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Manual Anvisa
Manual Anvisa
Infecciosas
Mdulo I
NDICE
1. Infeces do trato urinrio.............................................................................................1
Introduo.........................................................................................................................1
Patognese........................................................................................................................2
Epidemiologia e fatores de risco............................................................................................3
Sinais e sintomas clnicos.....................................................................................................3
Diagnstico laboratorial.......................................................................................................5
2. Infeces de ossos e articulaes..................................................................................9
Introduo.........................................................................................................................9
Microrganismos mais freqentes...........................................................................................9
Coleta e transporte do material...........................................................................................10
Processamento de amostra.................................................................................................10
3. Infeces da pele e tecido subcutneo.........................................................................12
Introduo.......................................................................................................................12
Leses eritematosas e superficiais: aspectos clnicos e diagnstico...........................................12
Ulceraes e ndulos: aspectos clnicos e diagnstico.............................................................14
Fstulas e queimados: aspectos clnicos e diagnstico.............................................................15
Feridas cirrgicas: aspectos clnicos e diagnstico..................................................................17
Infeces complicadas e leses causadas por mordedura: aspectos clnicos e diagnstico............18
4. Infeces intestinais....................................................................................................21
Introduo.......................................................................................................................21
Principais causas infecciosas de desinteria............................................................................22
Associaes entre os aspectos clncios e os agentes etiolgicos................................................24
Diagnstico laboratorial......................................................................................................27
Relatrio de resultados......................................................................................................28
5. Infeces abdominais..................................................................................................30
Agentes microbianos mais frequentes..................................................................................30
Coleta e transporte do material...........................................................................................30
Processamento das amostras..............................................................................................30
6. Infeces do sistema nervoso central..........................................................................32
Introduo.......................................................................................................................32
Dados epidemiolgicos e etiologia de processos infecciosos do snc...........................................33
Diagnstico laboratorial......................................................................................................35
7. Infeces sistmicas....................................................................................................38
Introduo.......................................................................................................................38
Fatores de risco para bacteremia e fungemia.........................................................................38
Diagnstico em hemoculturas.............................................................................................39
Infeco relacionada a cateter vascular................................................................................41
8. Infeces genitais........................................................................................................43
Introduo.......................................................................................................................43
Candidase vulvo-vaginal....................................................................................................43
Tricomonase....................................................................................................................44
Vaginose bacteriana..........................................................................................................45
Infeco gonoccica..........................................................................................................46
Infeces por chlamydia trachomatis....................................................................................48
Infeces por mycoplasma spp............................................................................................49
Outras infeces genitais e seus patgenos...........................................................................50
9. Infeces do trato respiratrio superior.......................................................................51
Introduo.......................................................................................................................51
Quadro clnico, agentes etiolgicos e diagnstico laboratorial...................................................51
10. Infeces do trato respiratrio inferior........................................................................53
Pneumonia da comunidade.................................................................................................53
Pneumonia hospitalar........................................................................................................54
Diagnstico laboratorial das pneumonias..............................................................................56
Pacientes neutropnicos e imunossuprimidos.........................................................................60
11. Referncias bibliogrficas............................................................................................62
Baixas - que envolvem a bexiga (cistite) a uretra (uretrite), e nos homens, a prstata
(prostatite) e o epiddimo (epididimite).
A importncia em diferenciar estes dois grupos importante tanto do ponto de vista de conduta como
prognstico. Para o primeiro grupo h a necessidade de tratamento imediato, para o segundo grupo
de pacientes, comumente constitudo de meninas em idade escolar (1 a 2%) e de mulheres jovens
com vida sexual ativa (5%), existe um risco maior de desenvolver ITU no futuro. No implicando
necessariamente em tratamento, pois cerca de 25% delas passam espontneamente a ter uroculturas
negativas no prazo de um ano. Um grupo importante identificado com bacteriria assintomtica que
merece seguimento pelo elevado risco de ITU so as gestantes, idosos e pacientes cateterizados.
Quanto evoluo as ITUs podem limitar-se a episdio nico ou isolado, a recidiva, a
reinfeco e a infeco urinria crnica:
Episdio nico ou isolado: ocorre uma nica vez e resolve habitualmente pelo uso de
antibioticoterapia. Um segundo episdio isolado, pode ocorrer sem relao temporal com o
anterior. Entre 10 a 20% das mulheres iro apresentar no decorrer da vida pelo menos um
episdio de infeco urinria.
Reinfeco - a ocorrncia de um novo episdio de ITU, sem relao com o evento anterior,
causado por outro microrganismo, exceto que pela origem e freqncia do agente etiolgico que
coloniza a regio perineal, pode ser atribuda mesma espcie bacteriana (ex: E.coli). Episdios
repetidos de reinfeo no devem ser confundidos com infeco urinria crnica.
ITU crnica representa a persistncia do mesmo microrganismo por meses ou anos com recidivas
aps tratamento, no caso de pielonefrite crnica, h associao com comprometimento da pelve e
parnquima renal.
ITU recorrente: ocasionalmente a recorrncia pela persistncia do mesmo agente (recidiva), mas
em cerca de 90% dos episdios ocorre por reinfeco, com meses de intervalo entre eles. Cerca
de 20% das jovens aps o episdio inicial de cistite tem infeces recorrentes, que caracterizam
bem este grupo. Dois ou mais episdios no perodo de 6 meses ou ts ou mais no perodo de um
ano definem as infeces recorrentes na mulher. Nos homens, a ITU recorrente definida quando
ocorrem dois ou mais episdios de ITU em um perodo de at 3 anos, lembrando a freqente
associao com prostatite bacteriana crnica, nos pacientes sem fatores predisponentes.
Mod - 1
PATOGNESE
As trs possibilidades de um microrganismo alcanar o trato urinrio e causar infeco so:
Via ascendente: o microrganismo poder atingir atravs da uretra, a bexiga, ureter e o rim. Esta via
a mais freqente, principalmente em mulheres (pela menor extenso da uretra) e em pacientes
submetidos instrumentao do trato urinrio.
Via hematognica: ocorre devido a intensa vascularizao do rim podendo o mesmo ser
comprometido em qualquer infeco sistmica; a via de eleio para ITU(s) por alguns
microrganismos como Staphylococcus aureus, Mycobacterium tuberculosis, Histoplasma spp., sendo
tambm a principal via das ITU(s) em neonatos.
Via linftica: rara embora haja a possibilidade de microrganismos alcanarem o rim pelas conexes
linfticas entre o intestino e o rim e/ou entre o trato urinrio inferior e superior.
Aps o microrganismo atingir o trato urinrio poder ocorrer ou no infeco na dependncia dos
seguintes fatores:
Adequao dos mecanismos de defesa do hospedeiro
Tamanho do inculo (quanto maior o inculo que alcana o rim, maior a chance de infeco). A
medula renal altamente susceptvel a infeco por baixas contagens bacterianas, ocorrendo o
inverso no crtex renal.
Virulncia do microrganismo
Nos pacientes com cateterismo vesical, os microrganismos atingem a bexiga atravs de trs
caminhos:
- no momento da insero do cateter
- atravs da luz do cateter
- atravs da interface mucosa-cateter
Por outro lado, os fatores envolvidos na fisiopatognese das infeces urinrias associadas ao uso de
cateteres vesicais so:
-
Mod - 2
No diagnstico de ITU em crianas menores de dois anos, pode ser feita apenas uma triagem com a
urina obtida por coletor, se negativa tem valor diagnstico de excluso, mas se positiva, com ou sem
leucocitria, o diagnstico final depende de coleta por puno supra-pbica ou de urina obtida por
sondagem vesical. Em crianas maiores de dois anos com controle esfincteriano, pode-se utilizar a
urina de jato mdio.
Adultos com ITU baixa, limitada a uretra e bexiga, geralmente apresentam disria freqente, urgncia
miccional e ocasionalmente dor na regio particularmente pielonefrite, so freqentemente
acompanhadas pelos mesmos sintomas das infeces baixas, alm supra-pbica. As ITUs altas,
particularmente pielonefrite, so freqentemente acompanhadas pelos mesmos sintomas das
infeces baixas, alm de dor nos flancos e febre. Bacteremia quando presente poder confirmar um
diagnstico de pielonefrite ou prostatite.
AGENTES ETIOLGICOS DAS INFECES DO TRATO URINRIO
A flora normal da regio periuretral definida de acordo com a faixa etria e condies do paciente e,
raramente, causam ITUs apresentando em geral contagem de colnias menor que 1000 UFC/ml,
sendo constituda de: Streptococcus viridans, Corynebacterium spp. (difterides), Staphylococcus spp.
(exceto Staphylococcus aureus e S. saprophyticus), Lactobacillus spp.
Manifestao
clnica
Microrganismo isolado
Diagnstico e contagem de
colnias (UFC/ml)
Enterobactrias: E. coli e
outros grams negativos,
Enterococcus e
Staphylococcus aureus
105
Pielonefrite
Aguda: febre,
nusea, calafrios,
vmito, dor no flanco
Disria e frequncia
105
Disria, frequncia,
corrimento uretral
Urocultura negativa
a) Diagnstico por IFD
b) e c) secreo uretral semeada
em meios de cultura especficos.
Alguns kits permitem contagem
de colnias - 104 ucf/ml
d) cresce em ACH e TM
e) exame direto de jato inicial
de urina centrifugada
f) podem crescer em gar
sangue ou CLED
Aguda: febre,
calafrios, dor lombar
N. gonorrhoeae, E. coli,
Proteus spp. e outras
enterobactrias
Urocultura ou cultura da
secreo prosttica
Menos frequente:
Enterococcus spp. P.
aeruginosa e Chlamydia
trachomatis*
Crnica:
assintomtica
Cistite
Uretrite
Prostatite
Crnica:
assintomtica ou
semelhante aos
sintomas da aguda
Questionvel: micoplasmas
Mod - 4
103 ucf/ml
Cistite
Disria e frequncia
urinria na presena
de SVD pode ser
assintomtico
Pielonefrite
105
DIAGNSTICO LABORATORIAL
A maioria das ITUs diagnosticada atravs de dados clnicos e laboratoriais como piria e ou
bacteriria e tambm pela urocultura com contagem de colnias.
Pesquisa da Piria - reflete a possibilidade de resposta inflamatria do trato urinrio. A causa mais
comum a infeco bacteriana que poder ser confirmada pela urocultura; porm a piria poder ser
evidenciada nas situaes clnicas apresentadas abaixo, cuja urocultura resulta negativa.
a) No
-
infecciosa:
doena tbulo-intersticial (nefropatia por analgsicos e beta-lactmicos)
clculos e corpos estranhos
terapia com ciclofosfamida
rejeio de transplante renal
trauma genitourinrio
neoplasias
glomerulonefrite
Princpios
Limites de Deteco
Mod - 5
30 leuccitos/campo
5 leuccitos/campo
1-2 leuccitos/campo
- cmara de contagem
Contagem na cmera de
hemocitmetro
Determinao da excreo
400.000 leuccitos/hora
Determinao no sedimento
Testes Qumicos:
- fitas nitrato redutase teste de
Griess
104 UFC/ml
falso neg em cocos gram + e
Pseudomonas
- esterase leucocitria
- sedimento urinrio
Os testes utilizando fitas reagentes tm bom valor preditivo para afastar infeco urinria, no entanto
apresentam baixo desempenho para sugerir ITU. Altas doses de vitamina C podem dar falso teste
negativo para nitrito na fita, e a presena de Trichomonas pode dar teste positivo para esterase
leucocitria.
Valores de Sensibilidade, especificidade e valor preditivo (VP) dos testes nitrito e esterase
leucocitria, para predizer 105 UFC/ml
TESTE
Sensibilidade
%
Especificidade
%
VP (%) do teste
positivo
VP (%) do teste
negativo
Nitrito
69
90
57
94
Esterase leucocitria
71
85
47
94
Bacterioscopia de urina:
Com a urina no centrifugada, e apenas homogeneizada, pegar uma ala com 10 l de urina e
depositar sobre uma lmina de vidro;
Deixar secar, fixar na chama e corar pelo gram.
Com objetiva de imerso (1000x) fazer contagem.
Se encontrar 1 ou mais bactrias por campo, sugere 105 UFC.
A presena de clulas epiteliais e vrios tipos morfolgicos de bactrias sugere contaminao.
Bacteriria - a pesquisa de bacteriria poder ser realizada atravs da bacterioscpia da urina,
testes bioqumicos e cultura de urina.
QUANTIFICAO
DA
BACTERIRIA - CONTAGEM
DE
COLNIAS
Pesquisador
Stamm
(1982)
Urina
Sensibilidade
Especificidade
Valor Preditivo
Positivo
Negativo
102
coliformes/ml
0.95
0.85
0.88
0.94
105
0.51
0.99
0.98
0.65
Kass (1956)
coliformes/ml
O resultado da urocultura dever ser avaliado juntamente com os outros dados laboratoriais
(pesquisa de bacteriria e/ou piria) e clnicos (presena ou ausncia de sintomas, fatores
predisponentes, populao de risco, etc.). Considerando-se que as amostras de urina submetidas a
cultura so provenientes de pacientes com sintomas de ITU e de pacientes assintomticos com alto
risco de Infeco.
Apresentamos na tabela seguinte os diversos mtodos utilizados para a quantificao da urina e
posterior identificao e antibiograma.
Parmetros para interpretao das uroculturas
Parmetro
Mtodo e Interpretao
Comentrio
Semi-Quantitativa
Tcnica semi-quantitativa
Pour-plate
1 microrganismo = 1000 UFC/ml
Quantitativa
Lamino-cultivo
O lamino-cultivo consiste de um recipiente plstico cilndrico, onde pode tambm ser coletado a urina,
com uma tampa ligada a um suporte plstico com duas faces contendo meios de cultura como CLED e
Mac Conkey ou outras combinaes. Esta tcnica tem sido muito utilizada tanto por laboratrios com
pequena rotina, como aqueles de grande movimento pelos seguintes motivos:
Estes meios permitem identificar atravs de algumas provas bioqumicas rpidas alguns dos principais
gneros de bactrias ou pelo menos sugerir ou afastar a presena de E. coli. A coleta deve seguir os
padres normais de assepsia e orientao, e a semeadura feita sobre o prprio lamino-cultivo, de
forma que as faces do produto sejam colocadas uniformemente em contato com a urina.
-
o mtodo semi-quantitativo
superfcie menor de leitura e observao de crescimento
0,001 ml ou 1 l
0,010 ml ou 10 l
Cateter
Puno Supra-pbica
Cistoscopia
Esse mtodo consiste em utilizar a urina no diluda, e fazer a semeadura utilizando-se uma ala de
platina ou de plstico (disponvel comercialmente), de dimetro calibrado capaz de carrear uma
quantidade fixa de urina (0,001 ou 0,01ml), padronizando desse modo o fator de diluio.
