UNIPAC – UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS

JUIZ DE FORA – CAMPUS VI

FACULDADE DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

ROTEIRO PARA AULA PRÁTICA

Professor: Fernando T. Gomes Curso:

Disciplina: Bioquímica Período: 3º Turno: Noturno
Data:
Aluno (a):

DEMONSTRAÇÃO DA RESPIRAÇÃO PELO MÉTODO INDICADOR

INTRODUÇÃO

No processo respiratório ocorre trocas gasosas com o meio ambiente. Na respiração aeróbica,
há consumo de oxigênio e liberação de gás carbônico, enquanto na fermentação não há consumo de
oxigênio, mas pode haver liberação de gás carbônico (apenas no caso da fermentação alcoólica). O
CO2 em presença da água forma ácido carbônico, portanto, num sistema fechado, a respiração
acidifica a fase aquosa, já que se estabelece um equilíbrio entre as fases aquosas e líquida (com
deslocamento para a direita):

CO2 + H2O  H2CO3  H+ + HCO3-

Se a fase aquosa contiver um indicador de pH, as variações na quantidade de CO 2 no ar

podem ser detectadas pelas mudanças de coloração. O azul de bromotimol é um indicador, que se
apresenta verde em meio neutro, azul em meio básico e amarelo em meio ácido e pode, portanto,
ser usado para se observar a acidificação de uma fase aquosa por CO2 proveniente da respiração.

OBJETIVO
Demonstrar a ocorrência de atividade respiratória em diversos materiais biológicos.

MATERIAL
- Suspensão de levedo, em solução de sacarose a 10%
- Suspensão de levedo em solução de sacarose a 10% (fervido)
- Suspensão de levedo, em água destilada
- 4 suportes metálicos (Clipes)
- Água contendo CO2 (água mineral gasosa)
- Pipetas de 5 mL
- Pipetas de 1 mL
- Frasco âmbar (conta gotas) com solução de azul de bromotimol
- Tubos de ensaio grandes (4)
- Tubos de ensaio pequeno (3)
- Estante para tubo de ensaio
- Rolhas de borrachas para os tubos maiores
- Pêras para pipetagem
- HCl 0,1 N
- NaOH 0,1 N

PROCEDIMENTO

Enumere 4 tubos de ensaio de tamanho médio e adicione neles 5 gotas de azul de bromotimol.
Coloque no fundo dos tubos de no 2 a 4 um pequeno suporte metálico (clipes aberto), para manter
uma plataforma cerca de 1 cm acima do nível do indicador. Este arranjo servirá de apoio para um
tubo menor, que conterá o material a investigar e que não deve tocar a solução indicadora. Com
esses tubos, realize os seguintes ensaios:

Tubo 1 – Testemunha, para referência da coloração inicial do indicador.

Tubo 2 – Coloque a suspensão de levedo preparada em solução de sacarose a 10% até a metade de
um tubo de ensaio pequeno, que será introduzido no tubo maior com o indicador até tocar o suporte.
Tubo 3 – Proceda da mesma forma anterior, mas usando suspensão de levedo preparada em água.
Tubo 4 - Proceda da mesma forma anterior, porém usando suspensão de levedo previamente
fervida.
- Arrolhe bem todos os tubos imediatamente após a montagem e aguarde cerca de 1 hora.
Observe as mudanças na cor do indicador e anote suas observações. Adotando um sistema de
convenção para as variações de cor da solução indicadora.

Enquanto espera execute os seguintes ensaios:

TESTE 1 – Coloque 3 a 4 gotas do indicador em um tubo de ensaio e acrescente uma gota de

HCl 0,1 N. Observe o que aconteceu. Em seguida, adicione NaOH 0,1 N, gota a gota, até que haja
nova mudança de cor. Anote esta mudança e explique os resultados.

TESTE 2 – Coloque 3 a 4 gotas do indicador em um tubo de ensaio e acrescente algumas

gotas de água contendo gás carbônico até que mude de cor. Anote o resultado.

TESTE 3 - Coloque 10 a 12 gotas do indicador em um tubo de ensaio e sopre devagar, através

de uma pipeta de modo que o ar borbulhe na solução. Anote a mudança de cor.

Anotar e interpretar os resultados obtidos em todos os ensaios