Métodos espectroscópicos

Profa: Katyuscya Veloso Leão

 Métodos Espectrométricos

Os métodos espectrométricos abrangem um grupo de

métodos analíticos baseados na espectroscopia atômica e
molecular

Espectroscopia é o termo geral para a ciência que estuda a

interação dos diferentes tipos de radiação com a matéria

A espectrometria e os métodos espectrométricos se

referem as medidas das intensidades da radiação usando
transdutores fotoelétricos ou outros dispositivos eletrônicos
Introdução à Espectroscopia no
Ultravioleta
 Fundamentos da Espectrofotometria
A espectrofotometria faz parte da classe dos métodos analíticos
que baseiam-se na interação da matéria com a energia radiante

•Boa sensibilidade
•Baixo custo de análise
•Fácil operação
•Equipamentos robustos Perdas:
- reflexões
Luz Luz - dispersão
incidente emergente -absorção

Luz absorvida
• A região do espectro do ultravioleta é na faixa
de 200 a 400 nm e a da luz visível é entre 400 e
800 nm.
 RADIAÇÃO ELETROMAGNÉTICA
•Comprimento de onda (λ) f= c/ λ
•Período (p) = tempo c = velocidade da luz no vácuo 3.1010
necessário para completar cm/s
um ciclo
•Freqüência (f) = ciclos/s ou
Hertz

Energia (E)
Unidades
nm = 10-9 m E = h.f => E = h.c/λ
A= 10 -10 m h= constante de Planck
Quando o elétron volta ao seu estado
fundamental, emite energia no mesmo
comprimento de onda em que foi
excitado: detecção no aparelho.

Espectro: bandas em vez de linhas,

devido a efeitos vibracionais e rotacionais
que se sobrepõem as absorções
eletrônicas.
 Porque ocorre o fenômeno da absorção?

• Moléculas que apresentam elétrons que podem ser

promovidos a níveis de energia mais elevados mediante
a absorção de energia
– TRANSIÇÕES ELETRÔNICAS
• Níveis discretos de energia são absorvidos devido à
vibrações e rotações das moléculas
– ROTACIONAL E VIBRACIONAL
• Por este motivo não se observa uma linha de absorção
nítida, mas sim uma banda de absorção
– ESPECTRO UV-VISÍVEL
 Transições eletrônicas

Absorção de radiação eletromagnética : um elétron é

promovido para um nível superior de energia E, um estado
excitado, durante um certo período de tempo (10-6 a 10-9
seg) durante o qual os átomos da molécula não se movem
(principio de Frank-Condon).

Transições eletrônicas mais prováveis: mínimo de E: de

um HOMO (highest occupied molecular orbital) para o
LUMO (lowest unoccupied molecular orbital).

Transições permitidas : < E

Transições proibidas : > E

Transições Eletrônicas
Energia Rotacional e Vibracional
Espectro UV-Visível
 Lei de Lambert- Beer

Io= intensidade da luz incidente

It = intensidade da luz transmitida através da amostra

A = absorbância ou absorvância

A = ε b c quando a concentração é expressa em moles/L

ou
A = a b c quando a concentração é expressa em outra unidade

a/ ε = absortividade/absortividade molar
b= caminho óptico
c= concentração
Desvios da Lei de Lambert-Beer
• LIMITAÇÃO REAL
– A Lei é válida somente para baixas concentrações
– Altas concentrações = Interação entre as moléculas afeta a
distribuição de carga, alterando o coeficiente de
absortividade molar
• DESVIO QUÍMICO
– Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage
com um solvente para dar um produto que tem um espectro
de absorção diferente
 Desvios da Lei de Beer
– DESVIO INSTRUMENTAL
• A lei só é válida para radiação monocromática, ou seja, para um
único comprimento de onda ()
Como minimizar o desvio?
• Escolher a região onde o  é constante na região selecionada
 Aparelhagem e Amostragem

 Lâmpadas: tungstênio acima de 375 nm e deutério

abaixo de 375 nm;
 Espelho móvel que se movimenta automaticamente
com a variação do comprimento de onda do feixe;
 Detector: fotomultiplicador que transmite ao registrador
a razão Io / I;
 Registrador: marca absorbância X comprimento de
onda.
 Espectrofotômetro

• Instrumento que registra dados

de absorbância em função do
comprimento de onda (λ).
• A característica mais importante
do espectrofotômetro é a seleção
de radiações monocromáticas.
• O espectro de absorção é
característico para cada espécie
química, sendo possível a
identificação de uma espécie
química através do seu espectro
de absorção.
Espectrofotômetro duplo-feixe
Espectrofotômetro duplo-feixe
Celas de Medida
Detectores
Aparelhagem e Amostragem

Amostragem:
 Soluções diluídas: 0,4 mg / mL ou menos, dependendo
do max no max .

 Solventes devem ser “transparentes” na faixa de

comprimento de onda a ser analisada. Não se pode fazer o
“espectro de diferença” de um solvente que absorve muito,
pois nestas condições a quantidade de luz que atravessa a
amostra é mínima.
Solventes comuns
 Termos comuns utilizados na discussão dos
espectros de UV

 cromóforo: é um grupo insaturado covalente

 Auxocromo: é um grupo saturado ligado a um cromóforo
Deslocamento batocrômico: é o deslocamento de uma absorção para
um comprimento de onda MAIOR devido a efeitos de substituição ou
solvente
Deslocamento hipsocrômico: é o deslocamento de uma absorção para
um comprimento de onda MENOR devido a efeitos de substituição ou
solvente
 Efeito hipercrômico: é o aumento da intensidade da absorção
Efeito hipocrômico: é a diminuição da intensidade da absorção
 Cromóforos Representativos
Composto Cromóforo max (nm) Log ε
Octeno-3 C=C 185 , 230 3,9
Acetileno C=C 173 3,8
Acetona C=O 188 , 279 2,9 , 1,2
Acetato de diazoetila N=N 252 , 371 3,9 , 1,1
Butadieno C=C-C=C 217 4,3
Crotonaldeído C=C-C=O 217 , 321 4,2 , 1,3
Dimetilglioxina N=C-C=N 226 4,2
Octatrienol C=C-C=C-C=C 265 4,7
Decatetraenol [-C=C-]4 300 4,8
Vitamina A [-C=C-]5 328 3,7
Benzeno 198 , 255 3,9 , 2,4
1,4-Benzoquinona C C 245 , 285 , 435 5,2 , 2,7 , 1,2
Naftaleno 220 , 275 , 314 5,0 , 3,7 , 2,5
Difenilo 246 4,3