2022

Aula 01

 Tópicos do curso:
Introdução a Cromatografia Líquida – Aula 1
Principais Aspectos da Cromatografia em Fase Reversa – Aula 2
Conceitos e Controle da Separação – Aulas 3 e 4
Como Tudo Isso Funciona na Prática – Aula 5

Entender os Quais os principais Entender como a

princípios de “modos” de usar a cromatografia em
cromatografia cromatografia fase reversa
líquida líquida funciona

Conhecer a teoria
da cromatografia
líquida

Aplicar na Controlar o Entender como o

prática o processo processo
conhecimento cromatográfico cromatográfico
adquirido através da teoria funciona

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Aula 01

 Origem da Cromatografia:
Experimento realizado por Tswett no início dos anos 1900.

Éter de Cromatografia
petróleo

Clorofila Registro das cores

Carbonato de
Cálcio

Mikhail Semyonovich Tswett (Tsvet)

 1900 (1903): M.S. Tswett – Invenção da Cromatografia

 1930: Redescobrimento da cromatografia
 Década de 1930: Aperfeiçoamento da cromatografia; Era da
“cromatografia moderna”, prêmios Nobel em 1937, 1938 e 1939.
 De 1930 a 1960: Desenvolvimento da cromatografia em camada
delgada (TLC) e permeação em gel (GPC)
 Fim da década de 1960: Surgimento da Cromatografia Líquida de
Alta Eficiência (CLAE)(ou do inglês High Pressure Liquid
Chromatography – HPLC); Csaba Horváth nos EUA e Josef
Huber na Europa.
 Década de 2000: Surgimento da Cromatografia Ultrarápida (do
inglês Ultra High Pressure Liquid Chromatography – UHPLC)

1903 1930 1969 2000

Fonte: Snyder (2010).

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Aula 01

 Em 1969 J.J. Kirkland da DuPont desenvolveu um processo para

produzir partículas de sílica com porosidade e tamanho
controlados, para preencher as colunas cromatográficas.

1 a 2 µm de espessura de camada

Núcleo
30 a 40 m sólido
10 m 2 a 5 m

Partícula sólida Partícula porosa Partícula porosa

 Definição da IUPAC numa tradução livre.

“Cromatografia é um método físico de separação no qual os

componentes a serem separados são distribuídos em duas fases,
uma é estacionária e a outra se move numa direção definida”

Fonte: IUPAC. Compendium of Chemical Terminology, 2nd ed. (the "Gold Book"). Compiled by A. D.
McNaught and A. Wilkinson. Blackwell Scientific Publications, Oxford (1997). Online version (2019-) created
by S. J. Chalk. ISBN 0-9678550-9-8.

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Aula 01

Fase
Estacionária

Interação

Soluto Fase
Móvel

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Aula 01

Figuras: Esquema de fluxo num sistema Thermo Vanquish.

Fonte: Manual de Operações 4820.3601-EN Revision 2.0 (Oct 2015)

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Aula 01

 Processo de separação:

Cromatograma
Intensidade do sinal do detector

tR
tR: Tempo de retenção

Pico t0: Tempo volume morto

t0 h A: Área do pico

A h: Altura do pico

Tempo

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Aula 01

Início do pico Fim do pico

Projeção de
linha de base

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Aula 01

 Problemas mais comuns em Fase Normal: