depende totalmente do custo do
produto, embora haja necessidade de enzimas terapêuticas, mas o povo não tem condições
de comprar. Portanto, a competição de mercado é muito importante para reduzir o custo e
aumentar as vendas.
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184 B. Singu e U. Annapure

9.8 Perspectivas Futuras

A pesquisa e o desenvolvimento da tecnologia enzimática trouxeram a revolução no setor

de medicamentos. O escopo das enzimas está sendo continuamente explorado por
universidades e centros de P&D. Os pesquisadores aceitaram continuamente os desafios
de melhorar as enzimas de todas as maneiras possíveis. Agora, os pesquisadores têm
uma compreensão mais completa e detalhada das funções moleculares e celulares, que
está caminhando para abordagens inovadoras de tratamento. Ao observar a tendência
atual das macromoléculas, das quais antioxidantes, vacinas e enzimas serão o futuro do
campo da medicina, espera-se que essas macromoléculas sejam incorporadas em todas
as linhas de medicamentos e alimentos possíveis. Antioxidantes e vacinas previnem
doenças e enzimas são usadas para curar doenças. Como a demanda por enzimas
altamente purificadas está aumentando rapidamente, vários biofármacos estão fazendo
grandes investimentos na criação de plantas de produção de enzimas (O'Sullivan e Freedman 2009).

Referências

Ardelt W, Ardelt B, Darzynkiewicz Z (2009) Ribonucleases como modalidades potenciais na terapia anticâncer.
Eur J Pharmacol 625(1–3):181–189. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2009.06.067 Acesso público do NIH

Blinc A et al (1991) Dependência da lise do coágulo sanguíneo no modo de transporte da uroquinase no

coágulo – um estudo de ressonância magnética in vitro. Thromb Haemost 65(5):549–552 Booth C et al
(2007) Opções de tratamento para deficiência de adenosina desaminase; anais do workshop sobre satélites
da EBMT (Hamburgo, março de 2006). Clin Immunol 123(2):139-147. https://doi. org/10.1016/
j.clim.2006.12.009
Cipollone R et al (2008) Desintoxicação enzimática de cianeto: pistas de Pseudomonas aeruginosa
Rhodanese. J Mol Microbiol Biotechnol 15(2–3):199–211. https://doi.org/10.1159/000121331 Grumezescu
AM (2017) Extração de ingredientes por métodos físico-químicos em alimentos. Elsevier
Ciência, Londres
Kate Traynor (nd) FDA aprova erwinaze para tratamento de leucemia Kayser
O, Müller RH (2005) Uma cartilha sobre biotecnologia farmacêutica e aplicações industriais.
In: Biotecnologia Farmacêutica. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim, pp 1–8. https://doi.org/
10.1002/3527602410.ch1 Mane P, Tale V (2015) Visão geral das enzimas terapêuticas microbianas. Int J
Curr Microbiol App Sci 4
(4):17–26
Matousek J (2001) Ribonucleases e sua atividade antitumoral. Comp Biochem Physiol Toxicol
Pharmacol CBP 129(3):175-191
Moelling K, Broecker F, Kerrigan JE (2014) RNase H: especificidade, mecanismos de ação e alvo antiviral.
Método Mol Biol (Clifton, NJ) 1087:71-84. https://doi.org/10.1007/978-1- 62703-670-2_7

Mulyasuryani A, Srihardiastutie A (2011) Biossensor condutimétrico para detecção de ácido úrico por
imobilização de uricase em eletrodo de membrana de nata de coco-pt. Análise Química Anal 6:47–51.
https://doi.org/10.4137/ACI.S7346 Publicações SAGE
Instituto Nacional de Diabetes e Doenças Digestivas e Renais (2014) Intolerância à lactose.
NIDDK: Informações de saúde, junho
O'Sullivan BP, Freedman SD (2009) Fibrose cística. Lancet 373 (9678): 1891-1904. https://doi.org/
10.1016/S0140-6736(09)60327-5
Oshiro BT (1999) As penicilinas semissintéticas. Atualização de Atenção Primária para OB/GYNS 6(2):56–60.
https://doi.org/10.1016/S1068-607X(98)00184-X
Machine Translated by Google

9 Papel das Enzimas nas Indústrias Farmacêuticas e de Biotecnologia 185

Pieters R et al (2011) tratamento com L-asparaginase na leucemia linfoblástica aguda. Câncer 117
(2):238–249. https://doi.org/10.1002/cncr.25489
Ries M (2017) Terapia de reposição enzimática e além—in memoriam Roscoe O. Brady, MD (1923–2016). J
Herdar Metab Dis 40(3):343–356. https://doi.org/10.1007/s10545-017-0032-8 _

Salzer WL et al (2014) Desenvolvimento da asparaginase Erwinia chrysanthemi para o tratamento da

leucemia linfoblástica aguda. Ann NY Acad Sci 1329(1):81-92. https://doi.org/10.1111/nyas. 12496

Sani RK, Navanietha Krishnaraj R (nd) Processamento enzimático extremofílico de lignocelulósico

matérias-primas para bioenergia
Shak S et al (1990) A DNase I recombinante humana reduz a viscosidade da expectoração da fibrose cística.
Proc Natl Acad Sci USA 87(23):9188–9192
Simonsohn B (2000) Poder de cura do mamão um manual de saúde holístico sobre como evitar acidose,
alergias e outros distúrbios de saúde. Pilgrims Publ, Varanasi Sistla S, Rao DN (2004) enzimas de
restrição dependentes de S-adenosil-L-metionina. Revisão crítica
Biochem Mol Biol 39(1):1-19. https://doi.org/10.1080/10409230490440532
Stolarow J et al (2015) Imobilização de tripsina em meio orgânico e aquoso para síntese de peptídeos
enzimáticos e reações de hidrólise. BMC Biotechnol 15:77. https://doi.org/10.1186/s12896-015-0196-y _
Vellard M (2003) A enzima como droga: Aplicação de enzimas como produtos farmacêuticos. Opinião
atual
Biotechnol 14(4):444-450. https://doi.org/10.1016/S0958-1669(03)00092-2
Verma N et al (2007) E. coli K-12 biossensor de asparagina à base de asparaginase para leucemia. Artif Cells
Blood Substit Biotechnol 35(4):449–456. https://doi.org/10.1080/10731190701460358
O que é leucemia, suas causas e sinais e sintomas | Leucemia CARE (nd)
Zschocke J et al (2016) JIMD reports, vol 28. Springer, Berlin. https://doi.org/10.1007/978-3-662-
52847-1