Tcnica: Em sua execuo a ala bacteriolgica introduzida em uma amostra de urina bem
homogeneizada, fazendo-se movimentos para baixo e para cima no sentido vertical. A ala carregada
ento utilizada para inocular cada meio de cultura, fazendo-se, inicialmente, uma linha reta no
centro da placa e completando-se o espalhamento com uma srie de passagens em um ngulo de
90, atravs da linha original. Importante item de controle de qualidade utilizar alas calibradas
periodicamente aferidas ou, quando possvel, alas descartveis.
Meios de cultura: As placas com meio seletivo (Mac Conkey ou EMB) e outro meio no seletivo (gar
Sangue de Carneiro a 5%) devero ser incubadas 24 horas 35-37C, devendo este perodo ser
prolongado quando as condies clnicas justificarem ou quando houver suspeita de infeco por Gram
positivos (Enterococos e Streptococcus agalactiae ou leveduras). Atualmente utiliza-se muito o meio
CLED, que permite crescimento das enterobacterias, impedindo o espalhamento dos Proteus, a
maioria dos gram positivos e leveduras. prudente a leitura em 48-72 horas quando a contagem de
leuccitos ou a bacterioscopia sugerirem infeco urinria e no for verificado crescimento bacteriano
em 24 horas.
Nos casos de suspeita clnica de ITU por anaerbios, o material clnico adequado para cultura a urina
obtida por puno supra-pbica e semeada de acordo com as orientaes deste manual para cultura
de anaerbios. Quando houver suspeita de ITU fngica, recomenda-se semear de acordo com as
orientaes deste manual referentes s infeces fngicas.
Outros dados laboratoriais que podem contribuir para o diagnstico:
Hematria: quando detectada isoladamente sugere tuberculose renal, litase renal, doena
policstica renal, cistite viral e trauma aps cateterizao.
Mod - 8
Prostatite - Cerca de 50% dos homens em algum momento da vida iro apresentar sintomas
sugestivos de prostatite, embora apenas 5-10% sero caracterizados como casos agudos ou crnicos.
Os demais apresentaro quadros inflamatrios no infecciosos. O diagnstico de prostatite bacteriana
aguda , muitas vezes, confundido nos homens abaixo de 50 anos com infeco urinria. A prostatite
pode ser detectada com base em uroculturas positivas, ou cultura de secreo prosttica com
presena de neutrfilos na secreo. Os sintomas, geralmente, so intensos na infeco aguda,
enquanto que na prostatite crnica eles so insidiosos, manifestando-se por infeces urinrias
repetidas, ou sintomas genitourinrios irritativos ou obstrutivos.
Na fase aguda contra-indicada a coleta de secreo prosttica pela dor, embora o toque retal
cuidadoso j possa sugerir este diagnstico, documentado por urocultura. Os principais agentes so a
E. coli, Proteus spp.,e outras enterobacterias, sendo menos freqente o enterococo. controvertido o
papel de estafilococos, Gardnerella, Haemophilus, Chlamydia, Mycoplasma, Trichomonas e vrus.
Mod - 9
Ps-operatrio
Ps-mordida de
animal
Insuficincia
vascular
Enterobactrias, anaerbios.
Anemia falciforme
P diabtico e lcera
de decbito
Bartonella henselae
Imunossuprimidos
Mod - 10
Usurios de droga
endovenosa e
pacientes que fazem
hemodilise crnica
Locais onde as
doenas tem alta
prevalncia
Infeco hospitalar
ARTRITE
SPTICA
Neisseria gonorrhoeae
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus spp.
Enterococcus spp.
Enterobactrias
Crnica e
monoarticular
PRTESES
ARTICULARES
S. aureus
Chlamydia
trachomatis,
Yersinia
enterocolitica,
Poliartrite assimtrica que pode acompanhar de uretrite, conjuntivite, uveite e rash cutneo.
importante lembrar como diagnstico diferencial de artrite migratria causada pela febre reumtica,
ps-infeco, por Streptococcus pyogenes.
PROCESSAMENTO DE AMOSTRA
Mod - 11
gar sangue
Incubar a 35C durante 18 a 24 h
Verificar crescimento bacteriano:
- se negativo, incubar mais 24 h
- se positivo, identificar o microrganismo
gar chocolate suplementado
Incubar a 35C em jarra com 5% CO2 durante 18 a 24 h
Verificar o crescimento bacteriano:
- se negativo, reincubar
- se positivo, proceder identificao do microrganismo
Culturas especiais
Mod - 12
ERISIPELA
E CELULITE
A erisipela uma infeco cutnea geralmente causada por estreptococo do grupo A, tendo sido
descritos raros casos devidos a estreptococos C e G. A infeco envolve principalmente a derme e as
partes mais superficiais do tecido subcutneo com envolvimento proeminente dos linfticos
superficiais. A erisipela apresenta uma rea cutnea endurecida, edematosa, avermelhada e dolorida,
eventualmente com pequenas vesculas ou bolhas na superfcie cutnea. O quadro clnico tpico
caracterizado pelo aparecimento de alteraes cutneas com bordas elevadas e nitidamente
Mod - 13
demarcadas com pele adjacente normal ou no envolvida. O ataque agudo de febre e calafrio
notrio com invarivel presena de linfoadenopatia.
Ao contrrio da erisipela, a margem da rea de celulite pouco definida sem elevao central. O
estreptococo do grupo A e o S. aureus so considerados os agentes etiolgicos mais comuns. Algumas
espcies de Vibrio e Aeromonas podem causar celulite aps introduo do microrganismo atravs da
ferida ou lacerao ocorrida durante a natao em gua doce ou gua do mar. A celulite causada por
H. influenzae relativamente rara, mas a forma distinta desta infeco que ela est geralmente
associada com bacteremia e afeta tipicamente crianas de seis meses a 3 anos de idade.
Diagnstico Laboratorial
O diagnstico de impetigo feito geralmente atravs das caractersticas clnicas das leses. A
confirmao bacteriolgica geralmente no necessria, mas pode-se cultivar em gar sangue o
material obtido da base da leso aps lavagem com gua e sabo, assepsia local com lcool a 70% e
remoo da crosta. Evidncia sorolgica de infeco recente por Streptococcus do grupo A poder ser
utilizado no diagnstico retrospectivo. A deteco do anticorpo anti-Dnase B um indicador mais
sensvel de infeco cutnea pelo estreptococo do que o ttulo de ASLO (anti-estreptolisina O),
provavelmente devido inibio de estreptolisina pelos lipdios da pele presentes na leso.
FOLICULITE
uma infeco e inflamao dos folculos pilosos geralmente iniciada pelo bloqueio do folculo ou por
pequenos traumas. A infeco caracterizada por ppulas ou pstulas cncavas, perfuradas por plo
circundado por um halo eritematoso. A infeco em geral causada pelo S. aureus. Embora a etiologia
da foliculite possa ser confirmada por cultura do ps ou exsudato da leso, esta prtica geralmente
no necessria. Outras causas menos comuns de foliculite incluem membros da famlia
Enterobacteriaceae (especialmente Proteus sp). Esta pode ocorrer em pacientes com Acne vulgaris
que recebem antibiticos orais por um perodo prolongado de tempo. Recentemente foram verificados
surtos de foliculite atravs do uso de banheiras de hidromassagem e piscinas contaminadas com
Pseudomonas aeruginosa. A erupo cutnea consiste de coceira, ppulas eritematosas ou ppulopustulosas.
A erupo no nica em aparncia, mas tem distribuio caracterstica envolvendo principalmente as
ndegas, quadris, coxas e axilas. Estas so reas onde se localizam as glndulas sudorparas
apcrinas as quais tendem a ser ocludas quando se usam roupas apertadas. Alm da erupo, muitos
pacientes manifestam febre baixa, cefalia, indisposio, dor de ouvido (devido otite externa
concomitante) e dor no peito (devido mastite). A doena pode levar vrias semanas, mas
geralmente autolimitada, de cura espontnea, no necessitando de terapia especfica.
Diagnstico Laboratorial
Na foliculite estafiloccica, geralmente a bactria no vista no Gram e nem na cultura. J na
foliculite por Pseudomonas, o microrganismo pode ser recuperado de pstulas maiores, embora na
maioria dos casos a cultura tambm se apresenta negativa.
FURUNCULOSE
CARBNCULO
O furnculo um abscesso que se inicia no folculo piloso como um ndulo avermelhado, tornando-se
doloroso e amolecido. O carbnculo mais profundo e extenso, apresentando-se freqentemente
como abscessos subcutneos mltiplos envolvendo vrios folculos e glndulas sebceas, drenados
atravs dos folculos pilosos.
O carbnculo pode estar associado com febre, mal-estar e pode se complicar pela celulite ou
bacteremia. Tanto o furnculo como o carbnculo ocorrem em tecido cutneo pela frico e
abafamento dos stios onde se encontram os folculos (virilha, axila, pescoo e face). O S. aureus o
patgeno mais freqente. Tratamento com compressas quentes geralmente adequado para
pequenos furnculos localizados. Antibiticos anti-estafiloccicos tais como oxacilina e clindamicina
podem ser necessrios na presena de febre ou na existncia de celulite circundante, especialmente
se o furnculo ou carbnculo estiveram localizados na face.
PARONQUIA
uma infeco superficial na prega da unha que pode ser aguda ou crnica. As infeces agudas so
devidas a Staphylococcus aureus, que poder ser cultivado de drenagem purulenta.
Mod - 14
Diagnstico Laboratorial
Impetigo
Streptococcus pyogenes,
Staphylococcus aureus
Erisipela
Celulite
Streptococcus pyogenes, S.
aureus
Menos freqentes:
Enterobactrias, Pasteurella spp.,
Aeromonas spp., Clostridium spp.,
B. anthracis, Erysipelotrix spp.
Foliculite, Furnculos e
Carbnculo
Staphylococcus aureus
Paronquia
Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa, Candida
spp.
Micoses superficiais
Agente Etiolgico
Diagnstico Laboratorial
Leses esporotricides
Sporotrix schenckii,
Mycobacterium marinum
Mod - 15
Blastomicose,
Criptococose
Paracoccidioides brasiliensis,
Cryptococcus neoformans
Difteria cutnea
Corynebacterium diphtheriae
Antraz
Bacillus anthracis
Agente Etiolgico
Diagnstico Laboratorial
Actinomicose
Actinomyces spp.
Maduromicos e
Madurella mycetomatis,
Mod - 16
Maduromicos podal
Phialophora verrucosa,
Petriellidium boydii
Tuberculose
Mycobacterium tuberculosis
Infeces mistas ou
foco crnico
Staphylococcus aureu,
Enterobactrias, Pseudomonas
spp.
QUEIMADOS
Historicamente, o estreptococo hemoltico e o estafilococo foram os microrganismos mais comumente
encontrados em infeces de queimados. Com o advento dos antimicrobianos, tais infeces foram
substitudas por Staphylococcus aureus oxacilina-resistentes (ORSA), bacilos Gram negativos,
notadamente Pseudomonas aeruginosa e leveduras como a Candida albicans ou fungos filamentosos
como Fusarium sp.
Diagnstico Laboratorial
A superfcie queimada contm tecido morto e fluido rico em protenas. Microrganismos da flora do
prprio paciente ou do meio ambiente colonizam esta superfcie. O crescimento dos germes sobre tal
superfcie continua at que esteja presente uma densa carga microbiana. Quando a concentrao
bacteriana for grande o suficiente, ocorre infiltrao dos tecidos mais profundos provocando infeco
generalizada com bacteremia. Os estudos sugerem que a ocorrncia de invaso, seguida de
complicaes est associada contagem bacteriana de 10 5 UFC/grama de tecido. Isto leva ao
desenvolvimento de mtodos quantitativos, tanto em esfregaos como em culturas como tambm
para as bipsias cirurgicamente removidas das queimaduras.
Foi demonstrado que culturas somente de tecidos superficiais so inadequados e freqentemente
enganosos. Conseqentemente, a cultura de tecido profundo empregada em muitos laboratrios,
apesar de tal procedimento ser tambm controverso devido dificuldade na interpretao. Embora a
bipsia tenha sido amplamente empregada, os resultados mostram inadequaes. As queimaduras
nem sempre so colonizadas e a seleo dos stios da bipsia importante. Este conceito levou ao
emprego de uma variedade de tcnicas para estimar em que profundidade os microrganismos se
disseminam. Tais mtodos incluem uma variedade de tcnicas histopatolgicas e microbiolgicas.
Cultura e bacterioscpico quantitativo - o esfregao e a cultura quantitativa so realizadas com
bipsias removidas cirurgicamente da queimadura. Enquanto alguns preferem no mnimo 0,5g de
tecido outros aceitam uma poro menor. Escolhe-se uma rea com sinais de infeco, aps limpeza
do local retira-se um fragmento de tecido vivo que deve ser acondicionado em recipiente estril.
No laboratrio a bipsia pesada, empregando-se balana com preciso de 0,001 g. O tecido ento
homogeneizado em caldo ou salina com volume conhecido utilizando-se um liqidificador ou
homogeinizador eltrico. O material diludo razo de 10 at 10 -5 (peso/vol.) e semeado em vrios
meios de cultura, incluindo o gar sangue e gar Mac Conkey e em casos suspeitos cultura para
bactrias anaerbias estritas. Os germes isolados so identificados e submetidos a estudos de
sensibilidade. E o valor quantitativo de cada microrganismo isolado calculado a partir do peso inicial
da bipsia e da diluio empregada.
Os mtodos para testar a sensibilidade de drogas de uso tpico foram desenvolvidos, porm no so
de emprego rotineiro por falta de padronizao e porque o significado clnico continua duvidoso.
O bacterioscpico quantitativo pode ser realizado ao mesmo tempo, segundo o mtodo desenvolvido
por Magee e cols. Uma quantidade conhecida do homogeneizado espalhada por uma rea total de 1
cm2 em uma lmina e deixado para secar. A colorao feita e 10 campos so examinados com
objetiva de imerso com aumento de 100 vezes. Uma srie de clculos permite a determinao de
contagem bacteriana em termos de microrganismos por grama de tecido.
Tcnicas histopatolgicas - as tcnicas histopatolgicas foram usadas para detectar infeces fngicas
e na tentativa de localizar o microrganismo no tecido queimado.
Os mtodos histopatolgicos apresentam uma srie de desvantagens:
Mod - 17
A quantidade do tecido examinado muito pequena sendo limitado para pequenos cortes feitos a
partir de bipsia.
Embora a correlao entre cultura e exame histopatolgico, em geral, seja boa, s vezes ocorrem
discrepncias.
Mod - 18
Agente Etiolgico
Diagnstico Laboratorial
Infeco ps-operatria
simples
Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis,
Streptococcus grupo A,
Enterobactrias, Enterococos,
Bacteroides spp., Clostridium spp.
Infeco de feridas
complicadas
Streptococcus grupo A,
Staphylococcus aureus,
Enterobactrias, Pseudomonas
spp., Aeromonas hydrophila, Vibrio
vulnificus, Bacteroides spp.,
Clostridium spp., cocos
anaerbios, cocos microaerfilos,
Fusobacterium spp.
COMPLICADAS
As infeces complicadas da pele e de estruturas subjacentes podem ocorrer aps cirurgia ou trauma.
A classificao dessas infeces difcil devido superposio do stio anatmico afetado, ao
microrganismo responsvel e manifestao clnica. Muitas destas infeces so graves, de
progresso rpida, e associadas com altas taxas de mortalidade.
A gangrena infecciosa doena rara onde as necroses bolhosas da pele podem estar associadas com
bacteremia e leses metastticas. Esta doena freqentemente fatal. A gangrena sinergstica, s
vezes referida como gangrena de Meleney, em geral uma complicao da cirurgia do trato
alimentar. Tal infeco inicia-se como uma lcera prxima ferida e pode se disseminar para afetar
mais a parede abdominal anterior. A gangrena gasosa est geralmente associada com Clostridium
perfringens, microrganismo que tanto pode colonizar a ferida sem causar doena como pode causar
celulite grave, estender-se para a musculatura evoluindo para mionecrose e, com freqncia, para o
bito.
Esta infeco pode estar mais associada com supurao aquosa e fina do que com exsudato purulento.
Uma sndrome semelhante de necrose muscular pode ser causada por Aeromonas hydrophila e Vibrio
vulnificus, enquanto a celulite pode ainda ser causada por Vibrio spp., Klebsiella spp., Escherichia coli
e/ou outros anaerbios que no Clostridium spp. tais como Bacteroides spp. e cocos.
A fasciite necrotizante inicia-se geralmente como ferida cirrgica do abdmen e dissemina-se
lateralmente para os flancos, at a linha de mamilo e desce para a regio inguinal. O tecido que
Mod - 19
recobre a pele parece normal no incio da doena, tornando-se vermelho azulado conforme a doena
progride. O ps pode ser drenado atravs da pele dos flancos ou de outras partes da ferida original.
A doena de Fournier uma forma de fasciite necrotizante que afeta a regio do perneo ou escroto,
onde as camadas superficiais da pele enegrecem e descamam. Pode haver envolvimento de bactrias
anaerbias como Bacteroides spp. Fusobacterium spp., Clostridium spp. e cocos Gram-positivos, bem
como bactrias facultativas como Enterobactrias, estafilococos, enterococos. Os estreptococos
microaerfilos so vistos freqentemente em sinergia gangrenar ou associados com S. aureus e
membros da famlia Enterobacteriaceae.
A infeco pode se complicar e estender-se para os msculos da perna quando h comprometimento
vascular, assim como em pacientes com diabete mellitus. Pode existir mionecrose extensiva causada
por anaerbios como Clostridium spp., cocos anaerbios e Bacteroides spp. em rea de insuficincia
vascular. A flora facultativa tambm pode estar presente, incluindo Proteus spp.
Diagnstico Laboratorial
As bactrias comumente isoladas de feridas infectadas incluem S. aureus, S. pyogenes (grupo A),
cocos anaerbios, Clostridium spp., especialmente C. perfringens, membros da famlia
Enterobacteriaceae, Bacteroides spp. e Fusobacterium spp.
Para pesquisa laboratorial eficiente necessita-se da coleta de volume adequado (at 5mL) de aspirado
de ps ou bipsia de tecido. As amostras clnicas lquidas podem ser transportadas em tubos para
transporte de anaerbios ou sacos plsticos com ambiente anaerbio; se no houver disponibilidade
de nenhum desses meios de transporte, pode-se utilizar a prpria seringa onde se colheu o material
clnico, enviando-se o material o mais rpido possvel ao laboratrio. Recomenda-se processar o
material dentro da primeira hora.
Os cortes de tecido devem ser enviados ao laboratrio em tubo com salina para manter a umidade.
Tecidos para anlise microbiolgica no devem ser colocados em formol, podendo ser colocados em
meio de transporte.
A colorao de Gram pode indicar uma variedade de microrganismos associados com a leso e uma
terapia presuntiva poder ser guiada pelo resultado do Gram. No caso particular da mionecrose
causada por C. perfringens, o agente pode ser facilmente reconhecido por sua morfologia de bacilo
Gram-positivo tpico com extremidade angular. Nestes casos nota-se pouca quantidade de ps na
amostra.
As amostras podem ser cultivadas em gar sangue ou gar Mac Conkey. Os germes facultativos
comuns iro aparecer em 24 horas. O exame microbiolgico de todas essas infeces requer cultura
para bactrias anaerbias, assim como para aerbios e anaerbios facultativos.
Diagnstico de Infeces Complicadas
Quadro Clnico
Agente Etiolgico
Diagnstico Laboratorial
Fasciite Necrotizante
S. pyogenes ou anaerbios
associados a bactrias facultativas
Gangrena de Fournier
INFECES COMPLICADAS
POR
MORDEDURAS
Os ferimentos de mordeduras tanto de humanos como de animais podem ser contaminados com a
flora oral do agressor, assim como podem ser causados por traumas relacionados cavidade oral,
tendo como primeiras leses as causadas por dentadas ou decorrentes de mastigao.
Diagnstico Laboratorial
A cultura de mordedura recente no est indicada, pois o seu resultado no tem aplicao clnica. O
melhor material para cultura geralmente o ps aspirado da profundidade da ferida ou a cultura feita
durante a inciso e drenagem desta amostra ou debridamento da ferida infectada. Deve-se realizar
Mod - 20
cultura tanto para bactrias aerbias quanto para anaerbias com uma variedade de meios de cultura
para auxiliar na separao prvia dos microrganismos misturados.
Diagnstico de Leses Causadas por Mordeduras
Mordeduras
Agente Etiolgico
Diagnstico Laboratorial
Mordedura de animais
Mordedura e
arranhadura de Gatos
Bartonella henselae/quintana
Mordeduras humanas
Mod - 21
4. INFECES INTESTINAIS
INTRODUO
A doena diarrica continua a figurar como o maior problema da sade humana. Foi estimada uma
ocorrncia de um bilho de episdios de diarria no mundo por ano em crianas abaixo de cinco anos
de idade, resultando em 5 milhes de bitos. A diarria particularmente devastadora em crianas
que sofrem concomitantemente de doenas infecciosas, como sarampo, imunodeficincia e
subnutrio protica, fatores muito freqentes nos pases em desenvolvimento. Em tais pases,
estima-se que a criana apresenta trs a quatro vezes mais episdios de diarria por ano do que as
que vivem em pases de elevado nvel de saneamento bsico e com sistemas adequados de
suprimento de gua.
Embora a morbidade e a mortalidade devido doena diarrica sejam mais importantes em crianas
lactentes, esta enfermidade tem impacto importante tambm em adultos. Os adultos em mdia
sofrem de um a dois episdios de diarria anualmente. Este fato resulta em custos econmicos devido
utilizao das fontes de recursos para sade e perda da produtividade.
As causas das sndromes gastrointestinais acompanhadas de dor, diarria ou desinteria podem ser:
Infecciosas, causadas por bactrias, fungos (menos freqentes), vrus, parasitas e protozorios.
No infecciosas, alrgicas, causadas por erro alimentar, envenenamento, etc.
O custo para se fazer um exame de fezes de qualquer paciente para todos os patgenos em potencial
descritos na literatura proibitivo. Devem ser desenvolvidas estratgias para assegurar a maior taxa
de positividade possvel, uma vez que a coprocultura tem um custo alto por resultado positivo.
A identificao daqueles casos de doenas diarricas causadas por agentes que necessitam de terapia
que no seja apenas a hidratao oral de particular importncia. Tambm importante identificar o
agente etiolgico responsvel por surtos de toxinfeco alimentar, para que as tcnicas de manuseio
alimentar possam ser notificadas para prevenir transmisses posteriores.
A maioria dos casos de diarria comunitria em adultos de causa inflamatria e, as fezes, podem ser
triadas para verificar a presena de leuccitos atravs da colorao de azul de metileno. Entretanto, a
sensibilidade da pesquisa de leuccitos nas fezes menor que 90%. A ausncia de leuccitos no
poder descartar agentes causadores de diarria inflamatria, mas a presena destes pode diferenciar
dos agentes causadores de diarria no inflamatria, incluindo microrganismos toxignicos como
Vibrios, E. coli (ETEC), agentes virais e certos agentes parasitrios.
Nos meses de inverno, as crianas com diarria devem ser triadas primeiro para Rotavirus e, somente
quando o exame for negativo, as amostras fecais devem ser testadas para outros patgenos
bacterianos.
Estudos de vigilncia realizados por Laboratrios de Referncia, como triagem de fezes para vrios
agentes por um perodo de 3 a 6 meses e a avaliao do impacto destes estudos na taxa de
positividade do exame de fezes, podero auxiliar na determinao de quais microrganismos devero
ser includos na triagem de rotina pelos laboratrios que atendem a comunidade.
Um outro papel importante que o laboratrio desempenha no controle da diarria de pacientes da
comunidade na deteco de surtos de fontes comuns. O laboratrio deve notificar as autoridades da
Sade Pblica toda vez que houver crescente isolamento de patgenos entricos. Por exemplo, em
muitas instituies infantis como a creche, o isolamento de mais de um caso de Shigella spp. em
crianas menores de cinco anos de idade, dentro de um perodo de uma semana, poder sugerir um
surto de shigelose.
A diarria de origem hospitalar descrita na literatura como um episdio que ocorreu aps trs dias
de internao. Esta definio razovel quando se reconhece que certos pacientes, sero admitidos
no hospital devido a sintomas de diarria (especialmente em crianas pequenas) ou pode ter episdio
de diarria auto-limitada, geralmente induzida por vrus durante ou prximo ao momento da
internao.
Em crianas, o Rotavrus a causa principal de infeco hospitalar sendo este o nico agente para o
qual as fezes de crianas com diarria desenvolvida no hospital devem ser rotineiramente
Mod - 22
Evacuao acompanhada
de tenesmo, sangue, muco
e dor
Diarria
Nas ltimas duas dcadas o conhecimento sobre agentes virais, bacterianos e protozorios e os
mecanismos pelos quais a diarria produzida (induzida) expandiu-se bastante. Por exemplo:
Diarria crnica causada por Cryptosporidium spp. e por Isospora spp., reconhecidos como um dos
maiores problemas em pacientes aidticos
Surtos de diarria devido contaminao da rede de gua pblica com Giardia lamblia.
A deteco do patgenos entricos bacterianos complicada pela presena de microflora fecal normal
abundante e complexa. Tal flora aparece logo aps o nascimento, envolvendo o intestino grosso
durante o primeiro ms de vida, principalmente em resposta mudana da dieta alimentar. Por volta
do primeiro aniversrio, a microflora intestinal totalmente estabelecida e permanece durante a vida
inteira, a menos que seja induzida uma grande mudana pela terapia antimicrobiana.
A flora fecal obtida de adulto normal contm entre 10 11 -1012 microrganismos por grama de fezes, das
quais 99% so anaerbios estritos, predominantemente os pertencentes aos gneros: Bacteroides,
Fusobacterium, Bifidobacterium, Eubacterium e Propionibacterium. Quando comparados com a
microflora fecal facultativa, esta mais modesta em nmero e variedade, com 10 8 - 109 organismos
por grama de fezes.
O desafio para o microbiologista clnico a tentativa de detectar vrios enteropatgenos em meio
incrivelmente complexo. As infeces intestinais ocorrem em funo de fatores ligados ao hospedeiro,
como baixa acidez gstrica que reduz significativamente a dose infectante, como sua microbiota,
imunidade, motilidade, etc. E fatores ligados ao agente, destacando-se os fatores de virulncia e
inculo.
Mod - 23
10 102 UFC/ml
Campylobacter jejuni
Salmonella
105 UFC/ml
E. coli
108 UFC/ml
Vibrio cholerae
108 UFC/ml
Giardia lamblia
10 102 cistos
Entamoeba histolytica
10 102 cistos
Cryptosporidium parvum
1 103 oocistos
ESCHERICHIA
COLI
As cepas mais importantes com potencial de causar diarria so: E. coli enterohemorrgica (EHEC) ou
produtora de toxina Shiga, E. coli enterotoxinognica (ETEC), E. coli enteropatognica (EPEC) e E. coli
enteroinvasora (EIEC). Outras E. coli produtoras de toxina e outros fatores de virulncia, como a E.coli
enteroagregativa (EaggEC) foram descritas, mas de importncia clnica ainda no bem definida.
EHEC - E. coli produtoras de toxina Shiga (verocitotoxina) caractersticas so a O157:H7, mas mais de
uma centena de outros sorotipos podem produzir esta toxina. A E. coli O157:H7 a mais bem
estudada e esta relacionada a sndrome hemoltico urmica, caracterizada por trombocitopenia,
anemia hemoltica einsuficincia renal aguda. Em geral encontrada em produtos de origem animal
como carne, leite e derivados, mas pode tambm ser disseminada atravs de gua no clorada,
alimentos, etc. Dose infectante baixa, por isso pode ser transmitida de pessoa a pessoa. A
sorotipagem o mtodo de triagem mais comum, existindo antisoro especfico para O:157 (simples)
ou teste com partculas de latex, devendo a cepa ser enviada ao laboratrio de referncia para
confirmao.
ETEC - E. coli produtoras e enterotoxinas LT e ST, no so distinguidas de outras E. coli por mtodos
bioqumicos e sua caracterizao somente realizada por laboratrios de referncia, o que dificulta
seu diagnstico. comum em crianas e uma das causas da diarria dos viajantes. Raramente
encontrada em surtos.
EPEC - As E. coli enteropatognicas conhecidas como clssicas, so dezenas de sorotipos de E. coli
no produtoras de enterotoxina e no invasoras, que so causa freqente de diarria em crianas em
pases em desenvolvimento, podendo ocorrer em surtos hospitalares. O quadro clnico caracterstico
a diarria severa, no sanguinolenta, prolongada, associada m-absoro e desnutrio. O
diagnstico realizado por triagem com soros polivalentes contendo anticorpos contra antgenos
somticos (O) e capsulares (K) especficos para os sorotipos prevalentes. Existem comercialmente
soros monovalentes para caracterizao especfica. A sorotipagem pode dar resultado falso positivo,
que pode ser reduzido com sorologia para antigenos H ou provas de virulncia em Laboratrios de
referncia .
EIEC - So E. coli que invadem as clulas epitelias do clon, causando sndrome semelhante causada
pela Shigella com diarria aquosa, clica e eventualmente diarria sanguinolenta. So menos
freqentemente isoladas que as E. coli anteriormente descritas. Em geral as cepas so lisina
desaminase negativas e imveis. Existem comercialmente soros polivalentes e monovalentes contra os
sorotipos prevalentes. A durao do perodo de incubao pode sugerir alguma etiologia especfica
principalmente quando h surtos.
