BASES MOLECULARES DO CANCER 1.Introduo O cncer uma doena que envolve mudanas dinmicas no genoma da clula.

. Este termo usado para doen-as onde clulas anormais se dividem sem controle e so capazes de invadir outros tecidos. As idias contempor-neas sobre carcinognese mostram uma srie de mudanas genticas e epigenticas, estocs-ticas que confe-rem uma vantagem seletiva de crescimento sobre as clulas normais. Nos ltimos 25 anos houve um grande avano no entendimento das bases moleculares da carcinognese e da progresso tumoral. O aprofundamento do entendimento da pato-biologia e gentica do cncer tem fornecido ferramen-tas importantes para o diagnstico molecular e monitoramento da doena e j proporcionou a identifica-o de diversos alvos teraputicos. Um dos grandes desafios atuais o desenvolvi-mento de drogas alvo-especfi-cas capa-zes de eliminar a clula tumoral sem causar danos s clulas normais ou que possam ser usadas em as-socia-o a terapias convencionais para aperfeio-las. Com a evoluo dos conhecimentos, dos mtodos diagnsticos e prognsticos e o surgimento de novas tera-pias para o tratamento do cncer em humanos, dessa forma, importante o entendimento da patologia, diag-nstico e tratamento do cncer pelos clnicos, mas tambm se percebe a necessidade de pesquisas para aprofun-dar o conheci-mento das bases moleculares e bioqumicas dos tipos de cncer mais comuns, para aperfeioar os mtodos de diagnstico, prognstico e tratamento. Diversos estudos tm sido realizados nos EUA em busca de uma maior integrao entre a medicina hu-mana e a animal. A oncologia comparativa uma rea que integra o cncer de ocorrncia natural em paci-entes veterin-rios a estudos mais gerais de biologia e terapia para o cncer. As informaes geradas nesse tipo de estudo so capa-zes, entre outras coisas, de facilitar a execuo de testes clnicos de novos medicamentos para terapia anticncer que podero ser utilizados tanto em humanos quanto em animais. 2. Genes e cncer: A seqncia de eventos que leva a formao de um tumor tem por base as mutaes genticas, epigenticas e mudanas no perfil de expresso gnica. Esse conceito foi fundamentado na descoberta de mutaes que le-vam a oncogenes com dominante ganho de funo e genes supressores de tumor com recessiva perda de funo. As duas classes de genes foram identificadas atravs de suas alteraes em clulas huma-nas e animais e sua participa-o nos fentipos de cncer em modelos experimentais. As alteraes genticas ou de expresso gnica que ocorrem nas clulas que originam um tumor levam a uma desorganizao na comu-nicao intra e intercelular que afeta processos como a proliferao, a diferencia-o e a apoptose. Essa desrregulao progressiva das funes da clula mostra que o fentipo ma-ligno atingido gradualmente. Em 2000, Douglas Hanahan e Robert A. Weinberg publicaram a reviso The Hallmarks of Cncer onde eles sugeriram que os tumores de uma forma geral, apresentam seis alteraes essenciais na fisiologia da clula que, jun-tas, ditam o crescimento tumoral maligno. So estas: auto-suficincia aos fatores de crescimento, in-sensibilidade aos sinais que inibem o crescimento celular, evaso da morte celular programada (apop-tose), potencial replicativo ilimi-tado, angiognese sustentada e invaso tecidual e metstase. Tal simplifica-o se baseia, nos ensinamentos so-bre biologia celular de que virtualmente, todas as clulas de mamferos

carre-gam um maquinrio molecular similar que regula a sua proliferao, diferencia-o e morte. Em artigos mais recentes, a inflamao surge como 7 alterao para a formao do cncer e o papel do es-troma na iniciao, crescimento e progresso tumoral tambm se mostra importante. 3. Tipos de cncer: Herdado e Espordico As alteraes genticas de uma clula que formam a base para a sua malignidade podem ser herdadas (germinati-vas) ou adquiridas (somticas). Mutaes germinativas esto presentes em todas as clulas do indivduo; Mutaes somticas se localizam em um determinado nmero de clulas em um tecido especfico; Cada indivduo possui duas cpias de cada gene que podem determinar uma caracterstica fsica benigna ou um poten-cial para doena, isto depende da alterao existente em pelo menos uma das c-pias e do local onde ocorreu a alterao no gene. Em humanos h alguns tipos de cncer que se concentram claramente em agregados familiares onde a he-rana gentica claramente definida, como por exemplo, o cncer de mama e o colo retal. Nesses casos um estudo gentico torna-se necessrio para definir o mecanismo de carcinognese, de forma a aperfeioar a abordagem terapu-tica e o aconselhamento gentico familiar. Considerando que o processo de formao de raas de ces e gatos ba-seou-se no cruzamento consangneo durante muitas geraes, possvel observar que h predisposies genti-cas hereditrias ao cncer em algumas raas isso facilita pesquisas relacionadas ao cn-cer familiar. Entretanto, en-tre os ces de diferentes raas e mestios possvel verificar uma grande variabili-dade gentica, que similar a diversi-dade observada em humanos e possibilita estudos comparativos. A maioria dos tipos de cncer em humanos no apresenta padres hereditrios definidos, apenas 5% se desen-volve por uma predisposio gentica herdada. As clulas de tais indiv-duos possuem uma mutao germina-tiva pr-existente que requer poucos eventos subseqentes para a induo da carcinognese. Exemplos bem conheci-dos de genes envolvidos em cncer hereditrio so BRCA1 e BRCA2 no cncer de mama e ovrio. 4. Carcinognese: O estudo dos mecanismos de regulao do crescimento e diferenciao celular a melhor forma de entender-mos as bases fundamentais da tumorignese. As clulas normais de um organismo obedecem a um con-trole restrito da sua proliferao e diferenciao para que o organismo multicelular mantenha a sua homeostasia. Esse controle exercido por uma rede de mecanismos moleculares que coordenam a prolife-rao celular e a morte celular programada (apoptose). Qualquer fator que altere esse balano entre prolifera-o e morte celular tem o poten-cial, se no corrigido, de alterar o nmero total de clulas em um rgo ou tecido especfico. Aps muitas gera-es esse aumento no nmero de clulas pode ser detectado clinicamente como uma neoplasia. Essa proliferao descon-trolada reflete um descontrole no ciclo celular e viabiliza a ocorrncia de novas mutaes. A carcinognese um processo que ocorre em vrias etapas com a aquisio de mutaes seqenciais no genoma. As mudanas no genoma de uma clula em particular que levam carcinognese podem ser de di-versos ti-pos, entre eles:

Mutaes pontuais que levam a substituies de aminoci-dos; Mutaes tipo frame-shift ou em stop cdons que podem levar a protena truncada ou desorgani-zar a sua seqncia, respectivamente; Descontrole ou instabilidade cromossmica resultando em amplificao, super-expresso ou expresso ina-propri-ada de um gene em particular; Perda de um gene ou sua fuso com outro gene como resultado de uma quebra cromossmica e rearranjo resul-tando em uma protena quimrica com funo alterada; Modificaes epigenticas do DNA, onde a mais importante a metilao da citosina nas ilhas CpG le-vando ao silenciamento gnico. So essas mutaes que ativam oncoge-nes, inativam genes supressores tumorais ou genes de regulao e controle do ciclo celular como os caretakers e gatekeepers. As mutaes que conferem clula uma vantagem em relao s demais so selecionadas pelas clulas que evoluem para a tumorignese. importante para os clni-cos o entendimento dos eventos moleculares que causam as mutaes, uma vez que so base de todo o processo de carcinognese e sua inibio pode ser uma medida preventiva efetiva. As clulas apresentam mecanismos eficientes para garantir a integridade do seu DNA, como a existncia de DNA polimerases de alta fidelidade e outros mecanismos de reparo. Naturalmente, durante a replicao celu-lar, ocorre uma taxa basal de erros intrnsecos na sntese e reparo do DNA que resultam em mutaes adquiri-das que so passadas para as clulas filhas durante a replicao. A taxa de erro direto durante a replica-o normal do DNA da ordem de 1,3 x 10-10 mutaes/pares de base/clula em diviso no genoma humano de aproximadamente 2 x 109 pares de bases. Isso representa uma taxa muito baixa de mutaes somticas e muta-o de um gene chave para o cncer. Entretanto, h outros mecanismos que contribuem para a ocorrncia de mutaes genticas, como o dano qumico ao DNA. Se esse dano ocorrer em genes que tm por funo assegu-rar o reparo do DNA ou a fideli-dade da sua replicao a probabilidade da clula adquirir um fentipo tumoral ainda maior. Um exemplo disso que o DNA pode sofrer a ao qumica dos produtos do metabolismo oxidativo, que provavelmente o evento potencial-mente mutagnico mais frequente. A taxa basal de mutaes somticas aumentada por fatores ambientais que interagem com o DNA celular direta-mente ou indiretamente. Dentre os fatores ambientais, inclui-se a exposi-o a agentes como a radiao e carcinge-nos qumicos, mas tambm efeitos genotxicos de agentes endge-nos como os radicais livres. Estima-se que aproximadamente 70% dos tipos de cncer que acometem as populaes oci-dentais podem ter suas causas na dieta (deficincia em frutas e verduras que exercem um papel protetor) e estilo de vida, com a exposio ao tabaco contri-buindo com 30%. A associao do cncer com o aumento da idade sugere que a exposio contnua a baixos nveis de carcinge-nos ambientais ou endgenos podem ter um efeito cumulativo e agir em tecidos mais suscep-tveis a altera-es neoplsicas. Recentemente, especula-se que estas mutaes ocorrem nas clulas-tronco, que possuem uma alta taxa de proliferao, aumentando a probabilidade de surgir um novo clone de clulas. Este processo pode levar a

uma vanta-gem adaptativa sobre as demais clulas e aquisio de outras mutaes e caractersticas celulares tpicas de um fen-tipo maligno. 5. Oncogenes: Proto-oncogenes so genes responsveis pela diviso celular normal das clulas. Os produtos des-ses genes parti-cipam das complexas vias de sinalizao que regulam a proliferao celular, como: Fatores de cresci-mento extracelulares Receptores transmembrana de fatores de crescimento Componentes de vias de sinaliza-o intracelular Amplificadores e fatores de transcrio nucleares Genes que regulam o ciclo de diviso celular ou a morte celular progra-mada (apoptose) Quando mutados, estes so chamados de oncogenes. Os primei-ros oncogenes foram caracterizados atravs dos estudos com retrovrus, os quais, durante o curso da infec-o, inserem seu DNA no genoma das clulas hospedei-ras e essas o duplicam juntamente com o seu prprio DNA. O primeiro proto-oncogene caracterizado foi o c-src e sua identificao teve incio com o trabalho de Rous em 1911, que estudava cncer em galinhas (sarcoma) e acreditava que a doena era causada por partculas infeccio-sas (vrus do sarcoma de Rous). Em 1970 foi descoberto o gene que promovia a transformao das clulas nor-mais infecta-das em clulas tumorais, o src. Como posteriormente foi descoberto que este gene possui um ho-mlogo em clu-las normais (c-src) o gene das clulas tumorais foi chamado de v-src (oncogene). Acreditase que ao longo da sua trajetria evolutiva o vrus adquiriu um gene normal de clulas infectadas que aps mu-tado adquiriu caractersti-cas ontognicas. Os proto-oncogenes agem de forma dominante na clula, ou seja, apenas um alelo do gene precisa ser trans-crito e estar ativo para que este desempenhe sua funo de estimular a diviso celular. At o momento, um grande n-mero de proto-oncogenes j foram identificados. A ativao dos oncogenes envolve a alterao gentica dos proto-oncogenes e, como conseqncia, confere uma vantagem no crescimento das clulas. Os mecanismos principais de ativao dos oncogenes so: mutao, amplifica-o gnica e rearranjos cromossmicos e, portanto, podem resultar na alterao da estrutura do proto-onco-gene ou no aumento da sua expresso. Normalmente, vrios mecanismos e vrios genes esto al-terados no cncer, e a expresso de um fentipo neoplsico envolve tambm a perda de funo de genes supres-sores tumorais. H aproximadamente 25 anos, foi identificado o homlogo humano do gene Myc, um oncogene viral (v-myc). Desde ento, muitos estudos tm sido realizados e grande progresso foi feito em relao ao conhecimento sobre a sua regulao e funo na tumorignese. A desrregulao de Myc no depende de gran-des alteraes genticas, isso pode acontecer atravs de qualquer um dos mecanismos que regulam a sua expresso e/ou ativi-dade, direta ou indiretamente. Isso sugere um grande impacto da desrregulao de c-Myc no cncer humano.

