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5) A curva de Scatchard (“Scatchard plot”) é utilizada para determinar o quê? Descreva uma
experiência simples que permita obter os dados necessários para preparar uma curva de
Scatchard. Diálise de equilíbrio – determinação de afinidade de um anticorpo
Esta é uma técnica em que o anticorpo em um saco de diálise é exposto a quantidades variadas
de um antígeno pequeno. Entre o anticorpo e o antígeno existe uma membrana semi-
impermeável e vamos perceber se o anticorpo é capaz de se difundir através da membrana de
diálise. A diferença da concentração de antígeno nos dois compartimentos representa a
afinidade do anticorpo. Análise de Scatchard O número de sítios de ligação por molécula de
anticorpo = intercepção no eixo x. A inclinação da linha é determinada pela afinidade da
molécula de anticorpo pelo seu antígeno (inclinação –Ka, onde Ka é a constante de associação, e
a constante de dissociação Kd = 1/Ka). A constante de associação indica o estado de equilíbrio
Ag + Ab = Ag:Ab Na análise de Scatchard, a razão B/F (B = moles de antígeno ligados por moles
de anticorpo e F = a concentração molar do antígeno livre) e plotada contra B.