Mod - 24
Produo de Toxina
Invaso Tecidual
Aquosa
Amolecida
Volume fecal
Grande
Pequena
Vmito
Presente
Ausente
Febre
Ausente
presente
Importante
Leve
1 a 3 dias
Negativo
presentes
Negativo
presentes
Intestino delgado
Intestino grosso
Desidratao
Sintomas aps inoculao
Local de infeco
A procura do agente etiolgico de diarria, desenteria ou dor abdominal, deve-se contar com a
colaborao importante do mdico, dando informaes clnicas e se possvel a suspeita clnica para
orientar quais os agentes a serem pesquisados. Constituem informaes importantes:
Idade do paciente
Principais sintomas: diarria, presena de sangue, pus ou muco, tenesmo, dor abdominal,
freqncia e volume das evacuaes, febre, quadro simultneo em outras pessoas do convvio.
sem leuccitos nas fezes: E. coli enterotoxinogenica (ETEC), Rotavirus e Norwalk virus, ou
parasitas.
com leuccitos nas fezes: Shigella spp., Salmonella spp., E. coli (EIEC), Campylobacter jejuni e
Entamoeba histolytica.
Disenteria (muco, sangue e pus, com dor a evacuao): amebase, shigelose, E. coli (EIEC).
Fezes com sangue, sem leuccitos fecais: deve-se suspeitar de EHEC (O157:H7), pode estar
acompanhada de sndrome hemoltico-urmica, principalmente em crianas. Existe a possibilidade
de amebase.
Diarria secretria, cujo quadro importante a desidratao podendo evoluir para o choque e
cujas fezes apresentam aspecto de gua de arroz, sugerindo o diagnstico de clera.
Mod - 25
Diarria crnica ou subaguda, com ou sem flatulncia, pode-se direcionar o exame para o
diagnstico de giardase. Outras causas de (>10 dias), com perda de peso, lembrar de
ciclosporiase e criptosporidiose. Ou na suspeita de uma sndrome apendicular pode-se sugerir uma
yersiniose.
Intoxicao com incubao de curta durao, acompanhado de vmito, pode-se sugerir uma
intoxicao de origem alimentar causada por toxina de Staphylococcus aureus ou Bacillus cereus.
Em
-
Invaso
Adeso
Campylobacter spp.
E. coli enteropatognica
E. coli enteroinvasora
E. coli enteroaderente
Plesiomonas shigeloides
E. coli enterohemorragica
Salmonella spp.
Staphylococcus aureus
Shigella spp.
Yersinia enterocolitica
Incio dos
sintomas
Diagnstico
Bacillus cereus
1-6 h
Bacillus cereus
- toxina de diarria
6-24 h
Idem
Campylobacter
2-5 at 10 d
Diarria geralmente
sanguinolenta, dor abdominal e
febre.
Coprocultura em meio
especfico (Karmali).
Clostridium botulinum
2ha8d
mdia: 12-48h
- toxina de vmito
Mod - 26
diarria.
Clostridium perfringens
6-24 h
E. coli
Enterohemorrgica
(EHEC) O157:H7
1-10 d
mdia: 4-5 d
E. coli
enterotoxinognica
(ETEC)
6-48 h
E. coli enteropatognica
(EPEC)
Varivel
E. coli enteroinvasora
(EIEC)
Varivel
Listeria monocytogenes
forma diarria
9-32 h
Coprocultura em caldo de
enriquecimento (caldo Fraser,
caldo Listeria-Oxoid) e meio
seletivo (Listeria Seletive
Medium / Oxoid).
Salmonella typhi
3-60 d
mdia: 7-14 d
Coprocultura em caldo de
enriquecimento e meios
seletivos; titulos de anticorpos
especficos.
Outras salmoneloses
6-10 d
mdia: 6-48 h
Coprocultura em caldo de
enriquecimento e meios
seletivos Salmonella-Shigella,
Hektoen.
Shigella spp.
12 h a 6 d
mdia: 2-4 d
Staphylococcus aureus
30 min. a 8 h
mdia: 2-4 h
1-5 d
Vibrio parahaemolyticus
4-30 h
Diarria.
Yersinia enterocolitica
1-10 d
mdia: 4-6 d
Agente etiolgico
Incio dos
sintomas
Diagnstico
Rota vrus
15-77 h
mdia: 1-2 d
Vrus
Mod - 27
15-77 h
mdia: 1-2 d
Agente etiolgico
Incio dos
sintomas
Diagnstico
Cryptosporidium parvum
2-28 d
mdia: 7 d
Cyclospora cayetanensis
1- 11 d
mdia: 7 d
Giardia lamblia
3-25 d
mdia: 7 d
Norwalk (calicivrus ) e
outros enterovrus
Parasitas
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Uma histria de emprego recente de antibioticoterapia prolongada deve ser considerada para
direcionar a pesquisa de toxina de Clostridium difficile como uma das etiologias. Outras
possibilidades so o S. aureus, Candida spp. e P. aeruginosa.
Quando possvel selecionar pores de fezes contendo muco, e/ou sangue e/ou ps.
Diarria por toxina tem curta durao, pesquisa de leuccitos, sangue e presena de muco
negativa. Diagnstico laboratorial difcil, pois o agente costuma no estar presente.
Pesquisa de leuccitos e eosinfilos: deve-se enviar fezes frescas para exame (no swab) ou em
meio de transporte.
MEIOS
DE TRANSPORTE
Cary Blair indicado para todos os patgenos bacterianos intestinais, exceto Shigella. No caso do
Clostridium difficile, as fezes devem ser congeladas a menos 20 oC ou submetidas ao teste
rapidamente.
Fezes e aspirados gastrointestinais podem ser transportados sob refrigerao em frascos estreis,
e bipsias podem ser conservadas com um pouco de salina em frasco estril. Em geral o meio de
transporte inviabiliza a pesquisa de leuccitos nas fezes, sugestivo de agente invasor.
Quando no houver informaes clnicas ou pedido especfico, a rotina recomendada a pesquisa dos
seguintes agentes:
Salmonella, Shigella, Aeromonas, Plesiomonas, Yersinia: podem ser isolados em Mac Conkey e
Salmonella-Shigella. Recomenda-se tambm incluir a cultura para Campylobacter, que exige meio
especfico. No caso de fezes com sangue, pesquisar EHEC.
Mod - 28
CARACTERSTICAS
gar Mac Conkey e gar Eosin Metilene Blue (EMB) so meios diferenciais, mas no seletivos entre
os Gram negativos entricos.
O gar Salmonella-Shigella funciona bem para para as Salmonella mas pode inibir Shigella.
gar verde brilhante (VB) seletivo para Salmonella sp, mas no indicado para Salmonella typhi
e S. paratyphi.
Caldos de enriquecimento:
Indicado para detectar baixo nmero de Salmonella ou Campylobacter em portadores. Muitos
laboratrios esto abandonando o uso de caldos de enriquecimento pela baixa recuperao de
patgenos.
Caldo GN (Gram Negativo) - enriquecimento de Salmonella e Shigella spp Caldo Selenito F principalmente Salmonella spp Caldo tetrationato - apenas algumas especies de Salmonella spp e
exclui S. typhi.
Campy-tioglicolato - apenas para pesquisa de portadores de C. jejuni Salina fosfatada e tamponada
pH 7,6 - para semear fezes e conservar em geladeira por trs semanas para pesquisa de portadores
de Yersinia enterocolitica, mas no indicado para rotina.
RELATRIO DE RESULTADOS
Com o reconhecimento do nmero crescente de agentes bacterianos causadores de diarria, tornou-se
importante a identificao especfica de microrganismos para o qual as amostras fecais so
examinadas.
incorreto emitir o resultado como no foram isolados patgenos, se as fezes foram cultivadas
somente para recuperar alguns patgenos. Ao invs disso o relatrio deve afirmar no foram
isoladas Salmonella, Shigella e Campylobacter ou para algum outro patgeno efetivamente
pesquisado.
O protocolo dever prever tambm laudos relatando a ausncia da flora fecal Gram negativa e a
presena de quantidade significativa de microrganismos como S. aureus, leveduras e
Pseudomonas aeruginosa.
Mecanismo de
Patogenicidade
Tcnica
Enriquecimento
Meios de cultura
Campylobacter, C.
jejuni
Invaso
Culturas
incubadas em
ambiente de
microaerofilia
42C.
no
Mod - 29
Escherichia coli
Enteropatognica,
E. coli Invasora
Enterotoxinas
(LT e ST) Invaso
24-48 h
aerobiose, 3537oC.
No
E. coli
enterohemorrgica
O157:H7 e outras
Verotoxinas
(toxina Shigalike)
24-48h
aerobiose, 3537oC.
no
Salmonella spp.
Invaso
24-48h
aerobiose, 3537oC.
Selenito F *,
Caldo
tetrationato *,
Caldo GN *.
Vibrio cholerae, V.
parahaemolyticus
Toxina colrica
Toxinas
24-48h
aerobiose, 3537oC.
gua peptonada
alcalina por 6-12
h.
Yersinia
enterocolitica
Invaso
Salina
glicerinada
tamponada 45C por trs
semanas, no
recomendado.
* atualmente questiona-se a necessidade do uso de caldos de enriquecimento, ficando a critrio de cada usurio.
Mod - 30
5. INFECES ABDOMINAIS
AGENTES MICROBIANOS MAIS FREQUENTES
Infeces hepticas, incluindo abscessos: Streptococcus spp., Escherichia coli, Proteus spp.,
Peptostreptococcus spp., Fusobacterium spp., Bacteroides spp., Enterococcus spp., Entamoeba
histolytica, Leishmania donovani (kalazar), microsporidiose.
Infeces pancreticas: E. coli, Klebsiella spp., Proteus spp., Enterococcus spp., Staphylococcus
spp., Candida spp., Pseudomonas spp., Streptococcus spp., Trulopsis glabrata, Haemophilus spp.,
Corynebacterium spp., Serratia marcescens.
Abscesso esplnico: os anteriores, e ainda Salmonella spp., Shigella spp., Bacteroides spp.,
Fusobacterium spp., Propionibacterium spp., Clostridium spp., Fusobacterium spp., Aspergillus
spp., Leishmania donovani, microsporidiose.
S. pneumoniae (15%),
Meios de cultura para bactrias aerbias: gar sangue, gar Mac Conkey - incubar a 35C
durante 18 a 24 horas, verificar crescimento bacteriano em ambas as placas; se negativo,
incubar mais 24 hs; se positivo, identificar o(s) microrganismo(s).
Mod - 31
Meios de cultura para bactrias anaerbias estritas: gar infuso de crebro corao ou
Brucella gar acrescido de vitamina K e hemina - incubar a 35C em jarra com gerador de
anaerobiose durante 48 hs; verificar crescimento; se negativo, repicar a amostra do
tioglicolato suplementado com hemina e vitamina K a cada 48 h at completar 7 dias; se
positivo, proceder identificao da bactria. Pode-se semear em paralelo em meio seletivo e
enriquecido para anaerbios como o gar sangue com hemcias rompidas, adicionado de
Kanamicina e Vancomicina (LKV) seletivo para Bacteroides e Prevotella.
Se houver suspeita clnica de fungos, semear tambm em gar Sabouraud glicose; incubar a
temperatura ambiente durante 4 semanas.
Mod - 32
Meningite aguda
Meningite crnica
Encefalite, mielite e neurite
Abscesso cerebral
Empiema subdural, abscesso epidural e flebite intracraniana supurativa
Infeces associadas a procedimentos invasivos e dispositivos implantados no SNC
Bactrias
Vrus
Fungos
Protozorios
Rickettsias
Fungos: Cryptococcus spp., Candida spp., Histoplasma capsulatum, Aspergillus spp. e outros
fungos filamentososos oportunistas
Leses Focais
Encefalite
tuberculose
actinomicose
citomegalovrus
cryptococose
blastomicose
enterovrus
histoplasmose
cisticercose
sarampo
candidase
aspergilose
sfilis
nocardiose
outras encefalites a
vrus
brucelose
esquistossomose
Mod - 33
toxoplasmose
Causas mais frequentes de encefalomielite
Vrus (a mais importante)
Enterovrus e herpes-virus
Riquetsias
Doena de Lyme
Bacteriana
Fngica
Amebas
Naegleria e Acanthamoeba
Protozorios
Outras
60-70%
Bacteroides spp.
20-40%
Enterobactrias
23-33%
Staphylococcus aureus
10-15%
Fungos
10-15%
S. pneumoniae
<1%
H. influenzae
<1%
<1%
Protozorios e helmintos
<1%
Fungos: Aspergillus spp., Candida spp., Cryptococcus spp. e outros fungos oportunistas
Idade
Mod - 34
INFECO HOSPITALAR
Enterobactrias, Acinetobacter spp., Pseudomonas spp., Candida spp., Staphylococcus spp.
Nadar em lagoas
Inundaes
Leptospirose
Criptococose, histoplasmose
Priso, AIDS
Tuberculose
Meningite recurrente
Pneumococo
Pneumococo, hemfilos
Associado celulite
Abscesso cerebral
Trauma craniano
Fstula liqurica
(otorria ou rinorria)
Diabetes
Alcoolismo e esplenectomia
Pneumococo
Endocardite bacteriana
Prtese em SNC
Sepse dental
Mod - 35
Endocardite bacteriana
Paciente imunocomprometido
DIAGNSTICO LABORATORIAL
DADOS LABORATORIAIS RELEVANTES
A positividade do Gram tambm varia conforme o agente etiolgico, sendo de 90% para o
pneumococo, 86% para o hemfilos, 75% para o meningococo, menos de 50% para Listeria
monocytogenes e 50% para outros Gram negativos. A colorao de Gram no cora bactrias como
os micoplasmas e, evidentemente, no detecta os vrus.
Chances de se obter informaes sobre a etiologia pelo Gram ou pela cultura se reduzem a menos
de 50% quando h uso prvio de antimicrobianos, podendo o LCR ficar estril em 90-100% dos
casos aps 24 a 36 horas de antibioticoterapia adequada.
Aglutinao com partculas de ltex (sensibilidade de 70 a 90%): existem testes disponveis para
detectar meningococo (A e C), hemfilos tipo B, pneumococo (polivalente), Streptococcus do
grupo B, E. coli K1 e Cryptococcus spp. Alguns kits no incluem o meningococo B ou podem ter
uma sensibilidade inferior para este antgeno. Existem tambm testes baseados em coaglutinao
de Staphylococcus, que tem uma sensibilidade um pouco inferior aglutinao pelo ltex. Estes
testes vem sendo cada vez menos utilizados pelo elevado custo.
Teste do Limulus pode ser utilizado para detectar endotoxina de bactrias Gram negativas, tendo
alta sensibilidade e especificidade para concentraes 10 3 UFC/ml.
Cultura em gar chocolate pode confirmar a etiologia bacteriana e permitir o estudo das
sensibilidades aos antimicrobianos.
Os vrus podem ser pesquisados por mtodos diretos ou cultura para vrus com tipagem. A
pesquisa monoclonal e o PCR representam os mtodos de maior praticidade, especificidade e
sensibildade que se dispe na atualidade.