6. Genes supressores de tumor: Ao contrrio dos proto-oncogenes, os genes supressores tumorais agem de forma recessiva a nvel celular. Os dois alelos do gene devem estar inativados para permitir o crescimento do tumor. As evidncias dos mecanismos recessi-vos da tumorignese vieram de experimentos onde clulas tumo-rais foram fusionadas com clulas normais. Verifi-cou-se que o hbrido resultante perdeu a sua capacidade tumorignica. Aparentemente, a informao gentica que foi perdida pela clula tumoral pode ser reintroduzida na formao do hbrido pela intro-duo de genes normais. A compro-vao dessa concluso ocorreu quando linhagens de clulas hbridas recupe-raram sua capacidade tumorig-nica ao perder cromossomos especficos. Em 1971, Knudson baseado em estudos epidemiolgi-cos sobre o retinoblas-toma, um tipo raro de cncer no olho, que afeta crianas, postulou o modelo de dois passos necessrios para a ao dos mecanismos genticos recessivos. Nos casos de doena familiar (he-redit-rios), onde a doena se ini-cia mais cedo, o primeiro passo foi herdado como uma mutao gentica da c-lula germinativa, portanto, todas as clulas do indivduo possuem a mutao. O segundo passo, nesses casos, ocorre no incio da vida (provavel-mente no tero). Em crianas com a forma espordica da doena duas mutaes somticas em pelo menos uma c-lula da retina so necessrias para dar incio manifestao do fentipo tumo-ral. Sabe-se agora que cada um desses dois passos correspondem perda de um alelo de um gene supressor de tumor o gene do Retinoblastoma Rb-1. Esse gene foi mapeado na re-gio cromossmica 13q14 e o seu produto normal est presente em todas as clu-las, exceto naquelas do retinoblas-toma. A protena Rb-1 atua como um dos principais mecanismos de controle do ciclo de diviso celular. Uma prote-na Rb-1 com funo alterada ou ausente leva a um descontrole total da proliferao celular. Chama-se de perda de heterozigose (loss of heterozigosity LOH) a perda somtica de um alelo de um gene supressor tumoral. Essa perda de material cromossmico pode variar desde algumas centenas de ba-ses, uma sub-banda ou at todo o cromossomo. A anlise de LOH consiste na compara-o de loci polimrficos de um DNA extra-do de tecido normal e DNA de tecido tumoral do mesmo indivduo. As regies perdidas nos teci-dos tumorais po-dem ser consideradas como possveis portadoras de genes supressores tumorais. Entretanto, existem vrias regi-es cromossmi-cas afetadas por LOH em vrios tumores e para as quais ainda no foi identifi-cado um gene supres-sor tumoral (1p, 3p, 8p, 10q, 11p, 17q, 18q e 22q). Isso pode ser de-vido s exigncias de experimentos com diversas linhagens celulares para caracterizar um gene como supres-sor tumoral, mostrando que a sua ausncia essencial para a formao de um tumor. Um dos mais importantes e mais estudados genes supressores de tumor o TP53. Este gene considerado o guardio do genoma, um gatekeepers e j foi demonstrado que ele est envolvido na maioria dos proces-sos de carcinognese em humanos e em animais (LEVINE e OREN, 2009). Conhecer o seu meca-nismo de ao de fundamen-tal importncia para a compreenso dos aspectos da biologia molecular relaciona-dos ao cncer. Este gene codifica a protena p53 e est localizado no cromossomo 17 em humanos, e mais de 50% dos ti-pos de cncer em humanos apresentam mutaes neste gene ou alteraes em genes que codificam regulado-res cruci-ais de p53. A protena p53 um fator de transcrio de vida curta que aumenta a taxa de transcrio de outros 6 ou 7 genes conhecidos que regulam, pelo menos em parte, as funes dependentes de p53 da clula. Evidn-cias mostram que p53 no afeta a iniciao tumoral ou a taxa de mutao, mas previne a progresso maligna das clulas

tumorais. Em presena de danos permanentes ao DNA p53 atua alterando a expresso gnica da clula favore-cendo eventos biolgicos como a senescncia e a apoptose, bloqueando a prolife-rao ou eliminando a clula tumoral. Estudos recentes mostraram que a seqencia de aminocidos da protena p53 canina tem 80% de homolo-gia com a humana e anormalidades, como a mutao em TP53, foram relatadas em carcinomas de tire-ide, papilo-mas orais, adenomas, linfomas, osteosarcomas, carcinomas mamrios e melanomas caninos . 7. A origem das clulas cancergenas: Clulas- tronco: Em tecidos normais, o processo de crescimento e renovao tecidual ocorre atravs da diferenciao das clulas-tronco em clulas maduras que possuem propriedades bioqumicas e funcionais caractersticas. As clu-las- tronco se originam de clulas precursoras multipotentes que do origem a clulas com restrio gentica e potencial reduzido de diferenciao. As clulas-tronco tm a capacidade de auto-renovao e podem proliferar indefinidamente. O fen-tipo das clulas-tronco influenciado por fatores micro-ambientais que controlam a substituio de clulas senes-centes a par-tir de clulas-tronco indiferenciadas. Clulas-tronco cancergenas tm sido definidas como clulas de um tumor que possuem capacidade de auto-renovao e de formar linhagens heterogneas de clulas cancergenas que compem o tumor. A hiptese das clulas-tronco cancergenas prope que a clula-tronco o alvo da carcinognese e no as clulas somticas adultas. Durante muito tempo acreditou-se que a clula original de um tumor poderia ser qualquer clula madura de um tecido que havia sofrido uma desdiferenciao devido s alteraes fenotpicas e bioqumicas acumula-das por subseqentes mutaes. Entretanto, pelo que se sabe dificilmente uma clula somtica madura vive tempo o sufici-ente para acumular mutaes determinantes para a carcinognese. Essa ainda uma questo que discutida e provavel-mente esse ponto da tumorignese deve ser determinado individual-mente para cada tipo tumoral. Os efeitos limitados das terapias convencionais sugerem que entre as clulas tumorais h uma populao resis-tente de clulas responsveis pela iniciao do tumor, seu desenvolvimento, crescimento e recorrncia. No mo-delo de clulas-tronco cancergena, o desenvolvimento do tumor, as-sim como o desenvolvimento de um tecido nor-mal, est baseado em um tipo celular capaz de auto-renovao que d origem a outros subtipos celulares com limi-tado potencial replicativo. Isso explicaria a heterogenei-dade tumoral e sua capacidade de regenerao. Os mecanismos de tumorignese parecem ser conservados entre humanos e ces. Clulastronco cance-rge-nas caninas foram isoladas de osteosarcomas e demonstrou-se que expressavam marcadores de clulas-tronco embrion-rias Oct e Nanog, que esto envolvidos na manuteno da pluripotncia. Populaes de c-lulas-tronco cancergenas semelhantes foram isoladas de carcinoma mamrio, melanoma e hemangiosarcoma. Estes traba-lhos indicam a potencial vantagem de utilizar ces e gatos no estudo da biologia da clula tronco tumo-ral. H 2 teorias quanto carcinognese a partir de uma clula tronco: monoclonal e policlonal. A origem policlo-nal do cncer pode ser possvel/aceita para algumas formas herdadas de cncer onde h mutaes germi-nati-vas nos dois alelos e a susceptibilidade gentica age como um efeito determinante. Entretanto, para a maioria dos ti-pos de cncer espordicos ou formas

herdadas que dependem de uma mutao somtica adicio-nal, a teoria policlo-nal aparenta ser improvvel, pois clulas muito prximas entre si deveriam ser muta-das concomitantemente ou com uma pequena diferena de tempo entre elas para formar um nico tumor. Teoria monoclonal Essa teoria diz que uma nica clula sofre uma transformao maligna e forma um clone tumoral que proli-fera e d origem a diferentes subclones. A aquisio seqencial de mutaes durante a evoluo clonal no apenas promove uma presso de sele-o positiva, mas tambm gera um grau de instabilidade no genoma que leva a mutaes celulares individuais den-tro de um mesmo clone. Assim possvel compreender a variabilidade fenotpica e funcional das clulas em um mesmo foco tumoral. 8. Tipos de mutao: Agentes exgenos como qumicos e irradiao induzem dano direto ao DNA, mas um nvel basal de muta-es ocorre da interao hidroltica da gua sobre o DNA. Essa interao resulta na clivagem de ligaes gli-cosdi-cas que podem depurinar ou depirimidinar as bases nucleotdicas ou causar quebras na fita. Altera-es genti-cas associa-das a mudanas malignas podem ser, Simplificadamente, agrupadas em cinco categorias: Mudana na seqncia de nucleotdeos: resultante de substituies de pares de base, delees ou inser-es. Delees ou inseres podem levar a maiores problemas na transcrio do gene. Estas geral-mente resul-tam em protena truncada porque a seqncia de DNA alterada no pode ser lida. Mudana no nmero normal diplide de cromossomos: comum no cncer, clulas aneuplides apresen-tam geral-mente material cromossmico reduzido em 50% resultante de segregao inapropriada dos cro-mossomos durante a mitose. Translocaes cromossomais: so o mais comum rearranjo estrutural em clulas cancergenas e en-volve a fuso de diferentes cromossomos ou segmentos de um nico cromossomo que no so contguos. Essa troca de material cromossomal pode resultar no posicionamento de um oncogene prximo a seqn-cias que regu-lam a transcrio, levando a sua superexpres-so. Alternativamente um gene de fuso pode ser for-mado na combinao das seqncias codificantes de cada lado do ponto de quebra. Um exemplo clssico a formao do cromossomo Filadlfia na Leucemia Mielide Crnica em humanos. Esse cromossomo resulta da fuso da poro carboxi-terminal do gene c-abl no cromossomo 9 e a poro aminoterminal do gene bcr no cromossomo 22, gerando o produto gentico bcr-abl. Amplificaes genticas: resultam em mltiplas cpias de um amplicon contendo 0.5 a 10 megabases de DNA. Esse fenmeno costuma ocorrer tardiamente na patognese do cncer e normalmente resul-tado de instabili-dade gentica adquirida. Quando um amplicon codifica uma oncoprotena, sua super-ex-presso leva a tumorignes. Mudanas epigenticas: representam uma via no mutacional de modulao da expresso gnica. No lu-gar de mudanas na seqncia de nucleotdeos, so usados a metilao do DNA e a modificao de histonas para man-ter um gene inacessvel a DNA polimerase. A

hipermetilao um mtodo de silencia-mento gnico e pode evitar a expresso de genes supressores de tumor, como BRCA1, mesmo quando a seqncia g-nica est intacta. Polimorfismos: so mutaes germinativas que ocorrem em um gene, normalmente em um nico nucleot-deo, conhecidas como SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) e ocorrem na populao com a freqncia de 1%. Esse tipo de mutao tem efeitos muito sutis e por isso difcil determinar sua influn-cia em relao ao risco de cncer. O polimorfismo mais estudado do gene TP 53. LEEUWEN e colaboradores em 1996, estu-dando mutaes deste gene em 18 ces com osteosarcoma, identificaram alteraes em quatro tumores prim-rios atravs da anlise de polimorfismos. 9. Instabilidade gentica: O processo de seleo clonal amplifica a taxa de mutao espontnea nas clulas somticas, o que per-mite o surgimento de tumores. A freqncia de eventos mutacionais posteriormente ampliada pela existncia de instabili-dade gentica. medida que as clulas adquirem mutaes relacionadas ao cncer o genoma se torna mais instvel. A instabilidade gentica parece ser inerente aos tumo-res e aumenta a probabilidade de muta-es espont-neas. Embora as clulas estejam vulnerveis a danos genticos, existem mecanismos especficos que tm a funo de manter a integridade do genoma, tais como: reverso da leso, reparo por exciso de ba-ses, reparo por exciso de nucleotdeos, reparo de quebras duplas no DNA, entre outros. Genes Caretakers: Esto envolvidos no reconhecimento e reparo em anormalidades dos pares de bases ou quebras na fita de DNA. Controlam a entrada das clulas no ciclo de replicao e promovem a sua remoo ou morte na presena de DNA danificado. Esses genes trabalham em conjunto com os Caretakers de forma a reparar danos no DNA antes que um ciclo celular seja concludo. Se essa funo de guardio falhar, h o risco de pores do DNA danificado ser passado para as clulas filhas. Os Gatekeepers atuam nos pontos de checa-gem do ciclo celular (G1/S e G2/M) e intera-gem com vias de sinalizao que integram sinais estimulat-rios e inibitrios intra e extracelulares durante G1 e G2. Defeitos especficos nos genes Caretakers e Gatekeepers podem levar a altas ta xas de instabilidade gen-tica e progresso rpida para um fentipo ma-ligno. A instabilidade gentica pode se manifestar em nvel cro-moss-mico ou de nucleotdeos. H uma relao inversa entre a instabilidade cromossmica e a nucleotdica, pois normal-mente quando uma observada a outra no est presente, o que sugere que suas vias so mutuamente exclusivas. A instabilidade cromossmica a mais comumente observada, apresentando-se na forma de delees em larga es-cala, duplicaes, trocas de todo ou de grandes segmentos cromossmico. A instabilidade nucleotdica, menos co-mum, resulta de substituio, deleo ou insero de nucleot-deos. Uma instabilidade muito estu-dada ocorre em genes com seqncias repetitivas (poli-A ou CAs), que so mais suscetveis. Esse fentipo chamado de instabilidade de microssatlites. 10. Pontos de checagem do ciclo celular e o cncer: A progresso do ciclo celular normal extremamente regulada como parte do complexo processo de diviso celular. Os pontos de checagem j mencionados anteriormente so fundamentais para exercer o con-trole do ciclo, garan-tir a fidelidade da duplicao do DNA e que o processo de reparo no seja comprome-tido ao longo do tempo. Esse processo de controle minimiza a propagao de

mutaes herdadas e reduz o risco de desenvolvi-mento de cn-cer maligno. Genes que codifi-cam protenas que promovem o ciclo celular so freqentemente alvos de ativao no cncer atravs de mutaes que levam a ganho de funo ou amplificao gnica. CONCEITOS BSICOS SOBRE O CNCER E BIOLOGIA MOLECULAR CNCER: O cncer (CA) segue sendo uns dos maiores e mais perigosos inimigos de nosso pr-prio corpo, com um ele-vado ndice de mortalidade em indivduos maiores de 40 anos. A palavra Cncer empregada para descrever um complexo e heterogneo grupo de estados patolgi-cos no qual as clulas proliferam descontroladamente e invadem tecidos vi-zinhos. O cncer uma enfermidade de carter gentico, que se produz ao serem eliminadas as restries que li-mi-tam a diviso celular em clulas de tecidos j diferenciados e na maioria dos casos uma enfermidade adqui-rida e, com freqncia, de carter irreversvel. Existem numerosos estudos que correlacionam incidncia de determinados cnceres com o estilo de vida, os hbitos, dietas, profisses, lugar geogrfico, etc. O que ocorre um cres-cimento descontrolado de um grupo de clulas dentro de um tecido fazendo com que, na maioria das vezes, se inicie a produo de uma massa celular diferenciada do resto, deno-minado tumor. Este tumor pode ser: No invasivo: constitudo por um conjunto de clulas que permanecem encapsuladas no local de ori-gem sem produzir maiores danos aos tecidos adjacentes. Neste caso considera-se o tumor como benigno. Invasivo: quando somamos ao crescimento e proliferao descontrolados a propriedade de invaso e disper-so a outros tecidos com produo de metstase, neste caso o tumor ser catalogado como maligno. Mets-tase um tumor secundrio originado pela dissemina-o de clulas cancerosas pro-cedentes de um pri-meiro tumor (ou tumor primrio). Outra forma de denominao do cncer neoplasia, que significa literalmente novas proliferaes ou multiplicao progressiva de clulas, e estas podem se iniciar a partir de clulas normais em qualquer tecido sadio. Biolgica e clinicamente a classificao mais importante dos tumores se encontra entre tumores benignos e malignos, dos quais somente estes ltimos so considerados propriamente cnceres:

TUMOR BENIGNO: No necessariamente avana para a malignidade Mantm-se parecido com o tecido de origem Nem todos os tipos de tecidos podem estar implicados Muitas vezes esto separados do tecido normal por uma espcie de cpsula de tecido conjuntivo. Citologicamente no se diferenciam muito de clulas normais e os problemas clnicos surgem, em muitos casos, de maneira indireta por presso da massa tumoral sobre nervos ou outros tecidos prximos

TUMOR MALIGNO: ao contrrio do anterior apresenta numerosas anormalidades citolgicas, tais como:

Variaes na forma e tamanho, Aumento da densidade e tamanho do ncleo celular, Mitoses anormais, No se encapsulam, Destroem a membrana basal invadindo vasos sangneos e ndulos linfticos.