PROCESSAMENTO
DE AMOSTRAS
- LCR
Devido importncia vital do SNC, e, portanto, a gravidade do quadro clnico que acompanha a
maioria das doenas e a urgncia do diagnstico em uma rea topogrfica estril, a eficincia um
aspecto crtico (rapidez, testes adequados e cuidados para evitar contaminao). Obter qualquer
amostra antes de iniciar uso de antimicrobianos.
LCR deve ter mxima prioridade devendo ser processado imediatamente. Avalie e anote o volume e o
aspecto do LCR.
Mod - 36
LCR por puno lombar ou de reservatrio de prteses (vide tcnica para coleta de LCR)
Coletar o segundo tubo, obtendo idealmente os seguintes volumes:
-
1-2 ml para Gram, pesquisa de antgenos e cultura (na falta de planto de microbiologia pode ser
semeda a cultura [5 a 10 gotas] diretamente durante a puno para coleta do LCR, em tubos de
gar chocolate, previamente aquecidos a 35 oC, preparados h menos de 30 dias); pode-se semear
um tubo com gar sangue (base Mueller Hinton ou gar brucella) e um tubo com caldo tioglicolato
caso haja suspeita de anaerbios
Exame da cultura
Durante 72 horas observe diariamente a presena de crescimento nas placas e tubos com gar
chocolate. Pode-se prolongar a incubao para o total de sete dias.
No tubo com caldo deve ser observada turvao diariamente e descartado aps 7 dias. Caso haja
crescimento, fazer um Gram e semear em placa de gar chocolate para isolamento, identificao e
antibiograma.
Interpretao do exame
Contagem de glbulos brancos = > 1.200 mm 3 sugere meningite bacteriana (valores menores no
excluem).
Cloretos < 110 mEq/L sugere meningite por tuberculose se afastada outra etiologia bacteriana.
Atualmente pouco utilizado devido a disponiblidade de testes mais especficos.
PESQUISA
DE ANTGENOS
Aglutinaes que ocorrerem com mais de um anticorpo devem ser relatadas como indeterminadas ou
no interpretvel. Pode-se tentar diluir o LCR em salina 1:2 ou 1:4. Repetir os testes e observar os
resultados.
Mod - 37
Rotina de Planto
Se no for possvel encaminhar ao Laboratrio de Microbiologia (planto de fim de semana) ou porque
sua rotina lenta, o LCR deve ser processado pelo laboratrio de urgncia (planto) ou por mdicos
ou analistas treinados para os seguintes procedimentos:
Agitar no vortex o tubo com o resto do sobrenadante e sedimento. Em condies asspticas (vide
acima), semear 3-4 gotas do material em placa de gar-chocolate e, se disponvel, tambm em
placa de gar-sangue e em tubo com caldo tioglicolato sem indicador.
Colocar as placas e tubo na estufa entre 35 a 37 oC, sendo a placa de gar chocolate em jarra com
vela e umidade (CO2 e umidade).
no caso de amostras lmpidas, pode-se depositar duas gotas e fazer esfregao menos extenso,
quando mais purulento, fazer esfregao mais espalhado.
PROCESSAMENTO
DE AMOSTRAS
ABCESSO
CEREBRAL
Obter o material por puno e aspirao, mantendo-o na seringa para ser enviado ao laboratrio.
Como a participao de anaerbios importante, o material deve ser colhido em frascos com
vcuo ou na prpria seringa.
Manipular material de SNC com luvas, evitar aerossol e encaminhar o mais rpido possvel ao
laboratrio. Amostras para virologia devem ser encaminhadas ao laboratrio rapidamente
temperatura ambiente. As pesquisas monoclonais de vrus exigem que as clulas estejam ntegras.
Apenas material para investigaes futuras e pesquisas por mtodos moleculares de agentes RNA
deve ser obrigatoriamente conservado entre -20 a -70 oC.
Semear em placa com gar brucella e suplementos hemina e vitamina K para cultura de
anaerbios em jarra apropriada com gerador de anaerobiose a 35oC.
cocos Gram positivos em cachos agrupados: Staphylococcus aureus (ou coagulase neg.)
cocos Gram positivos em cadeias longas ou aos pares: Streptococcus (S. pneumoniae ou
outros estreptococos aerbios ou anaerbios)
Mod - 39
7. INFECES SISTMICAS
INTRODUO
A presena de microrganismos viveis no sangue do paciente pode levar a um considervel aumento
da morbidade e da mortalidade. Devemos tambm lembrar que este fato representa uma das mais
importantes complicaes do processo infeccioso, o que torna a hemocultura um exame de
significativo valor preditivo de infeco.
A maioria dos episdios spticos de origem hospitalar e, s vezes, resultado de microrganismos que
apresentam grande resistncia aos antimicrobianos, com uma mortalidade bem superior aos episdios
que ocorrem na comunidade.
A invaso do sangue por microrganismos geralmente ocorre por um dos seguintes mecanismos:
1.
2.
A presena de bacteremia ou fungemia representa tambm uma falha nas defesas do hospedeiro em
localizar e neutralizar uma determinada infeco em seu foco inicial, ou tambm numa eventual falha
mdica em remover ou drenar um foco infeccioso. Geralmente, num paciente imunocompetente, as
defesas naturais respondem prontamente presena de microrganismos estranhos. Esta eliminao
pode ser menos eficiente quando os microrganismos so encapsulados, ou mais eficiente quando o
paciente j apresenta anticorpos contra o organismo infectante. Existem tambm situaes em que
esta eliminao no eficaz, como nos casos de infeces com focos intravasculares ou em
endocardites.
Conceitualmente, ainda se classificam as bacteremias em transitria, intermitentes ou contnuas. A do
tipo transitria, que em geral rpida com durao de alguns minutos a poucas horas, a mais
comum e ocorre aps uma manipulao de algum tecido infectado (abscessos e furnculos), durante
algum procedimento cirrgico que envolve algum tecido contaminado ou colonizado (cavidade oral,
cistoscopia, endoscopia) ou ocorre em algumas infeces agudas como pneumonia, meningite, artrite
e osteomielite. Quando a bacteremia se manifesta, com intervalos variveis de tempo (com o mesmo
microrganismo) denominada de intermitente. Geralmente este tipo de bacteremia ocorre em
processos infecciosos relacionados a abscessos intra-abdominais, pneumonias e outras. A bacteremia
contnua caracterstica da endocardite infecciosa e de outras infeces intravasculares.
As bacteremias na grande maioria das vezes so causadas por um nico microrganismo, porm em
algumas situaes so de etiologia polimicrobiana.
Embora qualquer infeco localizada possa se disseminar para o sangue, a bacteremia e/ou fungemia
geralmente so mais freqentemente devidas dispositivos intra-vasculares (catteres), infeces
abdominais, infeces dos tratos respiratrio e urinrio. Bacteremia e fungemia so termos que
simplesmente identificam a presena de bactrias ou fungos no sangue. Sepse a presena de
sintomas clnicos de infeco na presena ou no de hemocultura positiva.
MICRORGANISMOS
FREQENTEMENTE ENVOLVIDOS
Mod - 40
Alguns microrganismos em cerca de 90% dos casos sugerem uma infeco verdadeira como S.
aureus, E. coli e outras enterobactrias, Pseudomonas aeruginosa, S. pneumoniae e Candida
albicans.
Outros agentes como Corynebacterium spp., Bacillus spp. e Propionibacterium acnes, raramente
representam uma verdadeira bacteremia (menos de 5% dos casos so verdadeiros).
Aeromonas hydrophila
Bacillus spp.
Campylobacter spp.
Capnocytophaga spp.
C. septicum
Corynebacterium jeikeium
L. monocytogenes
Mycobacterium fortuitum/chelonei
Rhodococcus equii
S. typhimurium
Streptococcus do grupo G
Streptococcus bovis
DIAGNSTICO EM HEMOCULTURAS
NMERO
DE AMOSTRAS
Recomenda-se colher duas a trs amostras por episdio de bacteremia ou sepse, que permite o
isolamento do agente bacteriano ou fngico em 95% dos eventos. Duas ou trs amostras tambm
representam volume de sangue adequado para o isolamento, tambm permitem interpretar pelo
nmero de amostras positivas o provvel contaminante do isolamento do agente etiolgico. Um
nmero maior de amostras traz pouco benefcio, aumentando o custo, trabalho e depletando o
paciente.
PROCEDIMENTOS
E INTERVALO DE COLETA
As amostras so coletadas por puno venosa, uma aps a outra em locais diferentes, logo que inicie
o pico febril ou a bacteremia. Preferencialmente no colher de cateter, exceto para diagnstico de
infeco ou colonizao do cateter; colher uma a duas amostras perifricas e uma de cateter. Para
adultos em cada puno coleta-se 8 a 10 ml de sangue em frascos para aerbios ou opcionalmente a
segunda ou terceira coleta em frasco para anaerbios.
VOLUME
DE SANGUE
uma das variveis mais crticas para a positividade do exame. Quanto maior o volume coletado,
maior ser a positividade do mesmo. Temos que respeitar a idade do paciente (adulto ou criana) e o
volume recomendado de acordo com os tipos de frascos aerbios e anaerbios utilizados na realizao
dos exames.
O volume recomendado para coleta de cada puno de adulto de 20 a 30 ml, distribudos pelo
nmero de frascos indicados pela sua capacidade e respeitando a proporo de 1 ml de sangue para
cada 10 ml ou no mnimo 5 ml de caldo.
Mod - 41
Como as bacteremias em crianas tem cerca de 100 a 1000 bactrias/ml em comparao com < 1 a
10 bactrias/ml nos adultos, o volume pode ser menor (3 a 5ml), respeitando-se tambm a proporo
de no mnimo 1:5 at 1:10 de sangue e meio de cultura ou orientao do fabricante.
PROCEDIMENTOS
Embora amplamente utilizada por razes de custos, no a metodologia mais indicada, por ser
mais trabalhosa, alm de favorecer a possibilidade de contaminao das amostras examinadas.
Alm do frasco contendo caldo BHI ou peptona de soja, o meio manual mais interessante inclui
uma fase lquida e outra slida, como o meio de Castaeda, permitindo a observao de
crescimento na superfcie do gar.
Um mnimo de sete dias de incubao e agitao moderada dos frascos so fatores importantes
para uma maior positividade das amostras; pelo menos trs subcultivos enriquecidos em gar
chocolate devem ser realizados durante este prazo. Tanto os frascos de hemocultura como os
subcultivos, devem ser mantidos temperatura de 36 a 37 oC.
O primeiro subcultivo pode ser feito aps 24 horas de incubao, o segundo aps 72 horas e o
terceiro aps uma semana.
A grande maioria dos microrganismos isolada nas primeiras 72 horas aps a coleta do sangue.
Em suspeitas diagnsticas de microrganismos de crescimento mais lento, perodos mais
prolongados de incubao devem ser indicados. Comumente incuba-se temperatura entre 35 a
37oC.
A observao dos frascos pode ser feita diariamente, procurando-se evidncias macroscpicas de
crescimento de microrganismos como: hemlise, turbidez, produo de gs, bolhas, pelcula de
crescimento, grumos, etc.
SISTEMAS
AUTOMATIZADOS DE HEMOCULTURA
No intuito de se processar as hemoculturas de um modo mais eficiente, nos ltimos anos alguns
sistemas automatizados para a execuo destes exames foram desenvolvidos.
O primeiro sistema comercial automatizado foi o Bactec modelo 460, que usa metodologia
radiomtrica (Becton Dickinson Microbiology Systems). Esta metodologia detectava o crescimento
microbiano atravs da monitorizao da concentrao de CO 2 marcado com carbono 14 presente no
frasco, medindo a liberao na atmosfera dos frascos devido ao metabolismo microbiano. O aparelho
registrava um valor atravs da sua medio por um contador de radiao beta e anotava esse valor
por um nmero conhecido como ndice de crescimento. Atualmente essa metodologia est em uso
praticamente somente para a deteco de micobactrias e tambm para realizao de testes de
avaliao de sensibilidade aos tuberculostticos.
Atualmente existem no mercado diversos outros aparelhos automatizados para a realizao de
hemoculturas que apresentam grande vantagem em relao s metodologias manuais, principalmente
no que se refere rapidez dos resultados e diminuio do trabalho tcnico. Geralmente os protocolos
so de cinco dias, mas a grande maioria dos resultados positivos ocorre nas primeiras 48 horas. As
metodologias utilizadas pelos novos aparelhos automatizados (Bactec 9120/9240, BacT/Alert 120/240,
ESP 128/256/384 e Vital 200/300/400) so baseadas em mtodos colorimtricos, fluorescentes ou de
presso.
Sistema Isolator ou lise centrifugao (Wampole Laboratories, Cranbury, NJ) um tubo especial que
contm saponina como agente lisante para clulas brancas e vermelhas, propilenoglicol com
substncia anti-espuma, polianetol sulfonato de sdio (SPS) e EDTA como anticoagulantes, e um
lquido fluoroqumico inerte para concentar os microrganismos durante a centrifugao. Para
realizao da tcnica necessria uma observao criteriosa dos procedimentos tcnicos
recomendados pelo fabricante, utilizando para isso os reagentes, o material e o equipamento
apropriado (incluindo centrfuga especial). Indicado para cultivo de fungos dimrficos, leveduras e
outras bactrias incluindo fastidiosas.
Inmeros trabalhos mostram as vantagens destas metodologias e a opo da escolha do equipamento
em geral mais relacionada ao custo do equipamento e/ou de seus frascos de consumo. Algumas
vantagens dessa metodologia so:
Mod - 42
Menor risco de contaminao laboratorial, pois s faz-se repique das amostras positivas
No necessrio repicar amostra negativa
Economia de tempo, material (agulha e seringa) e menor risco de manipulao.
MEIOS
DE CULTURA
Atualmente os laboratrios que ainda utilizam metodologias manuais, em sua grande maioria utilizam
meios de cultura comerciais, aerbios e anaerbios, para a realizao de hemoculturas. Trata-se
geralmente de caldo infuso cerebro-corao (BHI) ou caldo casena digerida da soja, para aerbios e
facultativos e leveduras e caldo Columbia para anaerbios que devem favorecer o crescimento da
maioria dos microrganismos, inclusive dos considerados fastidiosos.
A maioria destes meios tem na sua composio o anticoagulante SPS (0,025 a 0,05%), o qual
apresenta ao inibidora para lisozimas, apresenta certa ao inibitria frente a determinadas
concentraes de aminoglicosdeos e polimixinas, pode ter ao inibitria para algumas fraes do
complemento e inibe parcialmente a fagocitose. Por outro lado este anticoagulante pode apresentar
certa ao inibidora para o isolamento de determinados microrganismos, como por exemplo, N.
meningitidis, N. gonorrhoeae, Gardnerella vaginalis, Peptostreptococcus spp., Moraxella catarrhalis e
outros. Da a recomendao de se acrescentar gelatina na concentrao de 1,2% na composio
destes meios para inibir parcialmente o efeito nocivo do SPS quando h suspeita de um dos agentes
acima citados.
Para os laboratrios que dispe de metodologias automatizadas, h possibilidade do uso de meios de
cultura com resinas que apresentam ao inibitria para antimicrobianos, til pacientes que receberam
antibioticoterapia prvia.
Os frascos aerbios devem manter rea suficiente de volume de ar para permitir crescimento de
bactrias aerbias estritas como Pseudomonas aeruginosa e leveduras, enquanto os frascos para
anaerbios estritos devem ter uma mistura de gases livres de oxignio, evitando-se a introduo de ar
durante a coleta. Agitao do meio um fator importante para facilitar a multiplicao bacteriana,
principalmente dos aerbios estritos e facultativos.
No h evidencias que indiquem o uso rotineiro de frascos de hemocultura para anaerbios,
associados aos frascos para aerbios, exceto se este for o objetivo principal ou em patologias
freqentemente associadas aos anaerbios como processos infecciosos plvicos, sepse de origem
abdominal, etc. Em geral os meios para aerbios suportam o crescimento dos anaerbios mais
comuns e a incubao no necessita ser superior a 7 dias.
Para fungos filamentosos a temperatura melhor entre 27 a 30 oC, podendo crescer tambm 37oC.
Para leveduras 5 a 7 dias 35 oC pode ser suficiente, enquanto que para fungos dimrficos
(Histoplasma, Paracoccidioides) pode ser necessrio 4 a 6 semanas, sendo o caldo BHI o melhor.
Pacientes com infeco avanada pelo HIV tem risco elevado de infeces por M. tuberculosis e pelo
complexo Mycobacterium avium, podendo tambm apresentar bacteremia, bem como outros
imunossuprimidos. A inoculao do sangue concentrado pode ser feita em gar Lowenstein-Jensen ou
Middlebrook 7H11 ou usar os frascos especficos para Mycobacterium de sistemas automatizados
como Bactec. A concentrao pode ser feita pelo sistema Isolator (lise-centrifugao).
CULTURA
(MTODO
DE
MAKI)
o mtodo mais utilizado para determinar a relao entre colonizao do cateter e infeco. Os
mesmos cuidados de insero devem ser adotados na retirada do cateter. A pele em volta deve ser
cuidadosamente desinfetada com soluo de iodo ou PVPI, e o excesso removido com alcool a 70%.
Um segmento distal (que estava inserido na veia do paciente), de aproximadamente 5 cm do cateter
assepticamente cortado com auxlio de tesoura estril, colocado em um frasco estril seco, e remetido
em um prazo mnimo ao laboratrio. O segmento do cateter rolado (evitar esfregar) 4 a 5 vezes
Mod - 43
sobre a superfcie de uma placa de gar sangue, com auxlio de uma pina estril. Aps incubao
durante 18-24 horas 37 oC, realizada uma anlise quantitativa e a deteco de 15 ou mais colnias
correlacionada com o fato do cateter constituir a fonte de infeco. Tcnicas quantitativas pareadas
ou no com hemocultura perifrica so mais especficas que as tcnicas semi-quantitativas.
TCNICAS QUANTITATIVAS
Segmento de cateter (lumen e/ou superfcie externa)
Cultura do lumen: o lumen do cateter pode ser cultivado injetando-se salina no seu interior com
uma agulha.
Cultura da superfcie externa: agita-se no mixer o segmento do cateter em salina. Faz-se cultura
quantitativa (semea-se 100 l do lavado em gar sangue). considerado significativo quando a
contagem for 102 UFC pelo segmento de cateter analisado.
AMOSTRAS
PAREADAS DE SANGUE
Para diagnstico de infeco relacionada a cateter (IRC), colher amostras pareadas: perifrica e
cateter. Utilizam-se volumes iguais de sangue colhido das duas vias e semeia-se pela tcnica do pour
plate. O exame quantitativo significativo para infeco do cateter deve revelar de 5 a 10x mais
bactrias por ml no sangue obtido do cateter do que na amostra perifrica.
Mod - 44
8. INFECES GENITAIS
INTRODUO
Os microrganismos que colonizam o trato genital feminino incluem lactobacilos, difterides,
Gardnerella vaginalis, estafilococos coagulase negativos, Staphylococcus aureus, Streptococcus
agalactiae, Enterococcus spp., estreptococos alfa e gama hemolticos, Escherichia coli e leveduras.
A uretra masculina normalmente contm relativamente poucos microrganismos encontrados na pele,
tais como: estafilococos, micrococos, corynebactrias e estreptococos alfa hemolticos.
Muitas infeces do trato genital feminino tm origem em microrganismos endgenos. A
patogenicidade deles pode ser facilitada por fatores do hospedeiro, como por infeces primrias
causadas por outros microrganismos como: herpes simplex vrus (HSV), o vrus papiloma humano
(HPV), Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, ou ainda com infeces especficas como
aquelas causadas pela Neisseria gonorrhoeae.
O Laboratrio de Microbiologia deve estar capacitado para detectar os principais agentes das doenas
sexualmente transmissveis: Neisseria gonorrhoeae, Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi,
Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma hominis.
PRINCIPAIS SNDROMES INFECCIOSAS DO TRATO GENITAL
Vaginite Infecciosa
Vulvo-vaginites em crianas
Vaginite no-infecciosa
Menos comuns:
-
CANDIDASE VULVO-VAGINAL
Os dados epidemiolgicos da vulvovaginite por Cndida so incompletos. A candidase vulvovaginal
rara em mulheres antes da menarca. Em mulheres at os 25 anos, pelo menos um episdio de
candidase freqentemente encontrado. Nas mulheres na pr-menopausa, em pelo menos 75%
delas, observa-se um episdio de candidase vulvovaginal. Nas mulheres ps-menopausa, a incidncia
mais rara. Parece que o mecanismo imune local da vagina responsvel pela freqncia dos
episdios e a susceptibilidade associada a uma condio de mucosa no-secretora, o que facilitaria a
implantao da levedura.
A candidase vulvovaginal no tradicionalmente considerada como doena sexualmente transmitida,
pois ocorre em mulheres celibatrias e a Candida spp. tambm faz parte da microbiota vaginal
normal. Episdio individual de candidase vulvovaginal parece no estar relacionado faixa etria nem
ao nmero de parceiros ou freqncia de relaes sexuais.
Mod - 45
A candidase vulvovaginal recorrente definida como quatro ou mais episdios da infeco por ano e
ocorre em menos de 5% de mulheres sadias. Entretanto ela importante em pacientes diabticas no
controladas e nas que fazem uso de drogas imunossupressoras.
A Candida albicans a responsvel por 80-92% dos episdios de candidase vulvo-vaginal. Mais
recentemente outras espcies como Candida (Torulopsis) glabrata e Candida krusei tambm foram
consideradas patognicas.
FATORES
PREDISPONENTES
Incluem gravidez, diabetes, antimicrobianos de amplo espectro e contraceptivo oral com altas taxas
de estrgenos.
DIAGNSTICO LABORATORIAL
O diagnstico laboratorial facilmente realizado no laboratrio de microbiologia, a partir do contedo
vaginal ou secreo uretral. Podem ser utilizados os seguintes mtodos:
Identificao das leveduras por mtodos automatizados ou atravs de provas clssicas como:
auxonograma, zimograma e pesquisa de tubo germinativo.
especficas:
miconazol,
fluconazol,
ketoconazol,
itraconazol,
TRICOMONASE
A Trichomonas vaginalis afeta aproximadamente 180 milhes de mulheres em todo o mundo. Em
muitos pases industrializados a prevalncia da tricomonase tem diminudo. A Trichomonas vaginalis
identificada em 30-40% dos homens, parceiros sexuais de mulheres infectadas. Ela tambm est
associada com outras doenas sexualmente transmitidas. Na mulher, a tricomonase varia de
portadora assintomtica at doena aguda inflamatria. Em mulheres grvidas, sem tratamento, est
associada com ruptura de membranas, nascimento prematuro e celulite ps-histerectomia.
DIAGNSTICO LABORATORIAL
O diagnstico laboratorial da tricomonase pode ser realizado atravs de exames diretos, cultura ou
tcnicas moleculares. O pH vaginal est marcadamente elevado e h aumento do nmero de
leuccitos polimorfonucleares. A visualizao de Trichomonas mveis pelo exame direto a fresco
positiva em cerca de 50-70% dos casos confirmados em cultura. Embora os Trichomonas possam ser
visualizadas atravs de esfregaos pelo Papanicolaou, a sensibilidade de apenas 60-70%.
Microbiologistas experientes visualizam facilmente estas estruturas pelo mtodo de Gram que detecta
tambm as formas imveis.
As tcnicas de cultura possuem alta sensibilidade (95%) e devem ser realizadas quando os exames
diretos so negativos e o pH est aumentado na presena de numerosos leuccitos polimorfoncleares.
Um diagnstico rpido pode ser realizado atravs de Kits usando sondas de DNA e anticorpos
monoclonais com sensibilidade de 90% e especificidade de 99,8%. Os testes mais freqentemente
utilizados so:
Mod - 46
VAGINOSE BACTERIANA
a mais frequente causa de vaginite em mulheres sexualmente ativas. Alm da Gardnerella vaginalis
outras bactrias esto envolvidas, tais como: Mobilluncus spp., Bacteroides spp. e Mycoplasma
hominis.
Vrios estudos tm demonstrado um aumento de 2 a 7% na taxa de risco de nascimentos prematuros
em mulheres com vaginose bacteriana. A vaginose bacteriana representa uma mudana complexa na
microbiota vaginal, caracterizada pela reduo na prevalncia e concentrao de lactobacilos
produtores de perxido de hidrognio e um aumento na prevalncia e concentrao de Gardnerella
vaginalis, Mobiluncus spp., Mycoplasma hominis, bacilos Gram negativos anaerbios principalmente
dos gneros Prevotella, Porphyromonas e Bacteroides.
A transmissibilidade da vaginose bacteriana foi demonstrada por Gardner e Dukes (1955) e a doena
pode ser considerada uma DST. A transmisso no suficiente para explicar todos os casos, pois o
microrganismo encontrado normalmente em algumas mulheres sadias e tambm em jovens sem
atividade sexual. Os fatores de risco para vaginose bacteriana incluem o uso de dispositivo
intrauterino e gravidez.
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Os critrios para se estabelecer o diagnstico de vaginose bacteriana so simples e podem ser usados
na clnica e no Laboratrio com bastante sucesso. A presena de clue cells, clulas escamosas do
epitlio vaginal cobertas com bactrias de modo que os bordos da clula perdem a definio, o
achado de melhor valor preditivo de vaginose bacteriana. O exame pelo Gram de secreo vaginal o
mtodo de escolha para visualizao de clue cells com sensibilidade de 93% e especificidade de
70%.
A cultura para G. vaginalis positiva em todos os casos de vaginose bacteriana, e pode ser detectada
em 50-60% de mulheres sadias assintomticas. Desta maneira a cultura vaginal, isoladamente, no
deve fazer parte do diagnstico de vaginose bacteriana. O uso de metodologia de sondas de DNA,
possui sensibilidade e especificidade semelhantes cultura, mas o seu custo muito elevado.
No diagnstico laboratorial os seguintes testes so freqentemente utilizados:
pH vaginal > 4,5; odor desagradvel aps a adio de KOH 10% secreo
Bacterioscpico pelo Gram: ausncia ou diminuio de leuccitos e de lactobacilo, presena de
clue-cells, grande quantidade de bacilos Gram-variveis (lbeis)
Cultura: isolamento em meio seletivo (gar vaginalis)
Pesquisa pelo uso de metodologia de sondas de DNA
Incidncia relativa
Fatores demogrficos
Vaginose bacteriana
Candidase
Trichomonase
35% a 50%
20% a 25%
5% a 15%
Populao dependente:
- 20%: clnicas de
planejamento familiar.
- 35%: clinicas de DST
Fatores de risco:
diabetes, gravidez,
contraceptivo oral, baixa
imunidade.
Transmitida sexualmente,
alta incidncia com
outras DST.
- 10-30%: em mulheres
grvidas
Patgenos Associados
Incidncia de co-infeco
Vaginose bacteriana
Mod - 47
gonorrhoeae
Candidase
Candida spp.
Tricomonase
Trichomonas vaginalis
INFECO GONOCCICA
A gonorria uma doena antiga e o agente, Neisseria gonorrhoeae, foi descrito por Neisser em 1879.
Apesar de ser uma doena bem documentada de longa data, continua sendo de difcil controle. O
sucesso e a persistncia histrica do gonococo como patgeno amplamente distribudo se deve ao fato
de que o homem o nico hospedeiro natural e a forma de transmisso mais comum a via sexual.
A doena envolve primariamente o trato genito-urinrio podendo ocorrer vrias complicaes, entre as
quais, endocardite, meningite, artrite e pielonefrite. A orofaringe do reto e a conjuntiva podem
tambm ser primariamente infectadas. As infeces causadas por Neisseria gonorrhoeae na mulher
incluem uretrite, cervicite, podendo invadir as glndulas de Bartholin e de Skene. A partir destas
estruturas, a infeco pode disseminar-se para o endomtrio, trompas ovarianas, ovrios, superfcie
peritoneal e estruturas contguas, causando a Doena Inflamatria Plvica (DIP). Muitos casos de DIP
esto primariamente associados com outros patgenos, como Chlamydia trachomatis e uma gama
variada de bactrias anaerbias e facultativas. A oftalmia neonatorum ocorre em recm-nascidos, de
mes portadoras, havendo contaminao no canal do parto. A infeco no homem se apresenta
usualmente sob a forma de uretrite aguda. Entre os sintomas precoces esto: a sensao de
desconforto e dor uretral.
A resposta inflamatria inicial um corrimento mucide, seguido por um exudato purulento que
aparece 2 a 5 dias aps a relao suspeita. A infeco pode progredir da uretra anterior para a uretra
posterior em 10 a 14 dias. Os sintomas incluem aumento da disria, poliria e ocasionalmente febre e
dor de cabea. As glndulas, dutos e vesculas do trato genito-urinrio podem tornar-se stios de
complicaes locais. Infeco crnica da prstata, vescula seminal e epiddimo, bem como
estreitamento uretral, podem ocorrer. Dentre os fatores que contribuem para o aumento da incidncia
da gonorria esto: a bactria, o hospedeiro e as caractersticas clnicas da doena.
FATORES
Reinfeo, o que sugere que a infeco no proporciona uma resposta protetora do hospedeiro.
Indivduos infectados produzem resposta adequada com anticorpos anti-N. gonorrhoeae, sendo
esta resposta o IgA contra as protenas da superfcie bacteriana. Por que ento estas pessoas no
se tornam imunes a reinfeco? A razo principal que N. gonorrhoeae varia seus antgenos de
superfcie, especialmente os antgenos dos pili de modo que a resposta IgA original se torna
rapidamente obsoleta. No caso dos pili, a bactria possui um repertrio antignico que pode
chegar a 1 milho de variaes antignicas.