CONCEITOS BSICOS SOBRE BIOLOGIA MOLECULAR: Do ponto de vista molecular sabemos que cada clula possui uma srie de genes (unidade biolgica da hereditariedade, que se auto-reproduz e transmitida para outras geraes) que controlam as funes de crescimento e diviso celular. Os genes cujas alteraes produzem ou contribuem para o aparecimento do cncer so denominados oncogenes (do grego onkos= tumor), e o homlogo celular normal constitui o proto-oncogene. cidos Nuclicos: Os cidos nuclicos so constitudos por unidades elementares denominadas "nucleotdeos", os quais esto formados por trs componentes: 1. Molcula de acar

Ribose, no caso do cido ribonuclico (RNA): Desoxirribose, no caso do cido desoxirribonuclico (DNA).

2. Base orgnica nitrogenada

Adenina, guanina (bases pricas), citosina e timina (bases pirimidnicas) no caso do DNA. Adenina, guanina (bases pricas), citosina e uracila (bases pirimidnicas) no caso do RNA.

3. Grupos fosfato

Os nucleotdeos se unem formando cadeias cujo esqueleto est formado pela unio entre o acar de um nucleotdeo e o fosfato do seguinte, ficando as bases nitrogenadas na parte central, unidas cada uma ao C1 do acar. Estas bases so as que conferem especificidade ao cido nuclico.

ESTRUTURA DO DNA: Estrutura primria:

A estrutura primaria dada pela seqncia de nucleotdeos. Quando se deseja representar a seqncia de um oligonucleotdeo ou de um cido nuclico, se representa mediante a terminologia de cada uma das bases. Por exemplo: 5'ATC CCA GCC CGA TTA AAG CC-3'. Esta seqncia representa um oligonucleotdeo com 20 bases, das quais 6 so adeninas (A), 3 so timinas (T), 8 so citosinas (C) e 3 guaninas (G). A ordem da seqncia muito importante, uma vez que nela reside a informao contida no cido nuclico. A maioria das molculas de DNA possui duas cadeias antiparalelas (uma sense, filamento que transcrito e especifica um produto,

5-3 e a outra antisense, que o filamento complementar, 3-5) unidas entre si mediante as bases nitrogenadas, por meio de pontes de hidrognio; O 5' representa o extremo terminal do fosfato e o 3' o extremo final do tomo de carbono da desoxirribose.

Estrutura secundaria: Edwin Chargaff analisando as bases do DNA mediante mtodos cromatogrficos descobriu que estas no se encontram na mesma proporo e que o nmero de adeninas igual ao de timinas e o de citosinas, ao de guaninas. Em 1953 James Watson y Francis Crick construram um modelo tridimensional do DNA com a configurao mais favorvel energeticamente, combinando os dados obtidos at ento sobre ele, os descobrimentos de Chargaff e a interpretao tridimensional dos espectros de difrao de Raios X; este ltimo foi de grande importncia para a consecuo de tal modelo, o qual consiste em uma dupla hlice antiparalela cujo esqueleto fundamental est formado pelas cadeias de acarfosfato, ficando na parte central as bases, enfrentadas as de uma cadeia com as da outra complementaria e formando entre si pontes de hidrognio, fator que confere estabilidade a dupla hlice. O enfrentamento de bases constante; a adenina sempre se enfrenta com a timina e entre elas se formam duas pontes de hidrognio, e a guanina com a citosina, formando-se entre ambas trs pontes de hidrognio. Esta caracterstica faz com que as duas cadeias sejam complementarias. Com base em alteraes genticas relacionadas com a presena de mutaes (alteraes produzidas na estrutura ou no nmero de genes que se transmite aos descendentes por herana), translocaes (mudana de um segmento de cromossomo para a outra parte de um cromossomo homlogo ou ao interior de um cromossomo no homlogo) ou delees (forma de alterao cromossmica que consiste na perda de uma poro de um cromossomo). Atualmente possvel visualizar um padro molecular de uma enfermidade neoplsica com conotaes diagnsticas e prognosticas importante. Os genes supressores de tumores (GST) so genes que em seu estado normal codificam uma protena inibitria do crescimento ou da proliferao celular, ou seja, os GST mantm a integridade a nvel celular. Como exemplo podemos citar o gene p53, que um GST e que possui ciclo celular no ponto de checagem (checkpoint) G1/S (intervalo 1/sntese). Quando ocorre uma alterao no DNA a p53 se acumula e atravs de indues e ativaes o ciclo detectado e mantido corretamente. Caso a p53 falhe o ciclo continuar mantendo a alterao no DNA levando a mutao do gene. A biologia molecular tambm vem avanando no campo de marcadores tumorais (MT), que so utilizados no diagnstico do CA, mas ainda no so teis para conhecer a evoluo do paciente, o prognstico e as metstases. O conceito de MT se refere a toda a substncia de carter bioqumico produzido pelas clulas tumorais ou por clulas do hospedeiro cuja presena pode ser detectada no soro ou em outros lquidos. Estudos realizados por Mullis e Faloona com a polimerase, enzima que catalisa o ato ou processo de formar um composto em especial de nucleotdeo para polinucleotdeo, comearam a dar resultados e em 1986 surgiu reao em cadeia da polimerase (PCR), tcnica que permite a amplificao in vitro de um trecho de DNA. Nesta tcnica se reproduz o processo de replicao, processo pelo qual uma molcula de DNA origina outra idntica a pr-existente, natural do DNA com a vantagem de extrema rapidez e determinao precisa do trecho a ser amplificado para estudo. Esta tcnica deu um grande avano no estudo do DNA, pois atravs dela

conseguimos estudar pores da cadeia de DNA e identificar as alteraes a nvel celular e molecular. O processo de replicao realizado pela DNA polimerase, que atua sobre as fitas no pareadas de DNA, para se iniciar a duplicao a DNA polimerase necessita que a fita de interesse possua alguns nucleotdeos complementares pareados em seu incio (sense). A separao ocorre por desnaturao trmica e os oligonucleotdeos, seqncias curta sintetizadas para se equipararem a uma regio onde ocorre mutao e a seguir utilizada como uma sonda, complementares (primers) nas extremidades do trecho a ser amplificado garante o pareamento inicial para que a polimerase inicie a replicao. BASES CELULARES DO CANCER. INTRODUO : A clula a constituio bsica dos seres vivos, podendo ocorrer isoladamente, nos seres unicelulares, ou formar arranjos ordenados, que constituem o corpo dos seres pluricelulares. No organismo humano, representante dos seres pluricelulares, elas estaro agrupadas em tecidos, de acordo com a sua forma e funo. As clulas esto classificadas em duas classes: os procariontes, cujos cromossomas no esto separados do citoplasma por membrana, e os eucariontes, com um ncleo bem individualizado e delimitado pelo envoltrio nuclear (Carioteca). As clulas eucariontes apresentam duas partes morfologicamente bem distintas, o citoplasma e o ncleo, em que no ncleo est localizado o material gentico celular. Cada clula humana apresentar cidos nuclicos, denominado DNA genmico, no qual estaro armazenadas as informaes genticas (determinadas pela combinao de bases nitrogenadas e que estabelece a seqncia dos genes). Esse material gentico constitudo de bases nitrogenadas, podendo sofrer alteraes denominadas mutaes genticas. Os diferentes tipos de cncer correspondem aos vrios tipos de clulas do corpo. Se o cncer tem incio em tecidos epiteliais como pele, mucosas, ele denominado carcinoma. Se comea em tecidos conjuntivos como osso, msculo ou cartilagem chamado de sarcoma. Outras caractersticas que diferenciam os tipos de cncer entre si so: a velocidade de multiplicao das clulas e a capacidade de invadir tecidos e rgos vizinhos ou distantes (metstase). No cncer ocorre uma desrregulao profunda e instvel da diferenciao e expresso celulares. Assim que nas clulas dos tumores malignos os genes se expressam de maneira anormalmente diversificada e instvel. Existem inmeras diferenas de funo e forma entre as clulas normais e as clulas tumorais: A clula normal:

Possui a sua funo e localizao definida. Sua forma definida de acordo com a sua funo. Seu ncleo possui uma morfologia normal Seu caritipo estvel.

Na clula tumoral:

A diviso celular ocorre muito rpida, de forma que a diferenciao celular falha Sua funo no ser definida.

Apresentam variabilidade anormal no tamanho, na forma do seu ncleo e no numero e estrutura de seus cromossomos.

Uma clula normal pode sofrer alteraes nas bases nitrogenadas dos genes, o que chamamos mutao gentica. As clulas cujo material gentico foi alterado passam a receber instrues erradas para as suas atividades. Estas clulas, provenientes da mesma clula-tronco mutada, originam montantes de corpos celulares idnticos, portanto, formando o que chamamos de "clones". Esses clones celulares formam um novo tecido, o que denominamos neoplasia (do grego neo: novo; plasier: formar). As alteraes podem ocorrer em genes especiais, denominados proto-oncogenes, que a princpio so inativos em clulas normais. Quando ativados, os protooncogenes transformam-se em oncogenes, responsveis pela malignizao (cancerizao) das clulas normais. O termo provavelmente originado do grego KARKINOS (caranguejo), como uma espcie de similaridade da atuao da doena s garras desse crustceo: aderem e infiltram. Em geral, o cncer no hereditrio, porm, h casos em que famlias so notavelmente agredidas por ele. Uma possvel transmisso gentica, por alguns genes responsveis pela proliferao celular. o que se observa, por exemplo, no cncer de mama em mulheres, no cncer de clon (intestino grosso) e no retinoblastoma (tumor ocular de criana). Assim sendo, parece que algumas influncias genticas podem contribuir para o surgimento do cncer. Portanto, existindo casos na famlia, recomenda-se maior vigilncia para parentes diretos, na possibilidade de preveno ou deteco precoce da enfermidade. Inicialmente, o cncer tem um comportamento silencioso. A progresso do crescimento leva ao surgimento da metstase, podendo acarretar a falncia dos rgos atingidos. Nessa ocasio, torna-se necessria a instituio de teraputica quimioterapia, radioterapia, e/ou cirrgica, com o objetivo de impedir o crescimento tumoral e piora do rgo acometido. No cncer ocorre uma desrregulao profunda e instvel da diferenciao e expresso celulares. Assim que nas clulas dos tumores malignos os genes se expressam de maneira anormalmente diversificada e instvel. Vrios tumores apresentam genes ativados que no so expressos normalmente nos tecidos adultos de onde se originaram. As protenas derivadas da expresso destes genes so chamadas de marcadores tumorais, e a deteco e dosagem destas protenas so usadas na prtica mdica no s para diagnstico, mas tambm para acompanhar a evoluo dos tumores. Descobriu uma "assinatura gentica que pode explicar como o melanoma maligno, forma mortal de cncer de pele, pode se espalhar para outras partes do corpo. Utilizando uma nova tecnologia de anlise gentica, denominada perfil de expresso gnica, os pesquisadores foram capazes de descobrir uma assinatura gentica, ou um conjunto de diferenas nos genes, que, pela primeira vez, dividiu os pacientes com melanoma avanado em subgrupos. O perfil da expresso gnica tambm foi utilizado para identificar subconjuntos de linfoma e leucemia.

Tal classificao de cnceres no mbito molecular permite determinar coma maior preciso evoluo da doena e estabelecer terapias adequadas ao paciente, baseado na sua composio gentica. O perfil de expresso gnica utiliza um micro-arranjo de DNA, pequenas lminas de vidro contendo minsculas quantidades de milhares de genes

conhecidos. Estes "chips" de genes podem detectar rapidamente quais dos genes so expressos ou ativos em uma nica amostra de tecido com cncer. Neste ltimo estudo, quase meio milho de medidas foram efetuadas em cerca de 7 mil genes diferentes em tumores melanoma de 40 pacientes. Softwares sofisticados foram utilizados para analisar a informao contida no chip para descobrir padres ocultos de expresso gnica entre as amostras de tumores. Descobriu-se que 19 dos cnceres eram similares com relao expresso gnica, diferindo do restante os tumores apenas pela expresso de 500 genes. De acordo com a histria de cada paciente, os tumores deste grupo tendem a ser menos agressivos, sugerindo que sofriam metstase menos rapidamente.

Em um experimento relacionado, os pesquisadores tentaram determinar as diferenas na expresso gnica que levam a variaes no comportamento biolgico de clulas de melanoma humano cultivadas em laboratrio:

Algumas apresentavam maior capacidade de invaso ou habilidade de se mover pelas camadas de outras clulas, processo relacionado difuso do cncer. Algumas destas clulas que se movem rapidamente tm maior habilidade para formar um tipo de estrutura, no formato de um cordo, que se assemelha aos vasos sangneos necessrios para alimentar os tumores conforme os mesmos crescem. Os cnceres de pele so os mais comuns em humanos, sendo o melanoma o mais srio. Em muitas partes do mundo, as taxas de melanoma crescem mais rapidamente do que qualquer outro tipo de cncer. Os estudiosos acreditam que grande parte deste aumento esteja relacionado, maior exposio radiao ultravioleta da luz do sol, a qual causa mutaes no DNA, resultando em clulas danificadas. As clulas possuem uma seqncia de fases e um controle para se dividir e as clulas cancerosas desafiam esta seqncia e o controle normal das clulas em diviso. Uma nica clula anormal capaz de desencadear um tumor, passando a sua anormalidade para sua prognie, ou seja, devido a uma mudana gentica isto , uma alterao na seqncia do DNA da clula ou a uma mudana epigentica isto , uma mudana no padro de expresso gnica sem uma mudana na seqncia do DNA, que se origina um cncer.