FATORES
Mod - 48
risco de contrair a gonorria seja pelo aumento do nmero de parceiros como pela maior
freqncia de relao sexual.
Recidivas - pacientes com infeces gonoccicas repetidas contribuem de forma intensa para o
aumento da incidncia de gonorria. Assim, pacientes que continuam a ter relao sexual sob as
mesmas condies e com o mesmo tipo de populao, possuem alto risco de contrair uma
segunda infeco. A recidiva um problema significativo em pacientes jovens.
CARACTERSTICAS
CLNICAS DA DOENA
DIAGNSTICO LABORATORIAL
O gonococo uma bactria frgil. As amostras clnicas submetidas a cultura devem ser semeadas
imediatamente, pois a bactria se auto-lisa com muita facilidade e sensvel a variaes de
temperatura. As amostras devem ser obtidas sempre antes do incio do uso de antimicrobianos.
Quando necessrio transportar a amostra at o laboratrio, medidas adequadas devem ser tomadas,
como o uso de meios de transporte adequados ao gonococo. Para amostras obtidas de articulaes, a
cultura deve ser realizada em meio hipertnico contendo 20% de sacarose ou 20% de soro de cavalo,
pois nestas amostras, o gonococo se encontra na forma L, desprovida de parede celular e no cresce
nos meios habituais. A no observncia dessas recomendaes implica na obteno de culturas
negativas.
Os seguintes exames podem ser utilizados:
Exame direto pelo mtodo de Gram: esfregaos de amostras genitais femininas so muito menos
confiveis para fins diagnsticos do que as do sexo masculino. A sensibilidade do mtodo de Gram
neste caso de apenas 50%, quando comparado cultura.
Tcnicas moleculares como pesquisa pela metodologia de sondas de DNA ou por tcnicas de
amplificao (PCR).
Pesquisa de beta-lactamase.
bioqumicas
manuais
ou
automatizadas,
Paciente
Exames
Feminino
Endocrvice
Masculino heterossexual
Uretra
Gram
Masculino homossexual
DIP feminino
sangue, endocrvice,
Mod - 49
DIP masculino
a
reto
de articulao b, uretra
moleculares
sangue, uretra
A, B, Ba, C
D, E, F, G, H, I, J, K
L1, L2, L3
Sexo
Sndrome
ambos
mulher
homem
ambos
recm-nascidos
ambos
linfogranuloma venreo
A Chlamydia , do ponto de vista metablico, incapaz de produzir sua prpria energia e, desta
maneira, retira ATP da clula hospedeira, sendo denominada de parasita energtica. A Chlamydia
trachomatis infecta somente o homem e usualmente transmitida por contato pessoal, isto ,
sexualmente ou atravs do canal do parto. No tracoma, a bactria transmitida por contato dos olhos
com os dedos ou com fmites contaminados.
A infeco por clamdia tornou-se altamente prevalente, mas devido sua natureza mais branda, ela
no tem sido reconhecida e, muitas vezes, permanece sem tratamento. Os estudos epidemiolgicos
de infeco por clamdia tm documentado uma prevalncia substancial do microrganismo em adultos
jovens e ativos sexualmente. Estes estudos relatam taxas de prevalncia na faixa de 5% a 20% entre
mulheres que freqentam clnicas de planejamento familiar; freqncias mais altas de 20-40% foram
notadas entre mulheres e jovens adolescentes sexualmente ativas que freqentavam clinicas de DST e
em cerca de 25% de todas as mulheres atendidas em clnicas ginecolgicas.
Aproximadamente 8% de todas as mulheres jovens atendidas em maternidades, sem sintomas de
infeco urogenital, so portadoras de C. trachomatis. Da mesma maneira, pelo menos 3% dos
homens atendidos em clnicas de DST, sem sintomas genito-urinrios, so portadores de C.
trachomatis. Aproximadamente 50% das uretrites no gonoccicas (UNG) so causadas por esse
agente.
As infeces por clamdia coexistem freqentemente com a gonorria. Nos Estados Unidos e regies
da Europa, 35-50% das mulheres com gonorria apresentam infeco simultnea por clamdia; alm
disto, os estudos mostram tambm que 20-25% dos homens heterossexuais com gonorria esto
infectados tambm por C. trachomatis.
A uretrite a manifestao mais comum da infeco por clamdia, no homem. Ela duas vezes mais
freqente que a gonorria em algumas populaes e sua incidncia tem aumentado. C. trachomatis
virtualmente responsvel por todas as complicaes da uretrite no gonoccica.
Na mulher as infeces causadas por Chlamydia trachomatis incluem cervicite mucopurulenta,
sndrome uretral, endometrite e salpingite. As infeces do trato genital superior causam esterilidade
ou predispem gravidez ectpica. As complicaes na mulher so as mais graves de todas que
ocorrem com doenas por clamdias. Alm disso, na mulher, o risco duplo, para ela e para seu
recm-nascido.
Mod - 50
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Tanto Chlamydia como gonococo, graas s recentes utilizaes dos testes moleculares, apresentam
atualmente uma alta possibilidade de diagnstico. Anteriormente, o teste mais confivel capaz de
identificar Chlamydia era o isolamento em cultura de clulas, que tem sensibilidade no mximo de 8090%. Embora as culturas sirvam como padro ouro, elas so tecnicamente complicadas e
demoradas.
O transporte de amostras laboratoriais para cultura requer meios especiais e temperaturas especficas
de estocagem. Por outro lado, as amostras para testes moleculares podem ser coletadas em gua ou
salina estreis e transportadas temperatura ambiente ou congeladas. Os testes moleculares para
diagnstico de C. trachomatis produzem resultados rpidos, confiveis e custo com tendncia a cair,
atualmente j se encontrando prximo ao da cultura. A amostra adequada deve ser coletada da forma
tradicional com swab ou escova endocervical. O exame pode ser realizado partir de urina de
primeiro jato o que pode reduzir sua sensibilidade no diagnstico da cervicite, endometrite e
salpingite.
Os testes moleculares so mais complexos e mais caros que do que outros anteriormente utilizados,
mas produzem resultados rpidos (horas ao invs de dias) e, pela primeira vez, espcimes podem ser
coletados sem a introduo de swabs ou escovas no canal endocervical ou na uretra, pois sua
sensibilidade permite tambm encontrar traos do microrganismo em amostras de urina.
Os exames para o diagnstico de Chlamydia incluem:
Exame direto, de raspado de mucosa cervical, pelo mtodo da Imunofluorescncia Direta ou por
tcnica Imunoenzimtica.
Pesquisa por metodologia molecular: Hibridizao ou captura hbrida; PCR com deteco por
hibridizao; Testes sorolgicos. RFC, IF-IgG, IF-IgM.
Positiva:
material
de
raspado
de
mucosas
Sorologia
Tc. Moleculares
Giemsa
IFD
EIA
RFC
IF-IgG
IF-IgM
PCR
Sondas
DNA
No
recomendada
Positiva
Positiva
Negativa
ou
positiva
ttulo
baixo 1
Positiva
soros
pareados
Eventualmente
positiva 2
Positiva
Positiva
- consideram-se ttulos baixos at 1:16 e ttulos altos de 1:32 ou mais. Maior valor diagnstico que ttulos altos
a elevao de 4x o ttulo entre amostras de soro no incio da doena e 2 semanas aps.
2
- positiva nas primeiras semanas da infeco.
IFD: imunofluorescncia direta
EIA: mtodo imuno-enzimtico
RFC: reao de fixao do complemento
1
Mod - 51
O M. hominis est fortemente associado infeco das trompas ovarianas e a abscessos tuboovarianos. Ele pode ser isolado atravs de hemoculturas em cerca de 10% das mulheres com febre
puerperal e no lquido sinovial de pacientes com artrite.
O U. urealyticum comum no trato genital feminino, porm a sua associao com doena discutvel.
Ele tem sido associado ocorrncia de doenas pulmonares em prematuros com baixo peso que
contraram o microrganismo durante o nascimento. Existe evidncia de associao entre o Ureaplasma
urealyticum e infertilidade.
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Os micoplasmas so bactrias desprovidas de parede celular, so pleomrficas e somente crescem em
meios hipertnicos, contendo 20% de soro de cavalo e extrato de levedura. O mtodo de Gram no
tem valor na pesquisa desta bactria.
Como fazem parte da microbiota genital normal, as culturas para seu isolamento necessitam ser
quantitativas. Ttulos iguais ou superiores a 10 3 UTC (unidades trocadoras de cor) so considerados
clinicamente significativos. Em alguns casos pode ser necessria a realizao do antibiograma que
feito em meio slido ou lquido, utilizando-se pelo menos duas concentraes de cada antibitico. Os
antibiticos freqentemente utilizados incluem: tetraciclina, eritromicina, roxitromicina, ofloxacina e
tianfenicol.
Testes sorolgicos no so utilizados na rotina, para infeces genitais por micoplasmas. Os principais
testes utilizados no diagnstico de infeces genitais por micoplasmas incluem:
Cultura quantitativa de materiais, tais como: secreo vaginal, uretral, cervical, urina de 1. jato,
esperma e lquido prosttico em meios U-9, M-42 e A-7. Ttulos iguais ou maiores que 10 3 UTC
(unidades trocadoras de cor) so clinicamente significativos.
Amnionite
Bartolinite
Endometrite/salpingite
Epididimite/orquite
Prostatite
lceras genitais
Uretrites e cervicites
Mod - 52
Faringite *
Laringite
e
Epiglotite
A laringite aguda, na grande maioria das vezes, de etiologia viral. Culturas para pesquisa de
agentes bacterianos so indicadas apenas na suspeita de difteria. A epiglotite, tambm chamada
de crupe, geralmente tem etiologia bacteriana (Haemophilus influenzae tipo B). Mas a coleta
com swab diretamente da epiglote contra-indicada por duas razes: em primeiro lugar, a
manipulao ou irritao da epiglote edemaciada pode provocar quadro de obstruo; em
segundo lugar, o isolamento de H. influenzae b pode no ocorrer.
O diagnstico fundamentalmente clnico, porm hemoculturas (> 50% dos casos so
bactermicos) podem confirmar a etiologia. O meio de cultura deve ser enriquecido com fatores
X e V ou adicionado de sangue de cavalo aquecido, sendo importante realizar teste de
suscetibilidade com pesquisa de beta lactamases.
Sinusites
Os seios paranasais comunicam-se com a cavidade nasal, sendo ento susceptveis a infeces
por microrganismos habitantes do trato respiratrio superior. A sinusite aguda freqentemente
secundria infeco viral de vias areas superiores. Outros fatores predisponentes so: alergia,
desvio do septo nasal, plipos, e em pacientes hospitalizados, entubao orotraqueal prolongada.
A infeco de seios paranasais pode se propagar a tecidos adjacentes, como clulas etmoidais
(levando a celulite periorbital), abscessos cerebrais e meningites.
Os microrganismos mais comumente identificados so Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae no b, anaerbios estritos, Streptococcus spp., e Branhamella catarrhalis. Em
sinusites de origem intra-hospitalar, os agentes mais freqentes so: Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa, e fungos como Candida spp.
Mod - 53
Otites
Nasofaringe
e
Mucosa
Nasal
Candidase
oral
Otite Mdia: infeco do ouvido mdio, geralmente acomete crianas entre 3 meses e 3 anos de
idade. O diagnstico etiolgico s pode ser feito atravs de cultura do fluido do ouvido mdio,
mas como a obteno deste material implica em realizao de timpanocentese, no realizado a
no ser que haja indicao clnica de drenagem. Os agentes mais comumente isolados so
Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae e Streptococcus pyogenes.
Otite Externa: infeco do canal auditivo externo, geralmente causada por Pseudomonas
aeruginosa, Proteus spp. e Staphylococcus aureus.
Nasofaringe: o material coletado para diagnstico da infeco deve ser aspirado atravs do nariz;
utilizado para o diagnstico de coqueluche, Mycoplasma e alguns casos de difteria. Para deteco
de meningococo a amostra deve ser coletada com swab ou por aspirao e semeada
imediatamente em meios adequados. Deve ser lembrado que para deteco de portadores de
meningococo, deve ser coletado material com zaragatoa de arame, e semeado imediatamente
em meios adequados.
Nariz: 20 a 25% dos indivduos sadios so portadores de Staphylococcus aureus no nariz, e no
ambiente hospitalar esta taxa pode aumentar. Alguns autores associam a colonizao nasal por
este microrganismo com o aumento do risco de infeco hospitalar em pacientes submetidos a
cirurgias (cardaca, por exemplo) e a programas de dilise peritoneal contnua (CADP). Nestes
casos de risco, colher material das narinas para pesquisa de Staphylococcus aureus, com teste
de susceptibilidade mupirocina (antibitico de uso tpico utilizado para erradicao do
microrganismo da mucosa nasal).
Comum em neonatos e pacientes imunocomprometidos, principalmente aps utilizao de
antibiticos de largo espectro. O diagnstico direto, feito atravs de esfregao em lmina do
exudato corado pelo Gram ou KOH, onde so visualizadas leveduras.
Os meios de cultura mais utilizados para semeadura, de materiais obtidos das vias areas superiores
so o gar Chocolate (com sangue de cavalo) e gar Sangue incubados em atmosfera de 5% de CO 2,
e gar Mac Conkey. Na rotina no se recomenda fazer enriquecimento, nem fazer uso de meios
seletivos. Na suspeita de infeces por anaerbios usar meios e condices apropriadas para o cultivo
destas bactrias.
Para cultura do bacilo diftrico recomendvel encaminhar a Laboratrio de Sade Pblica. O meio
seletivo o meio de gar Sangue cistina-telurito. O bacilo tambm cresce em gar Sangue, sendo
opcional fazer enriquecimento em gar Loeffler azul de metileno.
* Principais agentes etiolgicos de faringites
Estimativa de
casos (%)
Agente
Manifestao clnica
Rhinovirus
Resfriado
20
Coronavrus
Resfriado
Adenovirus
Outros vrus
Influenza vrus
gripe
Parainfluenza vrus
resfriado
Streptococcus pyogenes
Faringite e amigdalite
C. diphtheriae
Difteria
raramente
Neisseriae gonorrhoeae
Faringite
raramente
Arcanobacterium haemolyticum
Faringite
raramente
Mycoplasma pneumoniae
Faringite, pneumonia
raramente
Mod - 54
15-30
5
10.
PNEUMONIA DA COMUNIDADE
Apesar dos progressos diagnstico-teraputicos, as pneumonias ainda representam a causa mais
importante de morte atribuda doena infecciosa nos pases desenvolvidos, em parte pela dificuldade
de se estabelecer o agente etiolgico e dirigir a teraputica especfica, pela grande diversidade de
agentes possveis. Cerca de 30 a 60% das pneumonias adquiridas na comunidade no revelam
nenhum agente entre os mais freqentemente pesquisados e isoladas, ficando apenas com
diagnstico clnico ou de imagem.
Agentes mais isolados em pneumonias da comunidade
Agente
Prevalncia (%)
Streptococcus pneumoniae
20-60
Principais
sintomas
Respiratrios:
tosse
expectorao
dispnia
dor torxica
Haemophilus influenzae
3-10
Staphylococcus aureus
3-5
6-10
Gerais:
1-3
3-10
Chlamydia pneumoniae
5-17
Legionella pneumophila
2-8
Vrus respiratrios
febre
mal-estar
mialgia
sudorese
fadiga
cefalia
nuseas
etc
Fatores predisponentes
2-15
Agente Etiolgico
Fator
Agente Etiolgico
Alcoolismo
Streptococcus pneumoniae,
Anaerbios, Enterobactrias
Exposio a animais
da rea rural ou gata
recm-parida
Doena obstrutiva
pulmonar crnica e
fumante
Streptococcus pneumoniae,
Haemophilus influenzae,
Moraxella catarrhalis,
Legionella spp.
Streptococcus pneumoniae,
Haemophilus influenzae,
Mycobacterium tuberculosis
Asilos e outras
comunidades de
assistncia
Streptococcus pneumoniae,
Enterobactrias, Haemophilus
influenzae, S. aureus,
Anaerbios, Chlamydia
pneumoniae
Viagem ao sudeste
norte-americano
Coccidioides immitis
Mod - 55
M higiene
dentria
Anaerbios
Surtos de gripe
Influenzavirus, Streptococcus
pneumoniae, Staphylococcus
aureus, Streptococcus pyogenes
(A), Haemophilus influenzae
Exposio a
pombos ou fezes
Histoplasma capsulatum
(Histoplamose)
Pnemonia de
aspirao
Exposio a
pssaros
Doena pulmonar
crnica, fibrose
cstica ou
bronquiectasia
Pseudomonas aeruginosa,
Burkholderia cepacia,
Staphylococcus aureus
Exposio a
coelhos
Francisella tularensis
(Tularemia)
Usurio de drogas
S. aureus, Anaerbios,
Mycobacterium tuberculosis
Do nascimento at 20 dias
3 semanas a 3 meses
4 meses a 4 anos
5 a 15 anos
Exposio
Pasteurella multocida
Hantavirus
PNEUMONIA HOSPITALAR
Considerando-se as diferentes topografias associadas s infeces hospitalares, as localizadas no trato
respiratrio inferior, tm grande importncia pela freqncia em que ocorrem e pela morbidade
associada. Estas infeces so classificadas basicamente em quadros de traqueobronquite e
pneumonia.
A pneumonia de origem hospitalar definida como aquela que aparece aps um perodo maior ou
igual a 48 horas de admisso e no est incubada no momento da hospitalizao. Segundo dados da
literatura, ocorre entre 6 a 10 casos a cada 1000 admisses hospitalares.
Mod - 56
Entre as pneumonias, aquelas associadas com ventilao mecnica atravs de entubao orotraqueal
ou traqueostomia, so as mais freqentes. So definidas para pacientes sob ventilao mecnica em
um perodo igual ou superior a 48 horas. Nesta situao a incidncia de infeco de 7 a 21 vezes
maior que ocorre em pacientes que no necessitam de respirador.
Dentre as infeces hospitalares, a infeco pulmonar a que leva a morte com maior freqncia,
com um risco maior na Unidade de Terapia Intensiva. A prevalncia de pneumonias varia entre 10 e
65%, com 13 a 55% de casos fatais. Neste mesmo tipo de Unidade, dados do National Nosocomial
Infections Surveillance (NNIS) mostram a taxa de infeco respiratria associada ventilao
mecnica por 1000 procedimentos-dia, variando de 5 casos em UTI peditrica a 13 casos em UTI
cirrgica.
De uma maneira geral os microrganismos podem alcanar o trato respiratrio pela aspirao de
secrees da orofaringe, pela inalao de aerossis contendo bactrias, pela translocao de
microrganismos do trato gastrointestinal ou pela disseminao hematognica de um foco a distncia.
Ainda, para que a infeco respiratria ocorra necessrio existir a perda das defesas do hospedeiro,
um inculo suficiente para alcanar o trato respiratrio ou a presena de um microrganismo altamente
virulento.
Os agentes mais freqentemente isolados so:
Outros agentes, tais como Legionella pneumophila e Vrus Respiratrio Sincicial (VRS) aparecem
em casos de surto e em pacientes imunodeprimidos, assim como Aspergillus spp. e Pneumocystis
carinii.
Patgenos isolados em 4.389 pneumonias em UTI nos Estados Unidos de 199297 NNIS
Patgenos
Pseudomonas aeruginosa
21
Staphylococcus aureus
20
Enterobacter spp.
Klebsiella pneumoniae
Acinetobacter spp.
Candida albicans
Escherichia coli
Enterococcus spp.
Outras enterobactrias
Outros fungos
2,8
Vrios critrios utilizados para definio de pneumonia hospitalar foram propostos. Em geral, incluem
a presena de um novo ou progressivo infiltrado pulmonar, febre, leucocitose e secreo traqueobrnquica purulenta.
Muitos destes achados so inespecficos j que febre pode ser causada por diversos fatores como:
reao a drogas, infeco em outro foco, transfuso sangunea e resposta inflamatria extrapulmonar.
Mod - 57
O mesmo ocorre com a congesto, presente em embolia pulmonar, atelectasia, insuficincia cardaca,
hemorragia pulmonar, trauma pulmonar, tumor, aspirao qumica e reao drogas.
Exame fsico
Exame do escarro
Aspirado transtraqueal
Broncoscopia com fibra ptica e lavado bronco-oalveolar
Aspirado endotraqueal cego
Bipsia pulmonar
Hemocultura (1 a 16% de positividade)
Exames imunolgicos (imunofluorescncia, ELISA, etc.)
Puno de derrame pleural para realizao de exames bioqumicos, citolgicos e microbiolgicos.
Raio X simples (AP + perfil)
Tomografia computadorizada
Amostras inaceitveis
Escarro
ESCARRO
Apesar de poder ser til em pacientes com tosse produtiva e com capacidade de expectorar e a
presena de escarro purulento encontrar-se na maioria dos critrios utilizados para o diagnstico de
pneumonias, a anlise desta secreo bastante controvertida do ponto de vista de sensibilidade e
especificidade.
Aspectos da anlise macroscpica do escarro que podem ser teis para sugesto de agentes ou
patologias: Cor, quantidade, consistncia e cheiro.
Escarro purulento pneumonia bacteriana (embora nas pneumonias por vrus ou micoplasma a
infeco secundria pode oferecer os mesmos achados em cerca de 30 a 50% dos casos)
Expectorao matinal, abundante e ftida - bronquiectasia
Expectorao escassa ou aquosa (mucide) - pneumonias atpicas
Escarro avermelhado, mucide - Klebsiella pneumonia
Escarro ftido associado a pneumonia aspirativa - anaerbios
Bacterioscopia
A bacterioscopia do escarro pela colorao de Gram um recurso simples, rpido e barato, podendo
ser muito til para orientao teraputica quando so atendidos os seguintes itens:
Os analistas so experientes;
Mod - 58
26,5% de amostras de escarro purulento eram de pacientes mostrando nenhum sinal clnico ou
radiolgico de pneumonia.
pneumonia
no
eram
Clulas
epiteliais
Leuccitos
Neutrfilos
Score
Clulas
Epiteliais
Score
Grupo 1
25
10
< 10
10-25
-1
Grupo 2
25
10-25
10-25
+1
> 25
-2
Grupo 3
25
25
> 25
+2
Grupo 4
10-25
25
Muco
+1
Grupo 5
<10
25
Pneumocistis carinii - para diagnstico de pneumonia por Pneumocistis carinii em pacientes com
HIV ou imunossuprimidos, o escarro pode ser til em mais de 50% dos casos, pelo uso da
colorao de Giemsa ou Gomori methenamina prata ou azul de toluidina ou ainda de
Mod - 59
ASPIRADO
DE SECREO TRAQUEAL
Apesar de aspirados de secreo traqueal serem rapidamente obtidos em pacientes entubados, esta
uma amostra bastante questionvel, devido a sua baixa especificidade. Isto se deve ao fato de que a
colonizao endotraqueal ocorre rapidamente aps a entubao e ventilao mecnica.
A utilizao de tcnicas quantitativas de aspirados endotraqueais feito s cegas, com o objetivo de
diferenciar colonizao de infeco com valores de corte de > 10 5 UFC/ml, proposto por alguns
autores (Jourdain & cols, 1995).
A sensibilidade preditiva de pneumonia associada a ventilao foi comparvel com o BAL e com a
tcnica do escovado protegido, embora menos especfico. Alguns trabalhos mostram at 82% de
sensibilidade e 83% de especificidade para o aspirado endotraqueal, mas no h unanimidade.
Independentemente da metodologia empregada, tende a mostrar resultados mais favorveis
associados ao valor preditivo negativo e sua melhor indicao quando no se pode fazer a
broncoscopia. A mortalidade da pneumonia associada ventilao mecnica no mostrou diferena
quando a teraputica se baseou em tcnicas broncoscpicas ou no.
ASPIRADO
TRANSTRAQUEAL
Trata-se de uma tcnica bastante utilizada na dcada de 70, mas que atualmente devido aos riscos
que leva para o paciente (enfisema subcutneo, estmulo vaso-vagal, hemoptise), est preterido em
funo do aparecimento de procedimentos mais promissores. Outro fato relevante o elevado nmero
de resultados falso-positivos, pelo isolamento de flora colonizadora do trato respiratrio superior.
LAVADO
BRNQUICO NO DIRIGIDO
Mtodo simples, de baixo custo e seguro recomendado para rotina de vigilncia bacteriolgica em
pacientes ventilados mecanicamente.
No estudo que levou estas a concluses, observou-se que durante dias anteriores ao paciente
apresentar um quadro de pneumonia, havia aumento significativo de um nmero inferior ou igual a
103 UFC/ml para maiores ou iguais a 10 5 UFC/ml; ainda revelou queda do nmero de colnias em
pacientes que responderam a antibioticoterapia, em contraste com aqueles que mostraram uma
Mod - 60
LAVADO
ESCOVADO
PROTEGIDO
BAL
OU LAVADO BRONCO-ALVEOLAR
BIPSIAS
Podem ser feitas de formas variadas: percutnea, atravs de broncoscopia, por meio do fibroscpio,
pela toracoscopia e a cu aberto. Indicado nos casos de imunocomprometidos e crianas com m
evoluo teraputica emprica.
Puno bipsia pulmonar - trata-se de um procedimento, que quando resulta em cultura positiva,
bastante fidedigno, j que os problemas com contaminao com a flora do trato respiratrio superior
inexistem. Os relatos da literatura revelam que em situaes variadas, o diagnstico etiolgico das
infeces, com esta tcnica, ocorreu entre 30% a 82% dos casos estudados e falso-negativos de cerca
de 18%. Complicaes mais importantes so pneumotrax e sangramento em casusticas que variam
de 5 a 39%.
Bipsia transbrnquica - os resultados diagnsticos so semelhantes puno pulmonar aspirativa,
mas revelaram menor ndices de complicaes.
Bipsia pulmonar - a bipsia a cu aberto, mtodo definitivo para o diagnstico das pneumonias,
um procedimento pouco realizado. Est indicada em casos sem melhora clnica, em que no foi
possvel isolar o microrganismo por outras tcnicas ou que h necessidade de diagnstico especfico
com maior rapidez. Convm salientar que de nada adianta obter boas amostras para estudo
microbiolgico quando se emprega tcnica laboratorial convencional, isto , morosa e de baixa
sensibilidade.
TORACOSCOPIA
A toracoscopia tem sido pouco utilizada, embora resultados sejam muito favorveis, com achados
diagnsticos superiores a 90% e baixa taxa de complicaes.
DERRAME
PLEURAL
dever ser reservado para estudo citolgico e bioqumico para afastar outras causas de derrame com
infiltrados pulmonares:
- Infarto pulmonar
- Insuficincia cardaca
- Tumor
- Doenas do colgeno, etc.
HEMOCULTURA
Atravs da hemocultura tambm pode se isolar o microrganismo de um processo respiratrio
considerando-se que isto ocorre entre 1 a 16 % dos casos, no entanto no deve ser utilizada de forma
isolada para o diagnstico de pneumonia. altamente especfico e indicada em pacientes com
pneumonia que necessita de hospitalizao.
CONTAGENS
BACTERIANAS SIGNIFICATIVAS
O clculo dos valores limtrofes para definio de infeco para amostras do trato respiratrio, deriva
da concentrao de microrganismos encontrada em culturas do tecido pulmonar infectado.
Comparando-se o nmero de bactrias na amostra, estima-se o nmero na secreo original. As
infeces pulmonares clinicamente significativas contm pelo menos 10 4 UFC/g de tecido.
Significado das contagens bacterianas em relao amostra clnica
Material
Escarro, aspirado, endotraqueal,
aspirado por broncoscopia
Escovado brnquico protegido
Lavado broncoalveolar (BAL)
Volume obtido
Fator de diluio
Valor significativo
1 ml
105106 UFC/ml
1 a 10 l diludos em 1ml
1/100 1/1000
103 UFC/ml
1/10 1/100
104 UFC/ml
Fungos: Aspergillus spp., Fusarium spp., Candida spp., P. carinii, Cryptococcus neoformans
gar sangue
gar chocolate
gar sangue suplementado para anaerbios, para amostras clnicas para as quais recomenda-se
fazer o isolamento de anaerbios.
Quando indicada cultura para Legionella spp., fungos, micobactrias, Chlamydia e vrus,
acrescentam-se os meios necessrios a estas rotinas especficas. A pesquisa por
imunofluorescncia com anticorpos monoclonais, e os mtodos moleculares so mais
recomendados para a deteco desses microrganismos.
Mod - 62
Interpretao em UFC/ml
< 10
< 103
10 a 100
103 a 104
100 a 1000
104 a 105
Observao: Para o Lavado broncoalveolar considerar a diluio pelo volume injetado e multiplicar
por 100. P.ex., se a leitura for 50 colonias, multiplicar por 100 (volume da ala) e multiplicar por 100
(diluio da coleta). Resultado final = 5x10x 10 2x10 2 = 5 x 105 UFC/ml
-
1/1000: usar a soluo anterior e semear 1 L com ala calibrada na placa de gar Mac
Conkey.
Para expresso do resultado em ml o nmero de colnias obtido dever ser corrigido pelo fator da
diluio e correlacionado com a quantidade de amostra semeada.
-
prepara-se uma diluio de 1:20 (0,5 ml de fluido em 9,5mL de soluo salina estril). Deste caldo
semeia-se 50 l em cada um dos meios selecionados.
N de colnias na placa
aps incubao
overnight
Interpretao em UFC/ml
2-24
103
25-249
104
250
105
Mod - 63
11.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Acourt, C.H.D., Garrard, C.S., Crook, D., Bowler, I. and Conlon, C. Microbiology lung
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