Uma correlao entre carcinognese (gerao do cncer) e a mutagnese (a produo da mudana na seqncia do DNA) clara para trs classes de agentes:

Carcingenos qumico: que tipicamente causa mudanas locais na seqncia de nucleotdeos Radiao ionizante: que tipicamente causam quebras cromossmicas e translocaes Vrus: que introduz DNA estranho na clula.

Em geral, um dado cncer no pode ser o resultado de um nico evento ou uma nica causa: cnceres resultam da ocorrncia de vrios acidentes independentes em uma clula com efeitos acumulativos. Um tumor considerado como cncer somente se for

maligno, isto , somente se estas clulas tiverem o poder de invadir tecidos visinhos. Capacidade de invaso geralmente implica na habilidade de escapar, entrar na corrente sangnea ou vasos linfticos e formar tumores secundrios, ou metstases, em outros locais do corpo. Quanto mais metstases um cncer for capaz de produzir, mais difcil a sua erradicao. Todas as clulas eucariticas sejam elas normais ou cancerosas, possuem uma capacidade de adotar uma variedade de formas e de executar movimentos coordenados e direcionados. Isto depende de uma rede complexa de filamentos de protenas filamentosas que se estendem por todo o citoplasma, chamada de citoesqueleto. certo de que as clulas cancerosas liberam alguma substncia que provoca o crescimento de vasos em direo ao tumor. Tumores precisam atrair vasos sanguneos para poderem crescer. Esse crescimento de vasos sanguneos conhecido como angiognese (angio=vasos, gnese=criao). Os inibidores de angiognese tm tambm alvos moleculares. Eles levariam as clulas tumorais morte por falta de nutrientes, pois bloqueariam a produo de vasos sangneos, essenciais para levar o sangue com os nutrientes ao tumor. As clulas tumorais produzem substncias que fazem os vasos sangneos crescerem, para aumentar o fluxo de sangue no local, levando oxignio e nutrientes. As novas drogas seriam bloqueadoras dessas substncias produzidas pelos tumores. Vrios estudos ainda esto sendo feitos, sendo a anti-angiognese uma das grandes esperanas no combate ao cncer. A manuteno de um tecido tumoral baseado em uma clula tronco tumoral leva a complicaes biolgicas no curso da doena. A maioria dos mtodos de tratamento quimioterpica tem como alvo clulas em proliferao (clulas vermelhas). As clulas-tronco (clulas azuis) so pouco freqentes e quiescentes, portanto resistentes a esses tratamentos. A longo prazo elas voltam a compor um novo tecido tumoral. Baseados nos estudos da biologia da clula-tronco, a diferenciao das clulas-tronco tumoral, a tornaria sensvel quimioterapia, sendo que o mesmo aconteceria ao estimular a proliferao da clula tronca tumoral. Acredita-se que a transformao maligna se d pelo acmulo de mutaes, que podem ser acompanhadas ou no de aberraes cariotpicas (anomalias genticas citadas acima). A probabilidade das alteraes ocorrerem se relaciona ao potencial proliferativo da populao em questo. Por isso, essa transformao maligna pode no ocorrer na clula-tronco, que uma clula com freqncia quiescente, mas pode ocorrer em seus progenitores, que so clulas que passam por vrios ciclos de diviso para expanso da populao perifrica. De fato, podemos at propor que a baixa freqncia das clulas-tronco adultas somada a sua quiescncia a protegem de mecanismos de transformao maligna. CONCLUSO

O cncer uma doena cujo progresso est extremamente ligado ao desenvolvimento celular. Seu crescimento gerado por clulas que descendem de uma clula mutada, ou seja, cujo material gentico sofreu inmeras alteraes e que sua expresso foi modificada. Na maioria dos casos, as clulas mutadas apresentam sua forma, funo e expresso modificados da forma, funo e expresso da respectiva clula normal. As alteraes podem ocorrer em genes especiais, denominados proto-

oncogenes, que a princpio so inativos em clulas normais. Quando ativados, os proto-oncogenes transformam-se em oncogenes, responsveis pela malignizao (cancerizao) das clulas normais . Um tumor considerado como cncer somente se for maligno, isto , somente se estas clulas tiverem o poder de invadir tecidos visinhos (Alberts et al.1997). Inicialmente, o cncer tem um comportamento silencioso. A progresso do crescimento leva ao surgimento da metstase, podendo acarretar a falncia dos rgos atingidos. As pesquisas de tratamento que amenizam os sintomas e que levam a cura do cncer esto progredindo a cada dia. Esta pesquisa tem como intuito levantar dados sobre a forma do desenvolvimento celular do cncer, buscando reunir o mximo de informaes sobre esta neoplasia que tanto atrai os citologistas.

GENTICA E CNCER: O cncer uma doena gentica, independente de ocorrer de forma espordica ou hereditria, pois a carcinognese sempre inicia com danos no DNA. Geralmente esses danos so causados por agentes qumicos, fsicos ou virais. Existem, basicamente, duas categorias de genes envolvidos nas formaes neoplsicas: os oncogenes e os genes supressores tumorais. ONCOGENES: O controle das atividades celulares normais feito por muitos tipos de genes, entre eles os proto-oncogenes. Os oncogenes so proto-oncogenes que sofreram mutaes ativadoras, ou seja, que passaram a ter ganho de funo ou hiperexpresso. Uma caracterstica importante dos oncogenes que eles tm efeito dominante na clula, ou seja, um nico alelo mutado suficiente para alterar o fentipo de uma clula normal para tumoral. As mutaes formadoras de oncogenes necessariamente so adquiridas, uma vez que se ocorrerem na linhagem germinativa (mutaes herdadas), so letais para o embrio. So vrios os tipos de mutaes que formam oncogenes: mutaes gnicas, mutaes cromossmicas, amplificao gnica e superexpresso gnica. Os oncogenes so responsveis por aumentar a proliferao celular ao mesmo tempo em que inibem a apoptose, eventos que podem dar incio a uma neoplasia. A ativao dos oncogenes tem papel importante tanto nos cnceres hereditrios como nos espordicos. Alguns exemplos esto listados abaixo com suas respectivas funes na clula:

Gene RAS: foi um dos primeiros oncogenes descoberto. O gene RAS normal codifica as protenas G, que se ligam ao GTP para ativar ou inibir a proliferao celular. Quando mutado codifica protena anormal que no mais depende da presena de GTP ligado ou no para sinalizar e estimular a proliferao celular. Geralmente a mutao que ocorre nesse gene a troca de apenas um par de bases (mutao de ponto). Genes ABL / BCR: a translocao do proto-oncogene ABL do cromossomo 9 para o 22 (cromossomo Philadelphia) faz com que ele fique em justaposio ao gene BCR, o que provoca a sntese de protena abl alterada (quimera). O aumento da atividade dessa protena fator desencadeante para a Leucemia Mielide Crnica. Gene MYC: algumas vezes esse gene sofre uma translocao do cromossomo 8 para o 14, ficando posicionado prximo a um gene codificador de imunoglobulinas, o que desregula a sua funo. Como essa translocao geral-

mente balanceada no provoca alteraes evidentes no portador e pode ser transmitida a outras geraes subseqentes. A protena myc atua como fator de transcrio e na expresso da telomerase, portanto esses eventos se daro de forma desordenada se a protena estiver mutada. Esse oncogene est associado a um tipo importante de cncer: o Linfoma de Burkitt. Gene HER2: um proto-oncogene responsvel por codificar receptores de fatores de crescimento. Se transformado em oncogene produz um nmero maior de receptores muito sensveis, mas pouco especficos, ou seja, respondero a qualquer estmulo iniciando a proliferao celular. Esse gene est muito relacionado ao cncer de mama em ambos os sexos. Gene BCL2: responsvel por regular a apoptose. Quando ocorre uma translocao cromossmica especfica, um gene de cadeia pesada de imunoglobulinas translocado do cromossomo 14 para o 18, onde est posicionado o BCL2. Essa justaposio ativa o gene, que passa a codificar uma protena com efeitos antiapoptticos nas clulas B, originando o Linfoma de Clulas B Folicular. Genes MET e RET: so oncogenes responsveis por desencadear uma srie de eventos, que quando combinados a outros fatores, provocam o carcinoma papilar renal e o carcinoma medular da tireide, ambos hereditrios. Genes que codificam a telomerase: so responsveis pela fabricao da enzima telomerase, que mantm um nmero suficiente de repeties tipo TTAGGG na regio do telmero, impedindo a destruio da clula. Porm, normal que uma clula, com o passar do tempo, perca os telmeros e seja eliminada, sendo esse um processo importante de controle da qualidade das clulas do organismo. Quando h uma mutao, a telomerase expressa de forma desregulada perpetuando as clulas em que atua.

GENES SUPRESSORES TUMORAIS: So genes que expressam produtos que regulam negativamente o ciclo celular. Quando mutados deixam de exercer seus papis atravs de processos especficos para cada gene. Os genes supressores tumorais so divididos em dois grandes grupos: os Gatekeepers e os Caretakers. 1) Gatekeepers ou genes protetores: regulam diretamente o ciclo celular:

Gene TP53: presente no cromossomo 17 (17p13.1). Est mutado em cerca de 2/3 dos casos de cncer. Ele responsvel pela interrupo do ciclo celular na fase G1 quando h qualquer alterao na seqncia de DNA para que o dano seja reparado. Se o reparo no for feito, o gene induzir a apoptose celular. A disfuno desse gene faz com que o ciclo celular prossiga mesmo que haja uma mutao no DNA, transmitindo-a as clulas descendentes e iniciando um processo neoplsico, como ocorre na Sndrome de Li-Fraumeni (condio em que ocorre predisposio a desenvolver cncer em vrios stios como mama, ossos, clon, pncreas, entre outros.) Gene RB1: situado no cromossomo 13 (13q14.3), produz uma protena que bloqueia o ciclo celular quando hipofosforilada. Esse bloqueio ocorre quando a protena hipofosforilada se liga a determinados fatores de transcrio inativandoos. Quando esse gene est mutado o seu produto encontra-se permanentemente hiperfosforilado, permitindo a progresso do ciclo e

dando incio a um processo neoplsico. Apesar desse gene se expressar em vrios tecidos alm da retina, sua mutao resulta geralmente em um Retinoblastoma, hereditrio em 40% dos casos e espordico em 60% dos casos. Gene APC: est localizado no cromossomo 5 (5q21-q22). Produz a protena APC que regula a quantidade de b-catenina livre no citoplasma. Em condies normais, quando a clula no precisa se multiplicar, a b-catenina se encontra ligada a um complexo E-caderina, inibindo a progresso do ciclo celular. Se o gene APC estiver mutado, produzir uma protena truncada, responsvel por um aumento da poro livre de b-catenina, que transportada para o ncleo ativando a transcrio de genes deproliferao celular, inclusive o MYC. Mutaes nesse gene provocam Polipose Intestinal Adenomatosa de carter familiar ou espordico e sndromes que envolvem cncer colo-retal como a Sndrome de Gardner.

2) Caretakers ou genes de manuteno: atuam reparando danos no DNA, mantendo a integridade genmica e evitando a instabilidade gentica. Sozinhos no induzem a formao de neoplasia, pois alteraes nesses genes no conferem vantagem clula, mas facilitam a ocorrncia de mutaes nos genes gatekeepers que daro incio a carcinognese.

Genes BRCA1 e BRCA2: presentes no cromossomo 17 (17q21) e 13 (13q12) respectivamente. So ativados nas fases G1 e S do ciclo celular. Os produtos dos dois genes esto em um mesmo complexo multiprotico e so responsveis pela resposta celular s quebras do DNA que ocorrem normalmente na recombinao homloga ou de forma anormal quando h danos na estrutura do DNA. Se mutados predispem ao aparecimento de cncer de mama e de ovrio, que tanto podem ter carter espordico como hereditrio. Genes MMR: so genes responsveis por reparar erros de pareamento do DNA (Mismatch Repair genes). Existem inmeros genes de reparo, mas somente alguns j foram identificados como causadores de tumores como: MLH1, MSH2, PMSL1, PMSL2 e MSH6. Mutaes nesses genes provocam aumento da incidncia de mutaes de ponto no DNA e tendncia instabilidade dos microssatlites. Essa instabilidade chamada de fentipo Erro de Replicao Positivo (RER+) que ocorre em vrios tipos de tumores. Alteraes nos genes de reparo provocam, mais freqentemente, o cncer colo-retal hereditrio sem Polipose, mas tambm so responsveis por cnceres intestinais espordicos.

SNDROMES DE CNCER HEREDITRIO As sndromes so definidas como combinaes de sinais e sintomas, formando apresentao clnica distinta indicativa de anormalidade particular. As sndromes de cncer hereditrio so afeces genticas nas quais neoplasias malignas parecem se aglomerar em certas famlias. Apenas uma pequena parcela dos cnceres relatados pode ser considerada parte de uma sndrome de cncer hereditrio. A maior parte resulta de defeitos na replicao do DNA, em seus mecanismos de controle ou pela ao de agentes carcingenos. As caractersticas clnicas associadas ao cncer hereditrio so:

Idade precoce ao diagnstico Mltiplas neoplasias em um mesmo indivduo Mltiplos membros de uma mesma famlia apresentando a mesma neoplasia ou neoplasias relacionadas, Mltiplas geraes acometidas.

A identificao de indivduos em risco para cncer hereditrio importante por vrias razes:

Os indivduos afetados apresentam risco cumulativo vital muito superior ao da populao para vrios tipos de cncer. Outros familiares de um indivduo afetado podem estar em risco para o cncer hereditrio (como as maiorias dessas doenas genticas seguem herana autossmica dominante, 50% dos irmos e 50% dos filhos de um afetado podem ser portadores da mesma mutao que est levando ao cncer). Medidas de rastreamento intensivo e intervenes preventivas (cirurgias profilticas e quimioprofilaxia) se mostraram eficazes em reduzir significativamente o risco de cncer em portadores de tais mutaes.

A tecnologia atualmente nos permite diagnosticar uma mutao gentica muito antes do aparecimento dos sintomas. Por outro lado, a identificao precisa de um indivduo no afetado em uma famlia de risco, permite a tranqilizao do indivduo e elimina os gastos e complicaes de rastreamento e intervenes preventivas desnecessrios.